專利名稱：新的聚4-氨基-2-羥基-1-甲基化合物脲基衍生物的制備方法
技術領域：
本發明涉及取代吡咯的脲基衍生物的制備方法，以及含有這些化合物的藥物組合物的制備方法。
本發明的吡咯衍生物可視為遠霉素鹽酸鹽(Distamycin A)衍生物，它是一種具有以下結構的已知化合物
有關遠霉素鹽酸鹽(Distamycin A)的文獻包括，例如Nature 203，1064(1964)。
本發明提供了具有通式(Ⅰ)的取代羧基吡咯的脲基衍生物，及其藥用鹽。
其中每個m和n是相同的，為整數1～3，W是氧或硫。
每個B基團是相同的，它們是a)飽和或不飽和的、被一個或多個酸性基團取代的碳環或稠合碳環;
b)飽和或不飽和的，含一個或多個雜原子如氮、氧和硫，被一個或多個酸性基團取代的雜原子單環或雜原子雙環;
c)被一個或多個酸性基團取代的吡喃或呋喃糖基;
d)一個CH2(CHA)rCH2A基團，其中每個A基團可以相同或不同，為一個酸性基團;
若在B基團上存在兩個或多個的酸性基團，如在a)，b)，和c)中所定義，則這些酸性基團可以相同或不同。例如上述a)，b)，c)和d)給出的B的定義中的酸性基團可以選自以下幾種磺酸基，硫酸基，胺磺酰基，亞磺酸基，膦酸基，磷酸基，磷酰胺酸基和羧基即SO3H，SO4H，SO3NH2，SO2H，PO4H2，PO3H2，PO3NH3，和CO2H。
a)，b)，c)所定義的B基團，最好是被以上所述的1～3個酸性基團所取代。
如果B為上述a)所定義的一個環，則它可是例如苯基或萘基。若B為上述b)所定義的一個環時，則它可是例如四氫吡喃基或四氫呋喃基。若B為上述c)所定義的一個糖基時，則它可是由葡萄糖或核糖衍生而來的基團。如果B為上述d)所定義基團時，r最好為2。
已經提到，本發明也包括式(Ⅰ)化合物的藥用鹽。
藥用鹽可以是與無機堿，例如，鈉，鉀，鈣和鋁的氫氧化物形成的藥用鹽，也可是與有機堿形成的藥用鹽，所述的有機堿例如有賴氨酸、精氨酸，N-甲基-葡糖胺，三乙胺，三乙醇胺，二芐基胺，甲基芐基胺，二(2-乙基-己基)-胺，哌啶，N-乙基-哌啶，N，N-二乙基氨基乙胺，N-乙基嗎啉，β-苯乙基胺，N-芐基-β-苯乙基胺，N-芐基-N，N-二甲基胺，以及其它可使用的有機胺。
本發明中的較好化合物是這樣的式(Ⅰ)化合物或藥用鹽，其中m和n相同，為2;w為氧，每個B基團相同，它是a′)被1-3個酸性基團取代的不飽和碳環或稠合碳環;b′)被1-3個酸性基團取代的四氫吡喃或四氫呋喃環;c′)被1-3個酸性基團取代的葡糖呋喃糖基;
本發明中的較好化合物的具體例子是以下化合物及其藥用鹽，尤其是鈉鹽或鉀鹽8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，3-萘二磺酸);
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(3，5-萘二磺酸);
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，5-萘二磺酸);
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基-(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，4-萘二磺酸);
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，6-萘二磺酸);
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，6-萘二磺酸);
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，6-萘二磺酸);
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，5-萘二磺酸);
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1-萘磺酸);
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(3-萘磺酸);8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(5-萘磺酸)8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，3，5-萘三磺酸);
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，4，6-萘三磺酸);
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，4，6-萘三磺酸);
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，3，6-萘三磺酸);
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，3，5-萘三磺酸);
2，2′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2-脫氧-D-葡糖-6硫酸鹽);和2，2′(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2-脫氧-D-葡糖-6-磷酸鹽);
本發明的化合物及其鹽，可以利用式(Ⅱ)化合物或其鹽與式(Ⅲ)化合物反應來制備，必要時，鹽化如此得到的式(Ⅰ)化合物;和/或必要時，從該鹽制得游離的式(Ⅰ)化合物。
式中n和B如上所定義。
式中w如上述所定義，每個x基團，可以相同或不同，為一個好的離去基團。
式(Ⅱ)化合物的鹽，可以是與無機堿形成的鹽，例如上述本發明的藥用鹽，以鈉鹽和鉀鹽為佳。
根據x的含義，較好的離去基團是鹵素原子，特別是氯原子，或其它容易被置換的基團，如咪唑基，三唑基，對硝基苯酚或三氯苯酚。
式(Ⅱ)化合物或其鹽，與式(Ⅲ)化合物的反應是一個已知反應，可以用眾所周知的方法進行，例如可以按照有機化學中該類反應的條件，亦即脲衍生物的合成條件進行反應。較為理想的是當式(Ⅲ)化合物中x為鹵素，例如氯時，式(Ⅱ)化合物或其鹽與式(Ⅲ)化合物的分子比約為1∶1～1∶4時，反應最好在有機溶劑如二甲基亞礬，六亞甲基磷酰胺，二甲基乙酰胺，或二甲基甲酰胺或它的含水混合物，或水/二噁烷或水/甲苯混合物中，在有機堿如三乙胺或二異丙基乙胺，或在無機堿如碳酸氫鈉或乙酸鈉存在下進行反應。反應溫度范圍為-10～50℃，反應時間1～12小時。
按上述方法制備的式(Ⅰ)化合物可以用常規方法例如硅膠柱色譜法或氧化鋁色譜法，或者在有機溶劑如低碳脂肪醇或二甲基甲酰胺進行重結晶的方法來提純。
式(Ⅰ)化合物的鹽化方法，可以按本領域已知方法進行。
式(Ⅱ)化合物可以根據已知的方法制得。
例如式(Ⅱ)化合物可以按本領域已知方法，通過還原式(Ⅳ)化合物來制備。
其中
n和B如上所定義，式(Ⅳ)化合物可由式B-NH2所示的胺(其中B如上所定義)與式(Ⅴ)化合物反應來制備。
式中n和x如上所定義。
式B-NH2所示的胺與式(Ⅴ)化合物的反應是一個已知反應。
另一方面，式(Ⅳ)化合物(其中n為2或3)可通過多步反應制備，該多步反應包括式(Ⅵ)化合物與式B-NH2所示胺(其中B如上所定義)反應。
該反應以通常的方式進行，得到式(Ⅶ)化合物。
式Ⅶ化合物按通常方法還原后成為式Ⅷ化合物
式中B如上所定義，該化合物接著與式Ⅵ化合物反應，便得到式Ⅳ化合物，其中n為2。若需要n為3的式(Ⅳ)化合物，還需要進一步的還原和酰化步驟。
式(Ⅴ)化合物是已知化合物，可根據Heterocycles Vol 27，№8，1988，P1945-52，所述的方法來制備。
式(Ⅵ)化合物和式B-NH2所示的胺，是已知化合物，也可以按已知的方法容易地制得。
已經發現本發明化合物作為血管生成抑制劑具有活性。
血管生成抑制劑是指能夠抑制新的血管生成的制劑。因此本發明化合物在治療包括人在內的動物的幾種病狀時是有用的，其中新的血管生成是有害的，這些病狀例如包括慢性炎，糖尿病性視網膜病，牛皮癬，風濕病樣的關節炎和瘤生長。更具體講，在治療癌癥中，本發明化合物可以單獨給藥或與抗瘤藥物聯合給藥，例如，與阿霉素，鬼臼乙叉甙，氟脲嘧啶，mephalan，癌得星，爭光霉素，長春花堿或自力霉素聯合給藥。已經發現，本發明的化合物在根據Folkman方法(Nature，297，307(1982))的絨膜尿囊膜試驗中具有活性，從而表明，本發明化合物具有血管生成抑制活性。
此外，已經發現，本發明化合物具有TNFα-中和活性，因此它們可用于病理和/或治療用途，治療人類其中TNFα起有害作用的疾病。這些疾病包括惡病質，膿毒性休克，移植物一對一宿主疾病，愛滋病，大腦瘧，風濕性關節炎。例如，已經證明，本發明化合物在經處理的小鼠LM細胞上有抑制人類TNFα的細胞毒性活性。
本發明化合物可以按通常途徑給藥，例如通過靜脈注射或輸注而腸胃外給藥，皮下給藥，局部給藥或口服。劑量取決于患者的年令、體重和病情以及給藥途徑。
例如，對于成年人，適當的給藥劑量為每劑約0.5至約300mg，一天1-4次。
本發明的藥物組合物可以含有式(Ⅰ)化合物作為活性物質，并聯合有一種或多種藥用賦形劑和/或載體。本發明的藥物組合物按以下常規方法制備并以藥學上適當的形式給藥。例如，靜脈注射或輸注用液劑可以含有作為載體的例如無菌水，較好的是它們以無菌等張鹽水水溶液形式存在。肌內注射用懸浮劑或液劑可以含有活性化合物以及藥用載體，例如無菌水，橄欖油，油酸乙酯，二元醇如丙二醇，必要時，還含有適當量的利度卡因鹽酸鹽。
以局部應用的形式時，例如以乳膏、洗劑或糊劑的形式用于皮膚治療時，活性組分可以與常規的Oleoginous或乳化賦形劑混合。
固體口服劑如片劑和膠囊劑，可以含有活性化合物以及稀釋劑如乳糖，葡萄糖，纖維素，玉米淀粉和馬鈴薯淀粉;潤滑劑如硅石，滑石，硬脂酸，硬脂酸鈣或鎂和/或聚乙二醇;粘合劑如淀粉，阿拉伯樹膠，明膠，甲基纖維素，羧甲基纖維素，聚乙烯基吡咯烷酮;解聚劑如淀粉，藻酸，藻酸鹽，甘油酸淀粉鈉;泡騰混合物;雜料;甜劑，潤滑劑如卵磷脂，多乙氧基醚，硫酸月桂基酯;以及在藥物配方中使用的非毒性和藥理不活性物質。所述的藥物制劑可按已知方法制備，例如通過混合，造粒，壓片，涂糖或涂膜工藝來制備。
此外，本發明還提供了一種治療其中新的血管生長是有害的藥理疾病，例如，慢性炎，例如，在包括人類在內的哺乳動物中慢性炎，糖尿病性視網膜病，牛皮癬，風濕性關節炎和腫瘤，該方法包括給所述的哺乳動物服用本發明組合物。
本發明的任務還是這樣的產物，該產物含有式(Ⅰ)化合物或其藥用鹽，生理活性量的不同活性劑，作為聯合制劑同時、分別或連續用來治療其中TNFα起有害作用的疾病。
術語“聯合”治療方法意指包括分別和基本同時服用含有治療有效量的式(Ⅰ)化合物或其藥用鹽的組合物，以及含有治療有效量的不同藥物活性劑的藥物組合物。
可以與本發明化合物配制的活性劑，基于待治療的疾病，可以以聯合治療方法治行給藥，它們是例γ-球蛋白，免疫球蛋白和單克隆抗體產品，抗菌素和抗微生物劑產品，一般情況下，抗微生物劑含有青霉素以及氨基苷(例如慶大霉素，托普霉素)。但是，也可以采用幾種已知的附加劑如頭孢菌素。
以下實施例用于說明本發明，但不限制本發明。
實施例18，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，5-萘二磺酸)四鈉鹽在攪拌下，向8-(氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))(1，5-萘二磺酸)二鈉鹽鹽酸鹽(0.6g，1.02×10-3mol)于水(20ml)中的溶液，加入乙酸鈉(0.328g，4mol)。該溶液在冰鹽浴上冷卻至0℃，然后滴加光氣的甲苯溶液(1mol-4eg)。混合物在0℃攪拌1小時。真空下蒸除溶劑，用甲醇溶解殘余物，并且過濾。蒸發濾液，殘余物在硅膠柱上進行色譜分離，以二氯甲烷∶甲醇＝60∶40作為洗脫劑，得到0.16g標題化合物。
I.R.(KBr)cm-13440b，1660，1640，1585，1180，1030.
N.M.R.(DMSO-d6)δ3.84(3H，s);3.85(3H，s);6.80(1H，d);
7.07(2H，m);7.41(2H，m);7.92(2H，dd);
8.12(1H，s);8.27(1H，dd);9.07(1H，dd);
9.90(1H，bs);12.27(1H，bs).
F.A.B.-M.S.m/z 1209;M++1;1231，M++23;1128，M-80U.V.(H2O)nmλmax(E1%1cm)316(331)，229(478)按照類似的方法可以制備以下化合物8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(3-萘磺酸)二鈉鹽。
I.R.(KBr)cm-13430b，1640，1585，1200，1030N.M.R.(DMSO-d6)δ3.84(6H，s);6.86(1H，d);7.05(1H，d);
7.24(1H，d);7.35(1H，d);7.54(2H，m);
7.70(1H，dd);7.90(2H，m);8.15(1H，d);
8.15(1H，d);8.95(1H，bs);9.94(1H，bs);
10.03(1H，bs).
F.A.B.M.S.m/z 1005，M++H;1027，M++NaU.V.(H2O)nmλ max(E1%1cm)304(366)，226(1002)8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1-萘磺酸)二鈉鹽;
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(5-萘磺酸)二鈉鹽;
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，3-萘二磺酸)四鈉鹽;
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(3，5-萘二磺酸)四鈉鹽;
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，5-萘二磺酸)四鈉鹽;
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，4-萘二磺酸)四鈉鹽;
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，6-萘二磺酸)四鈉鹽，8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，6-萘二磺酸)四鈉鹽;
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(3，6-萘二磺酸)四鈉鹽;
實施例28，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，3，5-萘三磺酸)六鈉鹽;
在攪拌下，向8-(氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))(1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)鹽酸鹽(2.19g，3mmol)于水(60ml)和二噁烷(15ml)中的溶液中，加入乙酸鈉(0.984g，12mmol)。該溶液在冰浴上冷卻至8℃，然后，在1小時內，滴加入被9ml二噁烷稀釋的20%的光氣的甲苯溶液(3ml，6mmol)。
混合物于8℃攪拌2小時。真空下蒸除溶劑，用甲醇溶解殘余物。
濾出鹽以后，蒸發濾液，殘余物在硅膠柱上進行色譜分離，以二氯甲烷∶甲醇＝60∶40為洗脫劑，得到0.82g標題化合物。
I.R.(KBr)cm-13440b，1640，1590，1190，1030N.M.R.(DMSO-d6)δ3.80(3H，s);3.83(3H，s);6.80(1H，d);
7.06(2H，m);7.40(1H，d);7.88(1H，d);
7.99(1H，d);8.02(1H，bs);8.57(1H，d);
9.33(1H，d);9.91(1H，bs);12.29(1H，bs).
F.A.B.-M.Sm/z 1411，M--H;1389，M--NaU.V.(H2O)nmλmax(E1%1cm)311(266)，233(551).
按類似方法，可以制備以下化合物。
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，4，6-萘三磺酸)六鈉鹽;
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，4，6-萘三磺酸)六鈉鹽;
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，3，6-萘三磺酸)六鈉鹽;
8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，3，5-萘三磺酸)六鈉鹽;
實施例3.
8-(氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4醒2-吡咯)羰基亞氨基))(1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)鹽酸鹽。
將化合物8-(硝基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))(1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)(2.17g＝3mmols)溶解于水(120ml)和1N HCl(3ml)的混合物中，以pd(在碳上含量10%，900mg)為催化劑，在氫壓(50p.s.i.)下還原3小時。
濾出催化劑，濾液在真空下濃縮至干，得到2.1g標題化合物。
I.R.(KBr)cm-13440b，1640，1520，1190，1030N.M.R.(DMSO-d6)δ3.85(3H，s);3.90(3H，S);7.1(3H，m);
7.4(1H，d);7.95(2H，m);8.60(1H，d);
9.35(1H，d);10.1(4H，bs);12.3(1H，bs)實施例48-(硝基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))(1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)在攪拌下，向含有8-(氨基-(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基)(1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)的鹽酸鹽(1.824g，3mmols)，水(45ml)和1NNaOH(1ml)的溶液中，加入乙酸鈉(0.492g，6mmols)。
用水浴將溶液冷卻至5℃，然后在1小時內滴加含有4-硝基-N-甲基-2-吡咯)羰酰氯(0.567g，3mmols)和二噁烷(30ml)溶液，在5℃攪拌該混合物1小時，用1NHCl調至PH為4，真空下蒸發至干，殘余物用乙酸乙酯(30ml)攪拌處理1小時后，過濾，得到標題化合物(2.1g)。
I.R.(KBr)cm-13440b，1650，1520，1305，1195，1030N.M.R.(DMSO-d6;80M.Hz.)δ3.89(3H，s);3.99(3H，s);
7.18(1H，d);7.46(1H，d);7.70(1H，d);
8.02(2H，m);8.2(1H，d);8.63(1H，d);
9.41(1H，d);10.45(1H，b s);12.42(1H，b s).
實施例58-(氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基)(1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)鹽酸鹽。
含有8-(硝基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基)(1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)(1.803g＝3mmols)，水(120ml)和1NHCl(3ml)溶液，在pd(碳上含量10%，800g)催化劑作用下，在氫壓(50p.s.i)下還原4小時。
濾出催化劑，濾液在真空下濃縮至干，得到標題化合物1。8g。
I.R.(KBr)cm-13440b，1640，1520，1190，1030N.M.R.(DMSO-d6)δ3.9(3H，s);7.11(1H，d);7.29(1H，d);
8.6(1H，d);9.88(1H，d);10.04(3H，b s)12.39(1H，b s).8.04(2H，m);
實施例68-(硝基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基)(1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽。
在攪拌下，向含有8-氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽(1.347g＝3mmols)及水(45ml)溶液中，加入乙酸鈉(0.492g＝6mM)，溶液用冰浴冷卻至5℃，然后在1小時內滴加含有(4-硝基-N-甲基-2-吡咯)碳酰氨(0.943g＝5mmols)及二噁烷(45ml)溶液。混合物在5℃，攪拌3小時，用1NHCl調至pH為4，在真空下蒸發至干。
殘留液在乙酸乙酯(300ml)攪拌處理1小時，過濾，得到1.7g標題化合物。
I.R.(KBr)cm-13440b，1650，1530，1305，1200，1030.
N.M.R.(DMSO-d6)δ3.96(3H，s);7.84(1H，d);8.06(2H，m);
8.15(1H，d);8.63(1H，d);9.4(1H，d);
12.55(1H，bs).
實施例77，7′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，3-萘二磺酸)四鉀鹽。
在攪拌下，向含有7-(氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))(1，3-萘二磺酸二鉀鹽)鹽酸鹽(160mg，0.24mmols)，水(15ml)及二噁烷(10ml)溶液中，加入乙酸鉀(50mg，0.51mmols)，在室溫下，半小時內，滴加用二噁烷(2ml)稀釋的20%光氣的甲苯溶液(0.5ml＝1mmol)，該混合物在室溫下攪拌1小時。
在真空下蒸出溶劑，殘余物用硅膠柱進行色譜分離，用二氯甲烷甲醇水為40∶60∶6的溶液，作為洗脫劑，得到90mg標題化合物。
I.R.(KBr)cm-13450(b);1650;1580;1530;1190;1030N.M.R.(DMSO-d6)δ3.84(3H，s);3.87(3H，s);6.80(1H，d);
7.05(1H，d);7.18(1H，d);7.33(1H，d);
7.86(2H，m);8.00(1H，d);8.16(1H，bs);
8.21(1H，d);8.95(1H，bs);9.86(1H，bs)10.21(1H，bs).
U.V.(H2O)mmλmax(E1%1cm)316.8(371)，248.95(444)F.A.B.M.J.m/z1273(M++H);1311(M++K)使用類似方法可以得到下列化合物7，7′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1-萘磺酸)二鈉鹽;
7，7′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2-萘磺酸)二鈉鹽;
7，7′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(3-萘磺酸)二鈉鹽;
7，7′-羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(4-萘磺酸)二鈉鹽;
7，7′-羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯，羰基亞氨基))雙(2，3-萘二磺酸)四鈉鹽;
7，7′-羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，4-萘二磺酸)四鈉鹽;
7，7′-羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，5-萘二磺酸)四鈉鹽;
7，7′-羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，5-萘二磺酸)四鈉鹽;
7，7′-羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(3，5-萘二磺酸)四鈉鹽;
7，7′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，6-萘二磺酸)四鈉鹽;
7，7′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，6-萘二磺酸)四鈉鹽;
7，7′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(3，6-萘二磺酸)四鈉鹽;
7，7′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，3，5-萘三磺酸)六鈉鹽;
7，7′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，4，6-萘三磺酸)六鈉鹽;
7，7′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，3，6-萘三磺酸)六鈉鹽;
7，7′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，4，6-萘三磺酸)六鈉鹽。
7，7′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯-羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2，3，5-萘三磺酸)六鈉鹽;
2，2′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2-脫氧-D-葡糖-6-硫酸)二鈉鹽;
2，2′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(2-脫氧-D-葡糖-6-磷酸)二鈉鹽;
5，5′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(8-喹啉磺酸)二鈉鹽;
5，5′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(6-喹啉磺酸)二鈉鹽;
5，5′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(5，7-喹啉二磺酸)四鈉鹽;
5，5′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(6，8-喹啉二磺酸)四鈉鹽。
實施例88，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，3，5-萘三磺酸);
對含8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，3，5-萘三磺酸)六鈉鹽(400mg)水(10ml)的溶液，在Amberlite IR-120(H)柱上進行色譜分離，用水作為洗脫劑。
真空下蒸發至干，得到0.3g的標題化合物。
實施例9肌下注射劑 40mg/ml一種可注射的藥物制劑的制備方法是將40g8，8′-(羰基-雙(亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯)-羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯)羰基亞氨基))雙(1，3，5-萘三磺酸)六鈉鹽溶于作為注射劑的水(1000ml)中，每1～10ml裝瓶封口。
權利要求
1.一種制備式(I)化合物及其藥用鹽的方法，
式中每個m和n可以相同，或不同，為1-3的整數，W為氧或硫。每個B基團是相同的，它是a)一個飽和或不飽和的被一個或多個酸性基團取代的單環或稠環；b)飽和或不飽和，含有一個或多個雜原子如氮，氧和硫，被一個或多個酸性基團取代的雜原子單環或雜原子雙環；c)被一個或多個酸性基團取代的吡喃糖基或呋喃糖基。d)一個-CH2(CHA)nCH2A基團，其中A可相同或不同，是一個酸性基團，r為0，1，2；該方法包括式(Ⅱ)化合物或其鹽，與式(Ⅲ)化合物反應，必要時，鹽化如此獲得的式(Ⅰ)化合物；和/或必要時，從該鹽中制備游離的式(Ⅰ)化合物。
其中n和B如以上所定義，
其中W如上所定義，每個X基團可相同或不同，是一個好的離去基團。
2.按照權利要求1所述制備式(Ⅰ)化合物或其藥用鹽的方法，其中m和n是相同的，為2;w為氧;每個B基團是相同的，它是a′)被1-3個酸性基團取代的不飽和碳環或稠環;b′)被1-3個酸性基團取代的四氫吡喃或四氫呋喃環;c′)被1-3個酸性基團取代的葡糖呋喃基。
3.按照權利要求1和2的方法，其中每個酸性基團分別為磺酸基，硫酸基，胺磺酰基，亞磺酸基，膦酸基，磷酸基，磷酰胺酸基和羧基。
全文摘要
本發明涉及了制備具有式(I)結構的取代吡咯化合物，及其藥用鹽的方法。所述化合物適于用作血管生長抑制劑。式(I)中的取代基含義詳見說明書。
文檔編號A61P43/00GK1053230SQ91100140
公開日1991年7月24日 申請日期1991年1月10日 優先權日1990年1月11日
發明者尼古拉·莫吉利, 吉瓦尼·比索里, 阿來多·皮諾, 瑪利亞·格蘭迪, 瑪利那·西莫 申請人:法米塔利亞·卡洛·埃巴有限責任公司