專利名稱：一種具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑的制作方法
技術領域：
本發明屬于藥物制劑領域，涉及鼻用原位凝膠劑，具體涉及一種具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑；該鼻用原位凝膠劑是一種含環境敏感型高分子的三七總皂苷水溶液，在常態下呈液體狀態，以鼻腔給藥方式使用后迅速在鼻黏膜表面形成凝膠，從而延緩藥物消除，提高生物利用度。
背景技術：
三七[Panax notoginseng (Burk) F. H. Chen]為五加科人參的干燥根及根莖，盛產于我國云南和廣西，是我國的名貴中藥，性味甘，微苦，溫，入肝、胃經，具有“散瘀止血、 消腫止痛”的功效。三七總皂苷(Saponins of Panax Notoginseng, PNS)是三七的主要有效部位，在三七粉中的百分含量為8. 2%19.4%，為白色或類白色無定型粉末。人參皂苷 RbURgl是三七總皂苷中含量最高的兩個活性單體，各占總皂苷約30%。隨著生活水平的提高、生活方式的改變以及人口老齡化加劇，心血管疾病已成為人類健康的最大、最嚴重威脅，是日益嚴重的公共衛生問題。PNS在抑制血栓形成，擴張外周血管，降低血壓，治療心腦血管疾病療效顯著。目前，PNS在臨床上的主要劑型為注射劑和口服片劑、膠囊、顆粒劑等，用于心、腦血管疾病及外科的治療。實踐顯示，以PNS為原料的血塞通注射劑療效確切，但成本高、需要專業人士完成、不能自主給藥、患者順應性差，容易導致過敏等不良反應，而且近年來中藥注射劑多次發生嚴重不良反應事件，顯示其存在嚴重安全隱患。現有技術中的以PNS為原料的口服制劑常用于腦路瘀阻、中風偏癱、胸悶心痛、腦血管后遺證及冠心病、心絞痛等的治療。但口服給藥療效并不理想，有實驗顯示，SD雄性大鼠灌胃給藥的人參皂苷Rbl絕對生物利用度為0. 71%，人參皂苷Rgl為3.四％ ；胃液的酸性環境、大腸菌叢產生的水解酶類如β-葡萄糖苷酶等及肝臟的首過作用均對其口服吸收有影響，腸道黏膜低透過性直接影響其口服吸收，生物利用度低，導致療效緩慢而不確切，臨床應用也受到一定限制。PNS 口服外的其他非注射給藥途徑的劑型逐漸受到關注。相關的專利有一種含三七總皂苷的中藥制劑及其制備方法[專利號CN02137^1. 8]及三七總皂苷脂質體及其制備方法[專利號 CN200310108690. 4]。現代醫學研究發現，黏膜給藥系統具有其獨特的優勢。鼻黏膜作為藥物吸收部位具有許多優點(1)鼻腔總容積約15 mL，鼻黏膜上纖毛眾多，吸收面積比較大，約為150 cm2 ； (2)內皮細胞間存在親水性孔道，水溶性藥物膜透過性高；C3)內皮細胞下有豐富的毛細血管和淋巴網，使體液迅速通過血管壁，便于吸收；(4)與消化道比較，鼻腔中的代謝酶較少，活性較低，環境PH值為5. 5-6. 5，接近中性，藥物穩定性提高；(5)可避開胃腸道的降解和首過效應等。因此，鼻腔給藥制劑具有吸收迅速完全、生物利用度高、給藥方便、易于被患者接受等優點。但由于鼻粘膜表明含有大量鼻纖毛和鼻黏液，它們的運動導致藥物在鼻黏膜表面滯留時間短僅為約15-30 min，藥物尚未被完全吸收就被清除，使其生物利用度收到一定影響。一些生物黏附制劑如鼻用凝膠劑雖然能延長藥物在鼻黏膜的滯留時間，但其黏度較高， 制備存在一定困難，而且其黏稠性一定程度上影響給藥劑量的準確性，并導致使用不便。將藥物制備成鼻用原位凝膠制劑可充分利用溶液與凝膠制劑上的特點，以液體形式給藥，噴入或滴入鼻腔后轉變為具有適宜生物黏附性的凝膠黏附于鼻黏膜上，可以延長藥物在鼻腔內的滯留時間，降低纖毛對藥物的清除率，減少藥液流失和對咽部的刺激，因而具有生物利用度高、給藥劑量準確、病人依從性良好等優點。因此，充分利用鼻腔給藥的優點，并克服其缺點，進行制劑處方改良的研究，具有廣闊的市場前景，對皂苷類藥物的研究具有重要的學術價值，對中藥現代化的發展也具有重要的參考意義。

發明內容
本發明的目的是克服現有技術的缺陷和不足，提供一種具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑。本發明提供的凝膠劑質地均勻細膩、粘稠度合適、能較長時間滯留于鼻腔表面且無鼻纖毛毒性。本發明的鼻用原位凝膠劑含有三七總皂苷和親水凝膠，以三七總皂苷中含量最高的兩種活性單體人參皂苷Rbl、人參皂苷Rgl作為指標性活性成分，并加入其他藥劑學上必要的輔料，如滲透壓調節劑、增稠劑、PH調節劑和/或防腐劑，所選輔料用量為藥劑學上所規定的常規用量。本發明的鼻用原位凝膠劑中，三七總皂苷的含量為10-500 mg/mL或10-500 mg/g ，優選含量為 50-300 mg/mL 或 50-300 mg/g。本發明的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑通過下述方法制備將三七總皂苷以微粉或分子形式均勻分散于親水凝膠基質中，制得具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑；所述的親水凝膠為離子敏感型的鼻用原位凝膠、溫度敏感型的鼻用原位凝膠或PH敏感型的鼻用原位凝膠。本發明中，所述的親水凝膠基質采用去乙酰結冷膠、海藻酸鈉、泊洛沙姆或卡波普制成。本發明中，離子敏感型的鼻用原位凝膠，在冷藏或室溫下是自由流動的液體，在鼻腔的離子環境下即可形成澄明的凝膠，其中的親水凝膠基質由下述一種或幾種材料制成去乙酰結冷膠、海藻酸鈉、黃原膠、卡拉膠(carrageenan gum)和/或文萊膠(Welan gum)，其中，去乙酰結冷膠的濃度為0. l-l%(w/w)，優選0. 2-0. 75%(w/w)，海藻酸鈉的濃度為0. 2-7% (w/w)，黃原膠的濃度為0. 2-6% (w/w)，卡拉膠的濃度為0. 3-8% (w/w)，文萊膠的濃度為 0. 1-10% (w/w)。本發明中，溫度敏感型的鼻用原位凝膠，為在冷藏或室溫下是自由流動的液體， 而在32-37°C體溫時可逆的形成澄明的凝膠，其中的親水凝膠基質由下述一種或幾種材料制成泊洛沙姆407 (Pluronic F127)、泊洛沙姆188 (Pluronic F68)、N-異丙基丙烯酰胺 (NiPAAM)共聚物、聚乙二醇-PLGA共聚物(PEG/PLGA)和/或乙基羥乙基纖維素(EHEC)， 其中，泊洛沙姆407的濃度為15-40%(w/w)，泊洛沙姆188的濃度為5-30%(w/w)，NiPAAM 共聚物的濃度為20-40%(w/w)，PEG-PLGA共聚物中的濃度為15-40%(w/w)，EHEC的濃度為
50. 1-2%(w/w)。本發明中，pH敏感型的鼻用原位凝膠，為在pH值低于4時是自由流動的液體，而在鼻腔PH環境下即可形成一定稠度的凝膠，其中的親水凝膠是pH敏感型的原位凝膠，親水凝膠基質由下述一種或幾種材料制成醋酸纖維素酞酸酯(CAP)、丙烯酸聚合物卡波普 (Carbopol)或聚乙烯縮醛二乙氨醋酸鹽(AEA)，其中，CAP的濃度為10-40%(w/w)，卡波普的濃度為0. 02-2%(w/w)，AEA的濃度為l-10%(w/w)；所述的卡波普的選自卡波普934P、卡波普 940、卡波普941、卡波普971P或卡波普974P。本發明中，所述的藥劑學上必要的輔料選自滲透壓調節劑、增稠劑、pH調節劑和/ 或防腐劑。所述的滲透壓調節劑選自甘露醇、山梨醇、枸櫞酸鈉和/或氯化鈉中的一種或數種，其用量為5-30%(w/w)。所述的增稠劑是纖維素類衍生物，選自甲基纖維素(MC)、羧甲基纖維素鈉 (CMC-Na)或羥丙基甲基纖維素(HPMC)，其中，MC的濃度為0. 5-10%(w/w), CMC-Na的濃度為 0. 5-10%(w/w)，HPMC的濃度為0. 1-10%(w/w)；由于纖維素類衍生物存在多種黏度，本發明根據需要選擇所需規格制備凝膠。所述的pH調節劑選自三乙醇胺、氫氧化鈉或氫氧化鉀，其中，調節離子敏感型和溫度敏感型鼻用原位凝膠制劑的PH至5. 0-8. 0，pH敏感型鼻用原位凝膠制劑的pH用 0. lmol/L鹽酸調節至4.0。所述的防腐劑選自羥苯酯類、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、醋酸洗必泰、苯扎氯銨、苯扎溴銨或硫柳汞及季銨化合物類陽離子表面活性劑。本發明中，所述的防腐劑不影響制劑的理化性質，在抑菌濃度范圍內不產生或僅產生較小的鼻黏膜刺激性和纖毛毒性。本發明制得的鼻用原位凝膠劑為一種含環境敏感型高分子的三七總皂苷水溶液， 在常態下呈液體狀態，在一定生理條件下具有相轉變性質，以鼻腔給藥方式使用后迅速在鼻黏膜表面形成凝膠，可延長藥物與鼻黏膜的接觸時間，從而延緩藥物消除，有利于提高藥物的生物利用度，同時又可避免高黏度的凝膠劑制備及患者使用的不便。本發明所述的鼻用凝膠制劑可以噴霧或滴鼻形式通過鼻腔給藥。本發明以PNS溶液為對照，進行黏度測定、體外釋放實驗，以及動物吸收和黏膜刺激性實驗，結果表明，本發明的鼻用凝膠制劑給藥方便，能在生理條件下形成具有生物黏附性的凝膠，藥物釋放理想，生物利用度高，對給藥部位無刺激性。本發明的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑具有如下的特點 1.凝膠制劑黏度測定結果顯示
離子敏感鼻用凝膠制劑的黏度隨著剪切力的增加呈現下降趨勢，有利于其在鼻黏膜表面均勻分布，而且在鼻纖毛的運動下藥物可以較易釋放；
PH敏感凝膠制劑在不同的pH值條件，以pH值4為臨界值，黏度發生顯著變化，存在明顯的相轉變過程；
溫度敏感凝膠制劑在32-37°C體溫范圍，制劑黏度發生顯著變化，存在明顯的相轉變過程。2.藥物釋放實驗結果顯示本發明的不同鼻用凝膠制劑與模擬鼻液反應，各凝膠制劑MOmin溶出百分比均低于藥物溶液。
3.黏膜毒性實驗結果顯示
離子敏感型0. 5%去乙酰結冷膠與pH敏感型0. 1%卡波普940制劑給藥4h后，蟾蜍上顎纖毛運動持續時間均為生理鹽水對照組的8496，光學顯微鏡觀察顯示黏膜面完整，纖毛數量多，絕大多數運動活躍，偶爾可觀察到靜止的纖毛。4.藥動學實驗結果顯示本發明原位凝膠能減緩藥物的消除，增加藥物的鼻腔吸收，本發明能增加藥物的生物利用度。5、本發明充分利用溶液與凝膠制劑的特點，以液體形式給藥，噴入或滴入鼻腔后轉變為具有適宜生物黏附性的凝膠黏附于鼻黏膜上，可延長藥物在鼻腔內的滯留時間，降低纖毛對藥物的清除率，減少藥液流失和對咽部的刺激，具有生物利用度高、給藥劑量準確、病人依從性良好等優點。


圖1是0. 5%去乙酰結冷膠原位凝膠、0.洲卡波普940原位凝膠與溶液制劑的人參皂苷Rgl體外釋放曲線圖，其中《 = 3。圖2是三七總皂苷靜脈注射、溶液制劑、0. 5%去乙酰結冷膠原位凝膠制劑與0. 1% 卡波普940原位凝膠制劑的家兔藥動學實驗人參皂苷Rgl血藥濃度-時間曲線圖，其中= 4。圖3是三七總皂苷靜脈注射、溶液制劑、0. 5%去乙酰結冷膠原位凝膠制劑與0. 1% 卡波普940原位凝膠制劑的家兔藥動學實驗人參皂苷Rbl血藥濃度-時間曲線圖，其中= 4。
具體實施例方式通過下列描述和實施例進行說明，但本發明的保護范圍，不局限于此。實施例1
分別按表2所示的配比制備離子敏感型三七總皂苷鼻用原位凝膠劑。表2離子敏感型三七總皂苷鼻用原位凝膠劑的處方(w/w%)
權利要求
1.一種具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑，其特征在于，由三七總皂苷、 親水凝膠以及藥劑學上必要的輔料制成，其中以三七總皂苷中的活性單體人參皂苷Rbl和人參皂苷Rgl作為指標性活性成分，所述的三七總皂苷的含量為10-500 mg/mL或10-500 mg/g ；所述的親水凝膠選自離子敏感型、溫度敏感型或pH敏感型親水凝膠。
2.根據權利要求1所述的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑，其特征在于，所述的三七總皂苷的含量為50-300 mg/mL或50-300 mg/g。
3.根據權利要求1所述的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑，其特征在于，所述的藥劑學上必要的輔料選自滲透壓調節劑、增稠劑、PH調節劑和/或防腐劑。
4.根據權利要求1所述的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑，其特征在于，所述的離子敏感型親水凝膠選自去乙酰結冷膠、海藻酸鈉、黃原膠、卡拉膠和/或文萊膠中的一種或數種，其中，去乙酰結冷膠的濃度為0. 1-1% w/w，海藻酸鈉的濃度為0. 2-7% w/w，黃原膠的濃度為0. 2-6% w/w，卡拉膠的濃度為0. 3-8% w/w，文萊膠的濃度為0. 1-10% w/wo
5.根據權利要求4所述的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑，其特征在于，所述的去乙酰結冷膠的濃度為0. 2-0. 75% w/w。
6.根據權利要求1所述的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑，其特征在于，所述的溫度敏感型親水凝膠選自泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、N-異丙基丙烯酰胺共聚物聚乙二醇-PLGA共聚物和/或乙基羥乙基纖維素(EHEC)中的一種或數種；其中，泊洛沙姆407的濃度為15-40% w/w，泊洛沙姆188的濃度為5-30% w/w, N-異丙基丙烯酰胺共聚物的濃度為20-40% w/w，聚乙二醇-PLGA共聚物中的濃度為15-40% w/w, EHEC的濃度為 0.1-2% w/w。
7.根據權利要求1所述的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑，其特征在于，所述的PH敏感型親水凝膠選自醋酸纖維素酞酸酯、丙烯酸聚合物卡波普或聚乙烯縮醛二乙氨醋酸鹽；其中，醋酸纖維素酞酸酯的濃度為10-40% w/w，丙烯酸聚合物卡波普的濃度為0. 02-2% w/w，聚乙烯縮醛二乙氨醋酸鹽的濃度為1-10% w/w。
8.根據權利要求3所述的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑，其特征在于，所述的滲透壓調節劑選自甘露醇、山梨醇、枸櫞酸鈉和/或氯化鈉中的一種或數種，其用量為5-30% w/w。
9.根據權利要求3所述的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑，其特征在于，所述的增稠劑選自甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉或羥丙基甲基纖維素；其中，甲基纖維素的濃度為0.5-10% w/w，羧甲基纖維素鈉的濃度為0.5-10% w/w，羥丙基甲基纖維素的濃度為 0. 1-10% w/w。
10.根據權利要求3所述的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑，其特征在于，所述的PH調節劑選自三乙醇胺、氫氧化鈉或氫氧化鉀。
11.根據權利要求1所述的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑，其特征在于，所述的離子敏感型或溫度敏感型鼻用原位凝膠制劑的PH調節至5. 0-8. 0 ；pH敏感型鼻用原位凝膠制劑的PH用0. lmol/L鹽酸調節至4. 0。
12.根據權利要求3所述的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑，其特征在于，所述的防腐劑選自羥苯酯類、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、醋酸洗必泰、苯扎氯銨、苯扎溴銨或硫柳汞及季銨化合物類陽離子表面活性劑。
13.權利要求1的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑的制備方法，其特征在于，通過下述步驟制備將三七總皂苷以微粉或分子形式均勻分散于親水凝膠基質中，制得具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑；所述的親水凝膠為離子敏感型的鼻用原位凝膠、溫度敏感型的鼻用原位凝膠或PH敏感型的鼻用原位凝膠。
14.權利要求1的具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑在制備鼻腔噴霧或滴鼻給藥制劑中的用途。
全文摘要
本發明屬于藥物制劑領域，涉及一種具有相轉變性質的三七總皂苷鼻用原位凝膠劑。本發明由三七總皂苷、離子敏感型、溫度敏感型或pH敏感型親水凝膠以及其他藥劑學上必要的輔料制成。本發明以液體形式給藥，噴入或滴入鼻腔后轉變為具有適宜生物黏附性的凝膠黏附于鼻黏膜上，可延長藥物在鼻腔內的滯留時間，降低纖毛對藥物的清除率，減少藥液流失和對咽部的刺激，具有生物利用度高、給藥劑量準確、病人依從性良好等優點；本發明具有廣闊的市場前景，對皂苷類藥物的研究具有重要的學術價值，對中藥現代化的發展也具有重要的參考意義。
文檔編號A61K36/258GK102462713SQ201010537639
公開日2012年5月23日 申請日期2010年11月9日 優先權日2010年11月9日
發明者方曉玲, 沙先誼, 羅潔琦 申請人:復旦大學