專利名稱：一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑及制備方法
技術領域：
本發明涉及一種治療仔豬黃白痢的獸藥制劑，尤其涉及一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑及制備方法。
背景技術：
仔豬黃痢、白痢是由埃希氏大腸桿菌引起的吮乳仔豬多發性腸道傳染病，統稱大腸桿菌病，該病分布很廣，凡養母豬的地方均有發生，是造成仔豬育成率低、影響養豬業經濟效益的主要傳染病之一。其中仔豬黃痢是初生仔豬常發的一種急性腸道傳染病，主要發生于7日齡以內仔豬，發病率和死亡率都很高，由于發病急、病程短，日齡小，給治療工作帶來很大困難。仔豬白痢，主要發生于14 30日齡仔豬，發病率高，死亡率低，經適時治療， 雖大部分都可治愈，但在一定程度上阻礙仔豬的生長發育。目前，該病的治療主要以各種抗菌藥物為主，如青霉素、土霉素、氯霉素、喹諾酮等，但是由于抗生素的長期反復使用以及濫用，致使該病原微生物對產生了耐藥性，而且藥物殘留影響了畜產品的品質，一方面對動物性產品的正常出口貿易造成極大障礙，另一方面也給消費者健康帶來危害。因此，尋找無(低)藥殘、無(低)污染、能替代抗生素的促生長物質的研究作為重點。中草藥長期使用較少產生耐藥性，不易出現殘留、抗藥性、毒副作用，具有安全性和可靠性，是其它抗生素無可比擬的。多年來，一些獸醫工作者在前人的經驗基礎上，努力探索，在用中草藥防治仔豬黃、白痢方面進行了有益的嘗試。張敬禮等報道止痢湯、郁金散、白頭翁湯對仔豬大腸桿菌病有較好的預防和治療作用，對仔豬黃痢的治愈率在93%以上.有效率100% ；對仔豬自痢病的治愈率在100%。秦四海報道，由白頭翁、黃柏、秦皮、黃連、黃芪、當歸、板栗雄花絮等組成的自擬中草藥復方具有較好的治療仔豬黃痢效果。陳錦嬋試驗表明用白頭翁12g、 龍膽草6g、黃連5g、紅糖3g制成每毫升Ig生藥的濃縮液，以每頭仔豬灌服預先溫熱好的中藥濃縮液3mL，每天2次，連用3d的劑量，對仔豬黃痢的治療有著很好的效果，治愈率高達 93.9%。王自然報道自擬中草藥復方在治療仔豬黃痢時能獲得較好的療效(人工致病治愈率83. 3 %、臨床治愈率86. 9% )，與敏感的抗菌西藥相當，且按8倍劑量使用仍較安全。李義端報道，中藥“腹瀉一劑靈”對豬腹瀉有較好的治療效果，平均治愈率達96. 6%。張曉駟等在乳仔豬日糧中添加中草藥提取物“福樂寶I號”，能較好地預防乳仔豬腹瀉，特別在仔豬斷乳期間，其增重與防腹瀉效果優于抗生素。楊宏斌等報道了新型復方中藥制劑沙大凈(注射用針劑及口服液)對治療仔豬黃、白痢的臨床試驗研究，其藥劑成分包括穿心蓮、白扁豆、黨參、蒼術、秦皮等天然中藥為原料，結果表明沙大凈口服液組對黃痢的治愈率是83%、有效率是92%，，白痢的治愈率是88 %、有效率是95 % ；沙大凈注射液組對黃痢的治愈率是92 %、有效率是96 %，對白痢的治愈率是93%、有效率是98%。趙恒章等報道了中草藥注射液對仔豬大腸桿菌病治療效果研究，中草藥注射液由河南職業技術師范學院中獸醫教研室大腸桿菌病課題組研制，主要由石膏、滑石、白頭翁、蒼術等11味中藥組成，其對仔豬黃白痢最高治愈率97.6%，平均為97. 3%。孫志良等研究了復方白毛藤注射液對大腸桿菌的體外抑菌作用和對豬大腸桿菌病的治療效果。郭小清等報道了中藥防治仔豬黃白痢的臨床療效試驗，其中痢可安注射液主要成分為硫酸小檗堿等，其高、中、低劑量治療仔豬黃白痢的治愈率分別為93. 02%, 91. 67%,80. 00%，有效率分別為97. 67%,94. 44%,86. 67%。唐朝忠等報道了中藥仔痢停對仔豬黃痢和白痢的治療試驗，其中中藥藥仔痢停是以白頭翁、黨參、干姜、黃柏、黃芩、赤芍、白芍、秦皮、郁金、茵陳、麥芽、藿香按3 :2:1:3:2:1:1:2:1:1:1:2 比例組方，混合，粉碎，過篩，拌料飼喂母豬，結果顯示，中藥組治愈率為88.5%，有效率為 100%。黃猛等采用白頭翁、黃柏、秦皮、龍膽草等10多味中草藥制成散劑，治療仔豬黃白痢等仔豬腹瀉疾病，治愈率達94. 5%。朱兆榮等篩選出白頭翁、黃芪和甘草等中草藥制成 “十滴水”治療仔豬黃白痢的口服液克痢王，以氟哌酸和慶大霉素作西藥對照組，結果表明克痢王組治愈率為94. 01%和96. 34%。李文雄等報道了中西醫結合防治仔豬黃白痢，中藥方劑為方劑白頭翁20g、黃連10g、黃柏10g、苦參10g、龍膽草5g、穿心蓮15g、二花IOg, 給藥方式為拌食。黃品呂等報道了中草藥治療仔豬黃白痢，采用鐵莧菜90g、大飛揚60g 煎汁灌服。吳俊偉等申請專利“一種用于治療仔豬黃白痢的復方中藥制劑”，專利申請號 200710093250. 4，發明公開了一種用于治療仔豬黃白痢的復方中藥制劑-金根注射液，它是由金銀花和板藍根兩味藥材經現代中藥提取工藝，提取分離其有效成分精制而成，用于治療仔豬黃白痢不會產生耐藥性，且無藥物殘留，無毒副作用。另外還有許多文獻報道了喂服治療仔豬黃白痢的中藥組方，其中分別含有黃芩、白頭翁、秦皮、鐵莧菜、苦參以及穿心蓮。我國的中獸藥研究開發雖已取得一定的進展，且在一定范圍內對畜禽疾病的控制取得了較好的效果，積累了豐富的臨床經驗。并具有一定的理論基礎。中草藥不但可以組成復方，也可單方使用。從目前豬病的復雜性來看，中草藥在豬病防治方面的優點越發突顯出來，尤其是在混合感染的治療和預防以及食品安全方面。隨著中草藥制劑技術的發展，作為傳統而經典的豬病防治手段，中草藥必將大放異彩。目前，我國已經有多種產品出現.一些中草藥復方制劑已經在豬疾病的防治方面發揮了重要作用。有的治療效果與某些抗生素相當，有的效果還優于抗生素。因此，開展中草藥防治豬病不但是可持續畜牧業發展的要求， 也是人們對提高生活質量和綠色食品消費的要求。在取得成效的同時，也存在一些問題。從總體上看，數量多、水平低、缺乏規模化生產和自主創新能力，研究開發費用投入不足，缺乏市場經濟和國際國內規范方面的經驗。尤其是添加量大、有效成分不明、作用機理不清、作用效果不穩定、劑型單一，口服劑型偏多而注射劑型偏少缺乏毒理安全方面的研究、原料和質量控制標準不完備等。《中華人民共和國獸藥規范》(1992年版，二部)中的中藥制劑共1 個方，其中1 個為散劑，占82.4%，其余為流浸膏、膏劑、酊劑、針劑等。盡管地方標準也有一些其它劑型，但數量有限，合格的不多。這樣不僅滿足不了國內外市場的需要.更談不上走出國門與世界同類先進產品相抗衡。鑒于以上問題，急需研制安全、高效、方便的新藥。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種低毒、高效、無殘留的治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑。
本發明所要解決的另一個技術問題是提供該復方注射劑的制備方法。為解決上述問題，本發明所述的ー種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑， 其特征在于該注射劑每IOOmL注射液中包括以下原輔料純度彡98%的硫酸黃連素10 50mg 純度彡98%的黃芩苷50 200mg30 1白頭翁提取物250 400mg 30 1秦皮提取物250 400mg50 1四季青提取物250 400mg 30 1鐵莧菜提取物250 500mg20 1苦參提取物250 500mg 20 1穿心蓮提取物250 500mg吐溫-800.75mL亞硫酸鈉 lOOmg。該注射劑為pH = 7. 5的水針注射劑。如上所述的ー種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑的制備方法，包括以下 步驟(1)按配比稱量各組分；(2)將黃芩苷、硫酸黃蓮素分別溶于20mL的注射用水中，用氫氧化鈉調pH至 7. O 7. 5，并使所述黃芩苷和硫酸黃蓮素溶解，分別得到黃芩苷溶液和硫酸黃蓮素溶液；(3)將所述黃芩苷溶液和硫酸黃蓮素溶液混合后，加入50mL注射用水，再依次加 入30 1白頭翁提取物、30 1秦皮提取物、50 1四季青提取物、30 1鐵莧菜提取物、 20 1苦參提取物、20 1穿心蓮提取物，使其溶解，得到混合物溶液；(4)在所述混合物溶液中加入1 2g活性炭，煮沸10 15分鐘，自然冷卻后，經 離心、抽濾，得到濾液;(5)在所述濾液中依次加入吐溫-80、亞硫酸鈉，混合均勻后加90 95mL注射用 水，并用氫氧化鈉調PH值至7. 5，然后定容至IOOmL ；最后分裝于西林瓶中，經沸水浴加熱滅 菌后，即得水針注射劑。所述30 1白頭翁提取物的制備方法包括以下步驟(1)將白頭翁的根粉碎后過40 80目篩，得到白頭翁粉；(2)在所述白頭翁粉中加入其質量7倍的蒸餾水，用氫氧化鈉調pH至10，在80°C 溫度下浸潤4h后過濾，得到濾液A和沉淀物A ；(3)在所述沉淀物A中加入其質量5倍的蒸餾水，用氫氧化鈉調pH至10，在80°C 溫度下浸潤池后過濾，得到濾液B和沉淀物B ；(4)合并所述濾液A和所述濾液B，并用氫氧化鈉調pH至7，經減壓濃縮后，得到濃 縮液；(5)所述濃縮液按其體積的3倍加入質量濃度為95%的乙醇，沉淀24h后，離心 lOmin，得到上清液；(6)所述上清液依次經減壓濃縮、干燥后，即得膏狀的白頭翁提取物。所述30 1秦皮提取物的制備方法包括以下步驟(1)將秦皮粉碎后過40 80目篩，得到秦皮粉；(2)在所述秦皮粉中按其質量的3倍加入質量濃度為95%的乙醇，在沸水浴中回 流《!，經減壓回收乙醇后，得到濃縮藥物；(3)所述濃縮藥物按其質量的1 2倍加蒸餾水沉淀，經真空干燥后，即得膏狀的 秦皮提取物。
所述50 1四季青提取物的制備方法包括以下步驟(1)將四季青粉碎后過40 80目篩，得到四季青粉；(2)將所述四季青粉按其質量的8 10倍加蒸餾水，在100°C溫度下煎煮3次，每次煮沸1小時，過濾后，合并濾液；(3)所述濾液經減壓濃縮后，得到濃縮液；該濃縮液按其體積的8 10倍加入質量濃度為95%的乙醇，攪勻，放置3 5天后，回收乙醇，得到上清液；(4)所述上清液依次經減壓濃縮至糖漿狀后，用質量濃度為95%的乙醇分次提取，合并提取液；所述提取液放置1天，過濾減壓回收乙醇，即得糖漿狀的四季青提取物。所述30 1鐵莧菜提取物的制備方法包括以下步驟(1)將鐵莧菜干燥全草粉碎后過40 80目篩，得到鐵莧菜粉；(2)在所述鐵莧菜粉中按其質量的10倍加入蒸餾水，在100°C溫度下煎煮2 3 次，每次煮沸1小時，過濾后，合并濾液；(3)所述濾液經減壓濃縮、干燥后，即得鐵莧菜提取物。所述20 1苦參提取物的制備方法包括以下步驟(1)將苦參粉碎后過40 80目篩，得到苦參粉；(2)在所述苦參粉中加入其質量7倍、質量濃度為95%的乙醇，回流他，得到濾液 A和沉淀物A ；(3)在所述沉淀物A中加入其質量5倍、質量濃度為95%的乙醇，回流4h，得到濾液B和沉淀物B ；(4)合并所述濾液A和所述濾液B，經減壓濃縮回收乙醇后，得到濃縮液；該濃縮液干燥后，即得膏狀的苦參提取物。所述20 1穿心蓮提取物的制備方法包括以下步驟(1)將穿心蓮粉碎后過40 80目篩，得到穿心蓮粉；(2)在所述穿心蓮粉中加入其質量7倍的蒸餾水，在80°C溫度下浸潤4h后過濾， 得到濾液A和沉淀物A ；(3)在所述沉淀物A中加入其質量5倍的蒸餾水，在80°C溫度下浸潤池后過濾， 得到濾液B和沉淀物B ；(4)合并所述濾液A和所述濾液B，經減壓濃縮后，得到濃縮液；(5)所述濃縮液按其體積的3倍加入質量濃度為95%的乙醇，沉淀24h后，離心 lOmin，得到上清液；(6)所述上清液依次經減壓濃縮、干燥后，即得膏狀的穿心蓮提取物。本發明與現有技術相比具有以下優點1、本發明采用具有止瀉、退熱作用的中草藥黃連、黃芩、白頭翁、秦皮、鐵莧菜、四季青、苦參和穿心蓮，根據其有效成分的性質，對處方各藥有效成分進行提取，通過單味中草藥有效提取物的體外抑菌試驗和組方進行體外抑菌試驗，篩選出防治仔豬黃白痢的最佳配方，提取物的量經脫色、過濾、除菌、添加穩定劑，按照中藥制劑學要求制備成復方注射液，作為治療仔豬黃白痢的新制劑。通過外觀和理化性質、無菌、粘膜刺激、肌肉刺激、溶血和熱原檢查，表明注射劑符合制劑學要求。2、本發明對各有效成分提取物對致病性大腸桿菌進行進行體外抑菌活性研究，結果硫酸黃連素純品、黃芩苷純品、30 1白頭翁提取物、30 1秦皮提取物、50 1四季青、 30 1鐵莧菜提取物、20 1苦參提取物和20 1穿心蓮提取物對仔豬致病性大腸桿菌均有較好的抑菌效果，其中硫酸黃連素純品和黃芩苷純品的體外抑菌效果最為顯著。結果見表1。表1八種中草藥提取物對八種大腸桿菌的MIC測定結果(mg/ml)
權利要求
1.一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑，其特征在于該注射劑每IOOmL注射液中包括以下原輔料純度彡98%的硫酸黃連素10 50mg 純度彡98%的黃芩苷50 200mg30 1白頭翁提取物250 400mg 30 1秦皮提取物250 400mg50 1四季青提取物250 400mg 30 1鐵莧菜提取物250 500mg20 1苦參提取物250 500mg 20 1穿心蓮提取物250 500mg吐溫-800. 75mL 亞硫酸鈉lOOmg。
2.如權利要求1所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑，其特征在于 該注射劑為pH = 7. 5的水針注射劑。
3.如權利要求2所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑的制備方法，包括以下步驟(1)按配比稱量各組分；(2)將黃芩苷、硫酸黃蓮素分別溶于20mL的注射用水中，用氫氧化鈉調pH至7.0 7. 5，并使所述黃芩苷和硫酸黃蓮素溶解，分別得到黃芩苷溶液和硫酸黃蓮素溶液；(3)將所述黃芩苷溶液和硫酸黃蓮素溶液混合后，加入50mL注射用水，再依次加入 30 1白頭翁提取物、30 1秦皮提取物、50 1四季青提取物、30 1鐵莧菜提取物、 20 1苦參提取物、20 1穿心蓮提取物，使其溶解，得到混合物溶液；(4)在所述混合物溶液中加入1 2g活性炭，煮沸10 15分鐘，自然冷卻后，經離心、 抽濾，得到濾液；(5)在所述濾液中依次加入吐溫-80、亞硫酸鈉，混合均勻后加90 95mL注射用水，并用氫氧化鈉調PH值至7. 5，然后定容至IOOmL ；最后分裝于西林瓶中，經沸水浴加熱滅菌后， 即得水針注射劑。
4.如權利要求1或3所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑，其特征在于所述30 1白頭翁提取物的制備方法包括以下步驟(1)將白頭翁的根粉碎后過40 80目篩，得到白頭翁粉；(2)在所述白頭翁粉中加入其質量7倍的蒸餾水，用氫氧化鈉調pH至10，在80°C溫度下浸潤4h后過濾，得到濾液A和沉淀物A ；(3)在所述沉淀物A中加入其質量5倍的蒸餾水，用氫氧化鈉調pH至10，在80°C溫度下浸潤池后過濾，得到濾液B和沉淀物B ；(4)合并所述濾液A和所述濾液B，并用氫氧化鈉調pH至7，經減壓濃縮后，得到濃縮液；(5)所述濃縮液按其體積的3倍加入質量濃度為95%的乙醇，沉淀24h后，離心lOmin， 得到上清液；(6)所述上清液經減壓濃縮后，即得膏狀的白頭翁提取物。
5.如權利要求1或3所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑，其特征在于所述30 1秦皮提取物的制備方法包括以下步驟(1)將秦皮粉碎后過40 80目篩，得到秦皮粉；(2)在所述秦皮粉中按其質量的3倍加入質量濃度為95%的乙醇，在沸水浴中回流他， 經減壓回收乙醇后，得到濃縮藥物；(3)所述濃縮藥物按其質量的1 2倍加蒸餾水沉淀，經真空干燥后，即得膏狀的秦皮提取物。
6.如權利要求1或3所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑，其特征在于所述50 1四季青提取物的制備方法包括以下步驟(1)將四季青粉碎后過40 80目篩，得到四季青粉；(2)將所述四季青粉按其質量的8 10倍加蒸餾水，在100°C溫度下煎煮3次，每次煮沸1小時，過濾后，合并濾液；(3)所述濾液經減壓濃縮后，得到濃縮液；該濃縮液按其體積的8 10倍加入質量濃度為95%的乙醇，攪勻，放置3 5天后，回收乙醇，得到上清液；(4)所述上清液依次經減壓濃縮至糖漿狀后，用質量濃度為95%的乙醇分次提取，合并提取液；所述提取液放置1天，過濾減壓回收乙醇，即得糖漿狀的四季青提取物。
7.如權利要求1或3所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑，其特征在于所述30 1鐵莧菜提取物的制備方法包括以下步驟(1)將鐵莧菜干燥全草粉碎后過40 80目篩，得到鐵莧菜粉；(2)在所述鐵莧菜粉中按其質量的10倍加入蒸餾水，在100°C溫度下煎煮2 3次，每次煮沸1小時，過濾后，合并濾液；(3)所述濾液經減壓濃縮后，即得鐵莧菜提取物。
8.如權利要求1或3所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑，其特征在于所述20 1苦參提取物的制備方法包括以下步驟(1)將苦參粉碎后過40 80目篩，得到苦參粉；(2)在所述苦參粉中加入其質量7倍、質量濃度為95%的乙醇，回流他，得到濾液A和沉淀物A;(3)在所述沉淀物A中加入其質量5倍、質量濃度為95%的乙醇，回流4h，得到濾液B 和沉淀物B ；(4)合并所述濾液A和所述濾液B，經減壓濃縮回收乙醇后，即得膏狀的苦參提取物。
9.如權利要求1或3所述的一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑，其特征在于所述20 1穿心蓮提取物的制備方法包括以下步驟(1)將穿心蓮粉碎后過40 80目篩，得到穿心蓮粉；(2)在所述穿心蓮粉中加入其質量7倍的蒸餾水，在80°C溫度下浸潤4h后過濾，得到濾液A和沉淀物A ；(3)在所述沉淀物A中加入其質量5倍的蒸餾水，在80°C溫度下浸潤池后過濾，得到濾液B和沉淀物B ；(4)合并所述濾液A和所述濾液B，經減壓濃縮后，得到濃縮液；(5)所述濃縮液按其體積的3倍加入質量濃度為95%的乙醇，沉淀24h后，離心IOmin， 得到上清液；(6)所述上清液經減壓濃縮后，即得膏狀的穿心蓮提取物。
全文摘要
本發明涉及一種治療仔豬黃白痢的中藥提取物復方注射劑，該注射劑每100ml注射液中包括以下原輔料純度≥98％的硫酸黃連素10～50mg；純度≥98％的黃芩苷50～200mg；30∶1白頭翁提取物250～400mg；30∶1秦皮提取物250～400mg；50∶1四季青提取物250～400mg；30∶1鐵莧菜提取物250～500mg；20∶1苦參提取物250～500mg；20∶1穿心蓮提取物250～500mg；吐溫-800.75ml；亞硫酸鈉100mg。本發明采用具有止瀉、退熱作用的中草藥黃連、黃芩、白頭翁、秦皮、鐵莧菜、四季青、苦參和穿心蓮，根據其有效成分的性質，對處方各藥有效成分進行提取，配制出符合制劑學要求的復方注射劑，該注射劑純中藥組合無污染，給藥方便，療效非常顯著。
文檔編號A61K36/71GK102274303SQ201110192438
公開日2011年12月14日 申請日期2011年7月5日 優先權日2011年7月5日
發明者常亮, 李 杰, 楊明, 王珂, 薛健, 豆林濤, 賀奮義, 賀泂杰, 郭慧琳, 陳伯祥 申請人:甘肅省畜牧獸醫研究所