專利名稱：一種治療癌癥的藥物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物及其制法，具體地說是涉及一種從中草藥的提取物制備成治療癌癥的藥物及其制備方法。
背景技術：
本發明人研究了6種番荔枝植物抗癌化學成分及其抗腫瘤作用，發現番荔枝乙醇提取物抗腫瘤活性最好，其在體內對移植性腫瘤S180的抑瘤率可達64％-68％，在體內對肝癌H22的抑瘤率可達59％-63％(國家教育部科技成果登記號360-03-2c370029-01)，該項研究成果2003年獲江蘇省科技進步獎三等獎。在此基礎上，本發明人進一步研究了番荔枝乙醇提取物的抗癌有效部位，從中提取出抗癌有效部位二氯甲烷提取物；并發明抗癌有效部位二氯甲烷提取物與靈芝孢子粉提取物配伍應用，能保持較高抗癌活性的同時降低毒性。

發明內容
1.發明目的。
本發明的目的在于尋找番茄枝植物抗癌活性的有效部位，將該有效部位的乙醇提取物與靈芝孢子粉的醇和水的提取物合并面制備的抗癌藥物，該藥物不僅具有高的抗癌活性，而且大大降低了藥物的毒性。
本發明的另一個目的是提供該抗癌藥物的制備方法。
2.技術方案本發明人進一步研究，發現其抗癌的活性部位主要是本發明的番荔枝種子乙醇提取物的二氯甲烷提取物。同時，本發明人進一步研究發現，將番荔枝種子乙醇提取物的二氯甲烷提取物和靈芝孢子粉的醇和水的提取物合并制備的藥物，既保持了藥物較高的抗癌活性，又降低了藥物毒性。
一種治療癌癥的藥物，它是由番荔枝種子2-5份和靈芝孢子粉1-3份，按此重量份配比而制成的藥劑。
一種制備治療癌癥藥物的方法，它包括下列步驟(1)取番荔枝種子2-5份，經烘干粉碎，用95％的乙醇冷浸三次，每次浸泡24-30小時后，經旋轉蒸發器回收乙醇，濃縮，得浸膏；取其浸膏經二氯甲烷萃取，回收二氯甲烷，得到二氯甲烷提取物浸膏，備用；(2)取破壁靈芝孢子粉1-3份加8倍量75％-80％乙醇回流提取兩次，每次1.5-2小時，回收乙醇，濃縮，得乙醇提取物浸膏，備用；藥渣加12倍水，煎煮2次，每次2小時，水提液濃縮至浸膏，備用；(3)將步驟(1)得到的番荔枝種子乙醇提取物的二氯甲烷提取物浸膏和步驟(2)得到的破壁靈芝孢子粉的乙醇提取物浸膏及水提取物浸膏合并，混勻，干燥，得本發明藥物；該藥物即為本發明的番荔枝種子和靈芝孢子粉的醇和水的提取物。
上述步驟(1)中用分析純二氯甲烷萃取連續4次后，用旋轉蒸發器回收二氯甲烷。
3.有益效果根據本發明人的研究，番荔枝種子乙醇提取物的二氯甲烷提取物和破壁靈芝孢子粉的乙醇提取物及水提取物混合后制成的抗癌藥物，對HepS移植性肝癌有顯著的抑制作用，3個劑量組的抑瘤率分別達65.89％、63.57％、60.47％，其抗癌活性顯著比靈芝孢子粉為高。本發明藥物不同劑量組的瘤重抑制率與5-Fu陽性化療組的瘤重抑制率相當接近，說明本發明藥物的抗腫瘤效價較高，在制備抗癌藥物中具有廣泛的應用前景。同時，在毒性試驗中，本發明藥物顯著降低了番荔枝種子提取物的毒性。
具體實施例方式實施例1抗癌藥物一種治療癌癥的藥物，它是由下列重量份配比的原料制成的藥劑番茄枝種子3份，靈芝孢子粉2份。
實施例2抗癌藥物一種治療癌癥的藥物，它是由下列重量份配比的原料制成的藥劑番茄枝種子4份，靈芝孢子粉2.5份實施例3一種治療癌癥藥物的制備方法，其制備步驟為(1)取番荔枝種子10kg，經烘干粉碎，用8倍量的95％工業乙醇80L冷浸三次，每次浸泡24小時后，經旋轉蒸發器回收乙醇，濃縮得浸膏約2004.2g，取其中1800g放入分液漏斗，加入分析純的二氯甲烷1500ml，搖勻、靜置、待分層后，倒去上層液，將下層部分經二氯甲烷萃取4次，再經旋轉蒸發回收二氯甲烷，得到二氯甲烷提取物浸膏617.1g；(2)取破壁靈芝孢子粉5kg，加8倍量的80％乙醇回流提取兩次，每次2小時，回收乙醇，得乙醇提取物浸膏214.5g，備用；藥渣加12倍水，煎煮2次，每次2小時，水提液濃縮至浸膏451.5g，備用；(3)將番荔枝種子乙醇提取物的二氯甲烷提取物浸膏、破壁靈芝孢子粉的乙醇提取物浸膏和水提取物浸膏合并，混勻，干燥，得藥；該藥即為本發明的番荔枝種子和靈芝孢子粉的醇和水的提取物。
實施例4藥物的抗癌作用1.實驗方法1.1移殖性肝癌模型的建立參考徐叔云第三版的藥理實驗方法學。選取腫瘤生長旺盛的肝癌HepS腹水小鼠，頸椎脫臼處死，置凈化臺中，消毒腹部皮膚，抽取腹水，苔盼藍染色后光鏡下觀察活瘤細胞數＞95％，以1∶3注射用水稀釋，制成瘤細胞懸液，含HepS肝癌細胞1×108個/ml。取肝癌細胞0.2ml，即每只小鼠注射HepS肝癌細胞約5×107個于小鼠前肢右腋皮下，制造移植性肝癌的實體瘤模型。
1.2動物分組取昆明種(KM)小鼠80只，隨機分成模型陰性對照組10只及實驗組70只。實驗組分為5-Fu陽性化療組，本發明藥物(番靈)劑量低、中、高治療組，靈芝孢子粉(靈粉)劑量低、中、高治療組，每組小鼠10只。處死前稱每只小鼠重量。
1.3動物給藥在造模后第二天，各組給藥模型陰性對照組每天灌服0.2ml的1％CMC-Na生理鹽水生理鹽水；5-Fu陽性化療組小鼠按40mg·kg-1d-15-Fu腹腔注射，即每只小鼠約給藥0.2ml配制好濃度的5-Fu溶液；各治療組小鼠分別以不同濃度實驗藥物灌胃，即按制藥所配好的藥物濃度，即低、中、高三劑量組，分別每天每只小鼠給藥0.2ml，連用7天。
1.4取材及處理于停藥24小時后處死所有小鼠，稱體重。完整剝取實驗組小鼠的皮下腫瘤，稱瘤量，計算抑制率。
抑制率(IR)＝(模型陰性對照組平均瘤重-治療組平均瘤重)/模型陰性對照組平均瘤重×100％。
1.5觀測指標比較各組下列指標的差異瘤重抑制率。
2.實驗結果番荔枝種子和靈芝孢子粉的醇和水的提取物(番靈)，對HepS移植性肝癌有顯著的抑制作用，3個劑量組的抑瘤率分別達65.89％、63.57％、60.47％，其抗癌活性顯著比靈芝孢子粉(靈粉)為高。本發明藥物不同劑量組的瘤重抑制率與5-Fu陽性化療組的瘤重抑制率相當接近，說明本發明藥物的抗腫瘤效價較高，在制備抗癌藥物中具有廣泛的應用前景。
表1 番荔枝種子和靈芝孢子粉的醇和水的提取物(番靈)對移植性肝癌HepS的抑制作用

★與模型組相比P＜0.01；※與化療組相比P＞0.05；*與靈粉組相比P＜0.01實施例5抗癌藥物的毒性反應1實驗材料1.1動物由南京中醫藥大學動物實驗中心提供一級昆明種小鼠，體重18-22克，雌雄各半，預檢飼養一周。按寇氏改良法計算LD50。
1.2藥物番荔枝種子乙醇提取物的二氯甲烷提取物(番甲)，番荔枝種子和靈芝孢子粉的醇和水的提取物(番荔枝種子乙醇提取物的二氯甲烷提取物、破壁靈芝孢子粉的乙醇提取物和水提取物的混合物)(番靈)，配制成所需濃度的混懸液，放4℃冰箱保存。
2.LD50測定2.1 LD50測定過程番甲組60只小鼠隨機分6組，每組10只，雌雄各半，番荔枝種子乙醇提取物的二氯甲烷部位提取物(番甲)6個劑量組分別為300、225、168、、126、95、71mg·kg-1，組間劑量比值為1∶0.75。給藥前小鼠禁食16小時，自由飲水。以適量淀粉糊精加入研磨配制成所需濃度的混懸液，ig給藥，其中300mg·kg-1劑量為可能給予的最大濃度。
番靈組50只小鼠隨機分5組，每組10只，雌雄各半，番荔枝種子和靈芝孢子粉的醇和水的提取物(番靈)5個劑量組分別為2.0、1.6、1.28、1.02、0.82g·kg-1，組間劑量比值為1∶0.8。給藥前小鼠禁食16小時，自由飲水。配制成所需濃度的混懸液，ig給藥，其中2.0g·kg-1劑量為可能給予的最大濃度。
給藥后立即觀察和記錄動物的中毒癥狀和死亡情況，觀察期為7天，按寇氏改良法計算LD50。
2.2LD50測定結果表2 小鼠經口灌胃番甲藥的死亡情況、體重變化

表3 小鼠經口灌胃番靈藥的死亡情況、體重變化

上述結果，按寇氏改良法計算半數致死量(LD50)，結果如下番甲藥的LD50＝log-1[Xm-i×(∑p-0.5)]＝log-1[log 300-0.125×(3.2-0.5)]≈137.97mg/kg；番靈藥的LD50＝log-1[Xm-i×(∑p-0.5)]＝log-1[log 2-0.0969×(2.6-0.5)]≈1.25g/kg。兩組比較有非常顯著性差異，說明番荔枝種子和靈芝孢子粉的醇和水的提取物(番荔枝種子乙醇提取物的二氯甲烷提取物、破壁靈芝孢子粉的乙醇提取物和水提取物的混合物)(番靈)明顯降低了番荔枝種子乙醇提取物的二氯甲烷提取物(番甲)的毒性。
權利要求
1.一種治療癌癥的藥物，其特征在于它是由下述重量份配比的原料制成的藥劑番荔枝種子2-5份，靈芝孢子粉1-3份。
2.一種制備權利要求1所述藥物的方法，其特征是包括下列步驟(1)取番荔枝種子，經烘干粉碎，用乙醇冷浸，回收乙醇，濃縮，得浸膏，經二氯甲烷萃取，回收二氯甲烷，得到二氯甲烷提取物浸膏，備用；(2)取破壁靈芝孢子粉加乙醇回流提取，回收乙醇，濃縮，得乙醇提取物浸膏，備用；藥渣加水煎煮，水提液濃縮至浸膏，備用；(3)將步驟(1)得到的番荔枝種子乙醇提取物的二氯甲烷提取物浸膏和步驟(2)破壁靈芝孢子粉的乙醇提取物浸膏及水提取物浸膏進行合并，混勻，干燥，得本發明藥物。
3.根據權利要求2所述的藥物制備方法，其特征在于在步驟(1)中用95％濃度的工業乙醇冷浸3次，，每次浸泡24-30小時，經旋轉蒸發器回收乙醇。
4.根據權利要求2所述的藥物制備方法，其特征在于步驟(1)中用二氯甲烷連續萃取4次，然后用旋轉蒸發器回收二氯甲烷。
5.根據權利要求2所述的藥物制備方法，其特征在于在步驟(2)中，取破壁靈芝孢子粉加8倍量75％-80％的乙醇回流提取兩次，每次1.5-2小時；在藥渣中加12倍水，煎煮2次，每次2小時。
全文摘要
本發明公開了一種治療癌癥的藥物及其制備方法。該藥物由番荔枝種子和靈芝孢子粉的醇和水的提取物制成；其制備方法是首先取番茄枝種子烘干粉碎→用乙醇浸泡→濃縮得浸膏→經二氯甲烷萃取得二氯甲烷提取物浸膏A；其次取破壁靈芝孢子粉加乙醇回流提取→回收乙醇→濃縮得乙醇提取物浸膏B；藥渣加水煎煮，水提液濃縮至浸膏C；然后將上述浸膏A、B、C、合并、混勻、干燥，制得本發明藥物。該藥物具有補虛解毒之功效，具有顯著的抑瘤作用，對HepS移植性肝癌的抑癌率達60.47％－65.89％，該藥物的毒性低而抗腫瘤效價較高，在制備抗癌藥物中具有廣泛的應用前景。
文檔編號A61K36/074GK1739681SQ200510041538
公開日2006年3月1日 申請日期2005年8月19日 優先權日2005年8月19日
發明者章永紅 申請人:南京中醫藥大學