專利名稱：2-[n-取代胺烷基]-5-(e)-烷亞甲基或苯亞甲基環戊酮衍生物及有關使用方法
技術領域：
本發明專利包括2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-烷亞甲基環戊酮類，2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-芳亞甲基環戊酮類及其衍生物，以及作為抗炎、鎮痛、抗癌藥物的應用。
目前已知倍半萜內酯類，如堆心菊內酯(Helenalin)，薄菊靈(Tenulin)和Aromafin，有很強的抗炎(T.G.Waddellet.al.J.pharm.Sci，1979，68∶715;I.H.Hall.et.al.J.Pharm.Sci，198069∶537)和抗癌活性(K.H.Lec.et.al.cancerRes，1971，31∶1649，S.M.Kapchanetal.J.Med.Chem.1971，14∶1147)，S.M.Kapchen等人證明在倍半萜類化合物中只要有α-亞甲基-γ-內酯結構存在，就有較明顯的抗癌活性，有證據表明(G.A.Howieetal，J.Med.Chem.1976，19∶309)α-亞甲基-γ-內酯中α-亞甲基碳上被烷基取化后，化合物具有低毒性，高選擇性，而且，I.H.Hall等人發現倍半萜內酯尤其是偽愈創木內酯(Pseudoguaianolide)及吉馬內酯類(Germacrenolide)衍生物中α-亞甲基-γ-內酯部分對角叉菜膠誘發的水腫炎癥有抑制活性。
這些天然化合物有很強的活性，同時發現很多含有α-亞甲基-γ-內酯部分的非倍半萜內酯類也被證實有活性。但因為這些化合物天然產量很低、化學合成很困難、沒有醫療價值。簡化其結構并保留抗癌活性，這項工作已嘗試多次，但沒有成功(J.M.Cassadyetal.，J.MedChem.1978，21819)前人工作還發現一些烷亞甲基和(或)烷氨基取代的環戊酮類和環戊烯酮類化合物。
美國專利NO.3，269，942(Wilkes)發明一種方法，保護液體溶媒不受粘液制造微生物的感染，包括向該媒介中加入一種2，5-雙(N，N-二烷基胺基-甲基)環戊酮化合物。不同于本專利，Wilkes沒有指明他的化合物的藥物用途而用于粘液制造微生物的毒性研究。
美國專利No.3，852，296(Viterbo等)發現有選擇性的2，3-雙取代的環戊酮和2-環戊烯酮Mannich堿化合物，這些化合物具有利膽、利尿、抗炎、鎮痛活性。與本發明專利不同的是，Viterbo等人的化合物也沒有5-(E)-烷亞甲基團，而在環的3位上有一個取代基。
美國專利No.4，766，147(Noyori等)發現了以PGA和PGE為模體的用于抗癌制劑的化合物，包括5-烷亞甲基-4-取代-2-環戊烯酮類，5-(1-羥基-脂肪族碳氫化合物)-4-取代-2-環戊烯酮類及5-烷亞甲基-3-羥基-4-取代環戊酮類化合物。不同于本發明專利，Noyori等人發現的化合物沒有Mannich堿基團。
美國專利No.4，904，640，(Markert等)發明2-烷亞甲基-3，3，5和3，5，5-三甲基環戊酮，并用作香料。不同于本專利，Markert等人的化合物不含Mannich堿基團，取代發生在環的3位上，而且這些化合物均無藥理活性。
基于前人的所有發現，很有必要尋找一個結構簡單，易于合成，并且有極強抗炎、抗癌活性的倍半萜內酯類化合物。
本發明專利為適合上述要求，提供一類5-烷亞甲基或5-芳亞甲基環戊酮類化合物，在2位碳原子上引入N-取代氨烷基及其衍生基團取代物。本發明專利的化合物保留了倍半萜內酯的很強的抗炎及抗癌活性并且還顯示出鎮痛活性，后面將敘及便于醫療與應用的該類化合物的鹽類。
本發明專利提供了治療哺乳動物的炎癥、疼痛及癌癥的方法，并且本發明專利中的每一個化合物至少提供了一個有療效的劑量。
本發明還提供了預防(防治)哺乳動物的炎癥及疼痛的方法，并且每一個化合物至少提供了一個有療效的劑量。
本發明專利的目的是提供制備新的2-(N-取代胺烷基)-5-(E)-芳亞甲基環戊酮類化合物及其衍生物的方法。
本發明的目的是提供2-(N-取代-氨烷基)-5-(E)-烷亞甲基環戊酮類化合物，2-(N-取代-氨烷基)-5-(E)芳亞甲基環戊酮類化合物以及二者衍生物，至少有一個或多個有療效的劑量用于治療或防治哺乳動物的炎癥。
本發明的目的是提供2-(N-取代-氨烷基)-5-(E)-烷亞甲基環戊酮類化合物，2-(N-取代-氨烷基)-5-(E)-芳亞甲基環戊酮類化合物以及二者衍生物，至少有一個或多個有療效的劑量用于治療或預防哺乳動物的疼痛。
本發明專利的目的是提供2-(N-取代-氨烷基)-5-(E)-烷亞基環戊酮類化合物，2-(N-取代-氨烷基)-5-(E)-芳亞甲基環戊酮類化合物及二者衍生物，至少有一個或多個有療效的劑量用于治療哺乳動物的癌癥。
本發明專利的目的是提供經篩選的，至少有一個或多個有療效的劑量的2-(N-取代-氨烷基)-5-(E)-烷亞甲基環戊酮，2-(N-取代-氨烷基)-5-(E)-芳亞甲基環戊酮及二者衍生物用于治療哺乳動物炎癥的方法。
本發明專利的目的是提供經篩選的至少有一個或多個有療效的劑量的2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-烷亞甲基環戊酮、2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-芳亞甲基環戊酮及二者衍生物用于治療哺乳動物的疼痛。
本發明專利的目的是提供經篩選的至少有一個或多個有療效劑量的2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-烷亞甲基環戊酮、2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-芳亞甲基環戊酮及二者的衍生物，用于治療哺乳動物的癌癥。
本發明專利的目的是提供經篩選的至少有一個或多個有療效劑量的2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-烷亞甲基環戊酮、2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-芳亞甲基環戊酮及二者的衍生物，用于治療防治哺乳動物的炎證。
本發明專利的目的是提供經篩選的至少有一個或多個有療效劑量的2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-烷亞甲基環戊酮、2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-芳亞甲基環戊酮及二者的衍生物用于預防哺乳動物的疼痛。
本發明的目的是由以下實施方案實現的。
本發明專利中“哺乳動物”包括人類。
“預防用途”指用于抵抗或防治疾病或構成疾病的因素。
本發明專利提供的化合物2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-烷亞甲基環戊酮類、2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-芳亞甲基環戊酮類以及二者衍生物，具有的化學結構(A)
此處X亞甲基或1，2-亞乙基R1二甲氨基、二乙氨基、1-四氫吡咯基、1-哌嗪基、4-嗎啉基、苯胺基或取代苯胺基;
R3氫、1～9個碳原子的直鏈或支鏈烷基、芳基、芳烷基;
R21～9個碳原子的直鏈或支鏈烷基、芳基、芳烷基。
R2最好是氫原子或同R3基團相同，而如果R2、R3均為亞乙基，會縮合而形成一個五元環。
R4氫、甲基、乙基、烯丙基、芐基、取代芐基、環戊酮基、取代環戊酮基、環戊烯(1)酮基、或取代的環戊烯(1)酮基。其中芳基為苯基或苯基被1個或多個甲氧基、羥基、亞甲基二氧基、氦、溴、氟、乙氧羰基甲氧基、苯甲酰氧基、烷基或混合基團取代。
本發明專利中的化合物(A)，此處，X為亞甲基可通過一個中間體制得，這個中間化合物可用一個醛類或酮類化合物(1)反應制得，化合物(1)具有分子結構為
此處R3為氫、1～9個碳原子的直鏈或支鏈烷基、芳基、芳烷基;
R2為氫、1～9個碳原子的直鏈或支鏈烷基、芳基、芳烷基，R2最好是氫原子或與R3基團相同，但如果R2、R3同為1，2-亞乙基，他們將縮合形成一個五元環，其中的芳基為苯基或苯基被一個或多個甲氧基、羥基、亞甲基二氧基、氦、溴、氟、乙氧羰基甲氧基、苯甲酰氧基、烷基或混合基團取代，化合物(1)于環戊酮在強堿存在下反應溫度20℃至70℃，最好是25℃至35℃，生成中間體(2)，分子結構為
此處R2、R3與化合物(1)中所述相同。
中間體(2)(R2＝H)可用環戊酮嗎啉烯胺與醛通過Stock烯胺反應制得，應用熟知的Stock烯胺反應，在溶劑(如苯、甲苯)中回流進行4到45小時，生成的水用分水器分離，所生成水的體積表明反應進行的程度，進行Stock烯胺反應的醛類最好具有較大的立體效應，反應活性低的如2-芳基丙醛、2-甲酰苯氧基乙酸乙酯等本發明專利中化合物(A)，X為亞甲基，R1為二甲胺基、二乙胺基、1-哌嗪基、1-四氫吡咯基或4-嗎啉基;R4為氫、環烷基、環烯基、烷基、芳基、取代芳基。可用中間體2-乙氧甲酰基環戊酮(3)
中間體(3)可用氯甲酸乙酯與環戊酮嗎啉烯胺制得。由中間體(3)再與鹵低烷或2-取代氨基鹵烷縮合再水解，脫羧得取代的環戊酮中間體(4)，分子結構為
中間化合物(4)與具有分子結構(1)的酮或醛在低級烷醇，如甲醇中，強堿存在下，室溫反應生成一個2-R4取代-5-(E)-烷亞甲基或芳亞甲基取代環戊酮中間體(5)，分子式
中間化合物(5)與胺類和多聚甲醛進行Mannich反應生成化合物(A)，此處的X為亞甲基、R1為二甲氨基、二乙氨基、1-四氫吡咯基、1-哌嗪基、或4-嗎啉基，R2、R3同上所述，R4可以是甲基、乙基、烯丙基、芐基、取代芐基、環戊基、取代環戊基、環戊烯(1)基、或取代的環戊烯(1)基。反應在低級烷醇如乙醇中進行，并加幾滴濃鹽酸回流。
如果中間化合物(5)是液體，從反應產物可直接得到較高純度的化合物(A)鹽酸鹽，在大多數情況下，沒有必要進一步純化。如果中間體化合物(5)是固體，向得到的游離堿醚萃取液中加入乙醇氯化氫液，可得到化合物(A)的鹽酸鹽，然后進行純化。
本發明專利中的化合物(A)(其中R1是苯胺基或取代苯胺基，X為亞甲基，R4被取代或未被取代，R2、R3同上所述)可以用化合物(A)(其中R1為二甲氨基、或4-嗎啉基，X為亞甲基，R4被取代或未被取代，R2、R3同上所述)與苯胺或取代苯胺在50%乙醇中室溫反應2小時，反應物(A)中的二甲氨基或4-嗎啉基與苯胺或取代苯胺發生交換反應，產物為一固體沉淀，可用重結晶法純化。
本專利中化合物(A)(其中X為1，2-亞乙基，R4為氫、烯丙基、環戊烯(1)基或取代的環戊烯(1)基)可通過將化合物(6)(分子式
其中R4為氫、亞乙基、亞環戊烯基或取代亞環戊烯基)滴加到氨基鈉的有機懸浮液(如干燥的甲苯)中，在低于30℃溫度攪拌至無氨氣放出，再加入化合物(7)(分子式為R1CH2CH2Cl(7)其中，R1為二甲氨基、二乙氨基、1-四氫吡咯基，1-哌嗪基、或4-嗎啉基)。混合反應液攪拌下加熱至約100℃2小時，產物用乙醚萃取，得到中間化合物(8)分子式
其中，R1和上述化合物(7)相同，R4為氫、烯丙基、環戊烯(1)基、或取代的環戊烯(1)基。中間化合物(8)再與具有分子結構(1)的醛或酮在堿存在下，室溫時在低級烷醇(如乙醇)中攪拌12小時，反應產物可用乙醚萃，取得到化合物(A)，其中X1，2-亞乙基，R1、R2和R3同上所述，R4可以是氫、烯丙基、環戊烯(1)基或取代的環戊烯(1)基。
本發明專利的化合物(A)被用作哺乳動物抗炎、鎮痛、抗癌制劑。化合物(A)的一類化合物中，有關其抗癌活性的理化反應已得到測定。本發明專利的化合物(A)，其中X為亞甲基，R4為氫、雙取代的氨甲基基團可以充當隱蔽的α-亞甲基團，并可生成穩定的鹽。因此，雙取代氨甲基團可以進行脫氨基作用，這樣形成的α-亞甲基環戊酮可與細胞中親核試劑(如含硫酶類)進行Michael加成反應，抑制癌細胞生長。Michael加成反應已為大家所熟知。5-(E)-烷亞甲基或芳亞甲基總的說來均有很強抗癌活性，并有一定程度的選擇性，區別正常細胞和不同的癌細胞。
至于化合物(A)的抗炎活性，當(A)中X為亞甲基時脫氨基形成的α-亞甲基環戊酮是不必要的。因此，R4位最好有一個取代基團，這樣化合物不至于因脫氨而形成α亞甲基基團，從而不致有細胞毒的付反應。化合物(A)(X為亞甲基，R4被取代)的抗癌活性比化合物(A)(X＝亞甲基，R4＝H)要低，然而R4取代胺甲基的化合物(A)有較高的選擇性。
另外，專利中的化合物(A)中的X為1，2-亞甲基，將N-取代-氨甲基換成N-取代-氨乙基后，可減少脫氨作用形成的α-亞甲基基團，從而減少細胞毒性，然而，化合物(A)中X為1，2-亞乙基，R4為環戊烯(1)基或取代的環戊烯(1)基時，通過不同的理化反應顯示出極強的抗癌活性。
本發明專利提供了化合物(A)用于治療炎癥、疼痛和癌癥的一個或多個有療效劑量的方法，化合物(A)使用途徑有口服、靜注、直腸給藥、肌注及皮下給藥。有治療效果的口服劑量為10-300mg/kg體重，有治療效果的非消化道給藥劑量為5～50mg/kg體重。根據不同病情，有經驗的醫師可以決定化合物的有效劑量及給藥次數，本化合物的急毒很低。
用于服用的化合物(A)的制劑可以是片劑、丸劑、粉劑及顆粒劑，配制藥物的添加劑可以是蔗糖、淀粉、纖維素、潤滑劑、甜精、色素及穩定劑。化合物(A)的針劑制品可以是水針、混懸劑或乳劑。由于化合物在水中溶解度有限，注射制品應隨用隨配。
值得注意的是本專利的化合物(A)可用作預防藥物，本專利提供了化合物(A)的一個或多個有效劑量用于預防哺乳動物的炎癥及疼痛。
下面將通過具體實施例對本發明作進一步描述例1下面例子給出了制備2-二甲基氨甲基-5-(E)-戊亞甲基環己酮鹽酸鹽的制備方法。
42.0g環戊酮(0.5摩爾)與1%氫氧化鈉80ml混合成溶液攪拌，約30℃時，加入21.5g(0.25摩爾)正戊醇，攪拌2小時后，反應液用30%乙酸中和，然后用90ml苯萃取三次，合并萃取液中加入1.0ml磷酸。所得到的混合物回流2小時(配備分水回流管)反應產物旋轉蒸發得到油狀殘渣，油狀殘渣經蒸餾得28.5g黃色2-(E)-戊亞甲基環戊酮液體。該中間化合物在6mmHg壓力下沸點為98-102℃。
7.6g2-(E)-戊亞甲基環戊酮中加入4.1g二甲胺鹽酸鹽、3.7g多聚甲醛、20ml乙醇及5滴濃鹽酸，回流2小時后，混合物再加入2.2g多聚甲醛，然后再回流2小時，反應產物用活性炭處理，過濾，濾液放置過夜，過濾，用含有少量無水乙醇的冷的乙醚洗滌，得到7.7g2-二甲胺甲基-5-(E)-戊亞甲基環戊酮鹽酸鹽，無色片狀，產物的m.p.156-157℃。
例2本例給出了2-二甲胺基甲基-5-(E)-辛亞甲基環戊酮鹽酸鹽的制備方法。
反應步驟同例子1類似，正辛醇與環戊酮在1%氫氧化鈉存在下反應制得2-(E)-辛亞甲基環戊酮，該中間化合物的沸點為120-125℃(4mmHg)。隨后的Mannich反應制得2-二甲胺基甲基-5-(E)-辛亞甲基環戊酮鹽酸鹽，熔點為138-140℃。
例3本例子給出2-二甲胺基甲基-5-(1-甲基亞乙基)環戊酮鹽酸鹽的制備方法。
190ml丙酮、36.0g氫氧化鈉加到600ml水中攪拌，加入60.0g環戊酮，室溫攪拌12小時。反應混合物用36%乙酸中和，再用乙醚萃取三次，每次60ml，合并萃取液用無水硫酸鎂干燥、蒸發乙醚得到殘留物，殘留物經蒸餾得到62.6g2-(1-甲基亞乙基)環戊酮，無色液體，沸點為85-88℃(10mmHg)。繼之的Mannich反應得到2-二甲胺基甲基-5-(1-甲基亞乙基)環戊酮鹽酸鹽，熔點為173-175℃。
例4本例給出2-二甲胺基甲基-5-(E)-(2-乙氧羰基甲氧基-苯亞甲基)環戊酮鹽酸鹽的制備方法。
21.2g環戊酮嗎啉烯胺、24.0g2-甲酰苯氧基乙酸乙酯及200ml苯混合液，配備回流分水裝置回流4.5小時，反應溶液冷卻至室溫，用35ml6摩爾鹽酸處理，室溫攪拌2小時，分離出苯層，水層用苯萃取兩次，每次15ml，分離的苯層及萃取苯用5%碳酸氫鈉及飽和氯化鈉溶液洗滌，用無水硫酸鎂干燥、減壓蒸出溶劑，得到27.6g近乎純產物，該產物用50%乙醇重結晶得到26.0g2-(E)-(2-乙氧羰基甲氧基-苯亞甲基)環戊酮，為無色晶體。結晶產物的熔點為77-79℃。
2.0g二甲胺鹽酸鹽，1.8g聚甲醛，3.0ml乙醇及3滴濃鹽酸加到6.5g2-(E)-(2-乙氧羰基甲氧基-苯亞甲基)環戊酮中，回流約2小時，再向反應液加入0.7g多聚甲醛繼續回流2小時，減壓蒸去溶劑，得到糖漿狀殘渣，殘渣中加入100ml水，攪拌約10分鐘，過濾，濾液用10%碳酸鈉調節至pH＝9，乙醚萃取3次，每次20ml，水層再用10%碳酸鈉液調至pH＝11，用乙醚萃取2次，每次20ml，萃取合并液用無水硫酸鎂干燥，用HCl乙醇液處理、過濾后得到4.7g產物，用無水乙醇-丙酮重結晶得到4.2g2-二甲胺基甲基-5-(E)-(2-乙氧羰基甲氧基-苯亞甲基)環戊酮鹽酸鹽，呈白色粉末，熔點為124-126℃。
例5本實例給出2-二甲胺基甲基-5-(E)-[2-(3-溴基苯基)-丙亞甲基]環戊酮鹽酸鹽的制備方法。
反應步驟同例4類似，2-(3-溴苯基)丙醛與環戊酮嗎啉烯胺反應生成2-(E)-[2-(3-溴苯基)丙亞甲基]環戊酮，為黃色液體，該中間化合物的沸點為165-170℃(1mmHg)。繼之的Mannich反應生成2-二甲胺基甲基-5-(E)-[2-(3-溴苯基)丙亞甲基]環戊酮鹽酸鹽，產物熔點為135-137℃。
例6本實例給出2-二甲胺基甲基-5-(E)-苯亞甲基環戊酮鹽酸鹽的制備方法。
反應步驟和例4相似，苯甲醛與環戊酮嗎啉烯胺反應生成2-(E)-苯亞甲基環戊酮，產物熔點為67-69℃。繼之的Mannich反應生成2-二甲胺基甲基-5-(E)-苯亞甲基環戊酮鹽酸鹽，產物熔點為153-155℃。
例7本實例給出2-二甲胺基甲基-5-(E)-[(2-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮鹽酸鹽的制備方法。
反應步驟同例4類似，2-甲氧基苯甲醛與環戊酮嗎啉烯胺反應生成2-(E)-[(2-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮，測得產物熔點為80-82℃，繼之的Mannich反應生成2-二甲胺基甲基-5-(E)-[(2-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮鹽酸鹽，產物熔點為167-169℃。
例8本實例給出2-二甲胺基甲基-5-(E)-[(4-羥基)苯亞甲基]環戊酮鹽酸鹽的制備方法。
步驟與例4類似，4-羥基苯甲醛與環戊酮嗎啉烯胺反應生成2-(E)-[(4-羥基)苯亞甲基]環戊酮，產物熔點為188-190℃。繼之的Mannich反應生成2-二甲胺基甲基-5-(E)-[(4-羥基)苯亞甲基]環戊酮鹽酸鹽，產物熔點為174-175℃。
例9本實例給出2-[(4-氯苯基)胺甲基]-5-(E)-[(4-羥基)苯亞甲基]環戊酮的制備方法。
例8終產物1毫摩爾加50%乙醇12ml制成溶液，1.0毫摩爾4-氯苯胺加50%乙醇12ml制成溶液，二者混合后室溫放置2小時，生成沉淀過濾收集，水洗滌，用乙酸乙酯重結晶，得到2-[(4-氯苯基)胺甲基]-5-(E)-[(2-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮，m.p.＝155-157℃。
例10本實例給出2-嗎啉基甲基-5-(E)-[(2-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮鹽酸鹽的制備方法。
例7終產物5毫摩爾加入25ml50%乙醇制成溶液，二者混合后室溫攪拌2小時，生成的沉淀過濾收集，用鹽酸乙醇重結晶得到2-嗎啉基甲基-5-(E)-[(2-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮鹽酸鹽，產物熔點為155-156℃。
例11本實例給出2-芐基-2-二甲胺基甲基-5-(E)-[(2-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮鹽酸鹽制備方法。
氯芐與環戊酮吡咯烷烯胺進行Stock反應生成2-芐基環戊酮，產物沸點為121-125℃(2mmHg)。32毫摩爾2-芐基環戊酮與48毫摩爾2-甲氧基苯甲醛配成20ml甲醇液攪拌，加入12ml5%氫氧化鈉。室溫攪拌2小時后，反應液冷卻，生成的沉淀以過濾方式收集，用水洗滌，得到的固體用乙醇重結晶得到2-芐基-5-(E)-[(2-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮，產物熔點為65-67℃。該中間產物20毫摩爾、38毫摩爾二甲胺鹽酸鹽酸、2.4g聚甲醛及4滴濃鹽酸加至50ml乙醇中，攪拌回流12小時后，再加入1.8g多聚甲醛，繼續回流12小時，反應液減壓濃縮得到殘留物，向其中加入100ml水，室溫攪拌15分鐘，用過濾法除去沉淀，得到的濾液用10%氫氧化鈉調至約pH10，用乙醚萃取，萃取液用無水硫酸鎂干燥，用鹽酸乙醇酸化得到沉淀，沉淀用甲醇丙酮混合溶媒重結晶得2-芐基-2-二甲胺基甲基-5-(E)-[(2-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮鹽酸鹽，產物熔點為185-187℃。
例12本實例給出2-芐基-2-二甲胺基甲基-5-(E)-[(4-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮鹽酸鹽的制備方法。
反應步驟和例11相似，所不同的是以4-甲氧基苯甲醛替代2-甲氧基苯甲醛，得到產物2-芐基-2-二甲胺基甲氧基-5-(E)-[(4-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮鹽酸鹽，其熔點為164-166℃。
例13本實例給出2-(1-環戊烯(1)基)-2-二甲胺基乙基-5-(E)-[(4-氯)苯亞甲基]環戊酮鹽酸鹽的制備方法。
1.90g(41毫摩爾)鈉氨制成60ml干燥甲苯混懸液攪拌下低于30℃時滴加5.5g(35毫摩爾)2-環戊亞甲基環戊酮，反應混合物室溫攪拌至無氨氣逸出，然后滴加3.8g(32毫摩爾)2-二胺基乙基氯化物，此混合物在約100℃攪拌約2小時，然后冷卻，用2摩爾鹽酸酸化，分離出水層，有機層用2摩爾鹽酸萃取，合并的水層10%氫氧化鈉液堿化，乙醚萃取，乙醚萃取液用鹽酸乙醇處理得到2-(1-環戊烯(1)基)-2-二甲胺基乙基環戊酮鹽酸鹽。
1.0g(3.9mmol)2-(1-環戊烯(1)基)-2-二甲胺基乙基環戊酮鹽酸鹽及8.1mmol4-氯苯甲醛加到40ml乙醇中制成溶液，向溶液中滴加3.2ml5摩爾氫氧化鈉，所得混合物在室溫下攪拌約12小時，然后加入60ml水，用乙醚萃取，乙醚萃取液再用6摩爾鹽酸萃取，鹽酸萃取液堿化，并用乙醚萃取，然后用無水硫酸鎂干燥，乙醚萃取液用鹽酸乙醇處理得到沉淀，沉淀用乙醇重結晶得到2-(1-環戊烯(1)基)-2-二甲胺基乙基-5-(E)-[(4-氯)-苯亞甲基]-環戊酮鹽酸鹽，產物熔點為234-236℃(分解)。
例1-13給出的化合物，可供經驗豐富的醫生以任一理想劑型使用。
抗炎活性的評估是根據觀察所選化合物采用文獻方法以角叉菜膠誘導的大鼠前爪水腫的抑制活性得出的[C.A.Winter.eral.，Proc.Soc.Exp.Biol.Med.，111，544(1962)]，。100mml1%的角叉菜膠生理鹽水混懸液注射入Wistar大鼠右前爪的皮下組織前約1小時口服或前約半小時皮下注射試驗化合物。注射角叉菜膠后約3小時測量前爪體積，此體積與對照組相比較從而得出抗炎抑制百分率。實驗結果列于表Ⅰ。“化合物編號”指的是該化合物的合成被給出的那個例子的編號，P值指的是T-檢驗結果，T-檢驗法已為專家所熟知。
表Ⅰ角叉菜膠誘導的大鼠前爪水腫的抑制活性化合物編號劑量mg/kg鼠號抑制率%P值650.0(sc)477.40.01750.0(sc)495.80.00125.0(sc)670.30.00112.5(sc)644.20.01850.0(sc)495.90.0011196.0(po)552.20.011296.0(po)557.30.01布洛芬25.0(sc)672.90.00152.0(po)654.90.01sc-皮下給藥po-口服給藥表Ⅰ表明，與對照組相比，本專利化合物對角叉菜膠誘導的大鼠前爪水腫有明顯的抑制作用，本發明專利化合物的抑制能力可以與布洛芬相提并論，并在某些方面優于布洛芬。
例15鎮痛活性的評估采用的方法同Koster等所述相似[R.Koster，et.al.，Fed.Proc.，18，412(1959)]。給小鼠口服該化合物約1小時后，按0.1ml/10g體重腹膜下注射乙酸，五分鐘后，每隔20分鐘記錄每只小鼠扭曲的次數。鎮痛作用表現為減少扭曲次數。試驗結果見表Ⅱ。“化合物編號”指該化合物合成所在的那個例子的編號，P值為T-試驗結果。
表Ⅱ對小鼠乙酸誘導扭曲的鎮痛活性化合物編號劑量mg/kg鼠號抑制率P值1196841.70.051296886.60.0148845.60.05阿斯匹林100846.70.05200864.00.01表Ⅱ表明本專利化合物有明顯的減少乙酸誘發的小鼠的扭曲次數。本專利化合物顯示的抑制作用可與阿斯匹林相提并論，并在某些方面優于阿斯匹林。
例16樣品委托美國國家癌癥研究所，對幾種癌癥(白血病、肺、結腸、黑色瘤、直腸、腦、卵巢等)的60個人類癌細胞進行試驗，使用了Boyd，M.R.(Proc.Am.Assoc.Cancer Res.，30∶652，1989)所述體外觀察法中。在本方法中，檢驗試驗化合物抑制癌細胞生長能力，以細胞生長百分率和每個試驗化合物的濃度(范圍10-9-10-4)作劑量反應曲線，決定GI50、TGI及LC50。GI50和TGI分別表明細胞增殖被抑制了50%及100%。LC50表明50%的細胞被殺死，化合物對某些類型的癌細胞的選擇性可根據與產生相同水平(如GI50)的其他相關藥物作出的平均值曲線圖作出評估。不同細胞的靈敏性指數這樣得出某個細胞的GI50(或TGI、LC50)的對數值與所有細胞的GI50(或TGI、LC50)對數值平均值的差即是。
細胞靈敏性指數的微分值比3大，表明該化合物對某種類型的癌細胞有很強的選擇性，比1小表明選擇性低。試驗結果見表Ⅲ。“化合物編號”指該化合物合成所在的例子的編號。
表Ⅲ癌細胞篩選資料化合物編號實驗結果對數平均值細胞靈敏性指數CI50TGI LC50GI50TGI LC501-5.80-5.42-4.961.051.131.29IEU;COLCOL;RENCOL;LNS;REN2-5.29-4.91-4.480.800.610.77LEU;COLCOL;RENCOL;LNS;REN3-4.72-4.39-4.171.992.011.92LEUCOL;LEUSCL4-5.20-4.80-4.401.000.700.90LEULEUCNS;LNS;MEL5-4.90-4.56-4.200.860.720.25LEULEUCNS;OVA7-5.20-4.80-4.400.700.600.80LEUCOLCOL8-5.37-4.97-4.440.940.690.81COL;LEULEUCNS;REN;SCL9-5.50-5.00-4.511.350.870.89
COL;LEU;SCLLEU;SCLCOL10-5.10-4.71-4.281.110.851.01LEU;COLLEUMEL;REN;OVA11-5.66-4.60-4.081.301.521.26LEU;COLLEUCOL12-4.45-4.11-4.010.360.370.15COL;MELLEU;SCLSCL13-5.15-4.72-4.350.600.740.82MELMELMEL※癌細胞系列名稱如下LEU＝白血病LNS＝非小細胞肺癌COL＝結腸癌MEL＝黑色瘤OVA＝卵巢癌KEN＝腎癌SCL＝小細胞肺癌表Ⅲ本專利化合物在濃度水平低于10-4M(即GI50、TGI及LC50)＞的平均對數值小于-4)顯示出很強的抑制生長及殺死癌細胞的能力。本專利化合物與著名抗癌藥5-氟尿嘧啶(LogLC50＝-3.5)效果差不多，在多數情況下優于5-氟嘧啶。表Ⅲ中，本專利化合物對不同癌細胞的細胞靈敏性微分值有變動，正表明了它們對抑制不同癌細胞的選擇性。
例17通過作Ehrlich腹水癌得到抗腫瘤效果，給ICR小鼠腹膜下注射Ehrlich腹水癌，24小時后，例1及例2合成的化合物給小鼠按20mg/kg/天腹膜下注射9天，觀察動物存活時間。
當注射例1合成的化合物時，平均存活天數為41±5.4天，與對照組相比，存活時間增長率(ILS%)為173%，存活超過40天的動物比例為9/11。
當注射例2合成的化合物時，平均存活天數為33±8.2天，與對照組相比，存活時間增長率(ILS%)為112.0%。
存活時間超過40天的動物比例為3/9。
例18本發明專利的某個典型化合物的急毒試驗的做法是給一組4周年齡雄大鼠使用該化合物，測定例1的化合物按486mg/kg體重口服給藥的LD50、107mg/kg體重腹膜下給藥的LD50、52mg/kg體重靜脈給藥的LD50，結果表明本專利的化合物具有低的急毒。
令人高興的是(1)本發明專利提供了新的2-(N-取代-胺烷基)-5-(E)-烷亞甲基環戊酮、2-(N-取代-胺烷基)-5-(E)-苯亞甲基環戊酮及其鹽。
(2)本專利化合物均可被用作藥物制劑用于治療哺乳動物(包括人類)的炎癥、疼痛及癌癥。
(3)本專利化合物均可被用作藥物制，用于預防哺乳動物(包括人)的炎癥、疼痛。
(4)本專利提供了化合物用于治療哺乳動物炎癥、疼痛及癌癥的方法，所述化合物有至少一個可使用的有效劑量。
(5)本專利提供了化合物用于防治哺乳動物炎癥及疼痛的方法，所述化合物有至少一個可使用的有效劑量。
本發明專利的上述具體描述，是基于舉實例的目的，具體細節上有很多改動，但沒有偏離本專利，這一點在后附的專利要求書中也有說明。
權利要求
1.具有分子結構式
及其藥用鹽類，其中，X為亞甲基或1，2-亞乙基；R1為二甲胺基、二乙胺基、1-四氫吡咯基、1-哌嗪基、4-嗎啉基、苯胺基或取代的苯胺基；R2為氫、1～9個碳原子的直鏈或支鏈烷基、芳基或芳烷基；R3為氫、1～9個碳原子的直鏈或支鏈烷基、芳基或芳烷基；R4為氫、甲基、乙基、烯丙基、芐基、取代芐基、環戊烷基、取代環戊烷基、環戊烯(1)基或取代的環戊烯(1)基；其中的芳基為苯基或苯基被1個或多個甲氧基、羥基、亞甲基氧基、氯、溴、氟、乙氧羰基甲氧基、苯甲酰氧基、烷基或混合基團取代。
2.權利要求1的化合物，其特征是化合物為2-二甲胺基甲基-5-(E)-苯亞甲基環戊酮、2-[(4-氯苯基)胺基-甲基]-5-(E)-[(4-羥基)苯亞甲基]環戊酮、2-[1-(1-環戊烯基)]-2-二甲胺基乙基-5-(E)-[(4-氯)苯亞甲基]環戊酮、2-二甲胺基甲-5-(E)-[(2-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮、2-二甲胺基甲基-5-(E)-[(4-羥基)苯亞甲基]環戊酮、2-芐基-2-二甲胺基-甲基-5-(E)-[(2-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮、2-芐基-2-二甲胺基-甲基-5-(E)-[(4-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮。
3.用于人及哺乳動物治療炎癥的方法。有至少一個有效劑量的化合物及其可供藥用的鹽類用于上述哺乳動物，該化合物具有分子式
其中，X為亞甲基或1;2-亞乙基;R1為二甲胺基、二乙胺基、1-四氫吡咯基、1-哌嗪基、4-嗎啉基、苯胺基或取代的苯胺基，R2為氫，1～9個碳原子的直鏈或支鏈烷基、芳基或芳烷基;R3為氫，1～9個碳原子的直鏈或支鏈烷基、芳基或芳烷基;R4為氫、甲基、乙基、烯丙基、芐基、取代的芐基、環戊烷基、取代的環戊烷基、環戊烯(1)基或取代的環戊烯(1)基，而其中的芳基為苯基或苯基被一個或多個甲氧基、羥基、亞甲基氧基、氯、溴、氟、乙氧羰基甲氧基、苯甲酰氧基、烷基或混合基團取代。
4.權利要求3的方法，其特征是使用有至少一個有療劑量的化合物，2-二甲胺基甲基-5-(E)-[(2-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮、2-二甲胺基氧基-5-(E)-[(4-羥基)苯亞甲基]環戊酮。
5.預防人及哺乳動物的炎癥使用有至少一個有療劑量的化合物及其鹽類于所述哺乳動物，該化合物分子結構式為
其中，X為亞甲基或1，2-亞乙基;R1為二甲胺基、二乙胺基、1-四氫吡咯基、1-哌嗪基、4-嗎啉基、苯胺基或取代苯胺基;R2為氫、1-9個碳原子的直鏈或支鏈烷基、芳基或芳烷基;R3為氫、1-9個碳原子的直鏈或支鏈烷基、芳基或芳烷基;R4為氫、甲基、乙基、烯丙基、芐基、取代芐基、環戊烷基、取代環戊烷基、環戊烯(1)基或取代的環戊烯(1)基;而其中的芳基指苯基或苯基被1個或多個甲氧基、羥基、亞甲基氧基、氯、溴、氟、乙氧羰基甲氧基、苯甲酰氧基、烷基或混合基團取代。
6.治療人及哺乳動物的疼痛使用有至少一個有效劑量的化合物及其藥用鹽類于人及哺乳動物，該化合物的分子結構式
其中，X為亞甲基或1，2-亞乙基;R1為二甲胺基、二乙胺基、1-四氫吡咯基、1-哌嗪基、4-嗎啉基、苯胺基或取代苯胺基;R2為氫、1-9個碳原子的直鏈或支鏈的烷基、芳基或芳烷基;R3為氫、1-9個碳原子的直鏈或支鏈的烷基、芳基或芳烷基;R4為氫、甲基、乙基、烯丙基、芐基或取代芐基、環戊烷基、取代的環戊烷基、環戊烯(1)基或取代環戊烯(1)基，而其中的芳基指苯基或苯基被1個或多個甲氧基、羥基、亞甲基氧基、氯、溴、氟、乙氧羰基甲氧基、苯甲酰氧基、烷基或混合基團取代。
7.權利要求6的方法，其特征是使用有至少一個有療效劑量的化合物2-芐基-2-二甲胺基甲基-5-(E)-[(4-甲氧)苯亞甲基]環戊酮。
8.用于預防人及哺乳動物的疼痛使用有至少一個有療效劑量的化合物及其鹽，該化合物分子結構式為
其中，X為亞甲基或1，2-亞乙基，R1為二甲胺基、二乙胺基、1-四氫吡咯基、1-哌嗪基、4-嗎啉基、苯胺基或取代苯胺基;R2為氫，1-9個碳原子的直鏈或支蓮烷基、芳基或芳烷基;R3為氫、1-9個碳原子的直鏈或支鏈烷基、芳基或芳烷基;R4為氫、甲基、乙基、烯丙基、芐基、取代芐基、環戊烷基、取代環戊烷基、環戊烯(1)基或取代環戊烯(1)基，而所述的芳基指苯基或苯基被1個或多個甲氧基、羥基、亞甲氧基、氯、溴、氟、乙氧羰基甲氧基、苯甲酰氧基、烷基或混合基團取代。
9.治療人及哺乳動物癌癥的方法使用有至少一個療效劑量的化合物及其鹽類于人及哺乳動物，該化合物結構式為
其中X為亞甲基或1，2-亞乙基;R1為二甲胺基、二乙胺基、1-四氫吡咯基、1-哌嗪基、4-嗎啉基、苯胺基或取代苯胺基;R2為氫、1-9個碳原子的直鏈或支鏈烷基、芳基或芳烷基;R3為氫、1-9個碳原子的直鏈或支鏈烷基、芳基或芳烷基;R4為氫、甲基、乙基、烯丙基、芐基、取代芐基、環戊烷基、取代環戊烷基、環戊烯(1)基或取代的環戊烯(1)基，而其中的芳基指苯基或苯基被一個或多個甲氧基、羥基、亞甲氧基、氯、溴、氟、乙氧羰基甲氧基、苯甲酰氧基、烷基或它們混合取代。
10.權利要求9的方法，其特征是使用有至少一個有效劑量的化合物2-二甲胺基甲基-5-(E)-苯亞甲基環戊酮、2-[(4-氯苯基)胺甲基]-5-(E)-[(4-羥基)苯亞甲基]環戊酮、2-(1-環戊(1)烯基)-2-二甲胺基乙基-5-(E)-[(4-氯)苯亞甲基]環戊酮、2-芐基-2-二甲胺基甲基-5-(E)-[(2-甲氧基)苯亞甲基]環戊酮。
全文摘要
本發明涉及一系列新化合物的制備方法及其抗炎、鎮痛和抗炎活性的應用。即2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-烷亞甲基環戊酮類，2-(N-取代氨烷基)-5-(E)-芳亞甲基環戊酮類新化合物其衍生物，分子結構式如上。該類化合物具有抗炎、鎮痛及抗癌活性，應用該類化合物治療哺乳動物的炎癥、疼痛及癌癥以及對抗或預防炎癥、疼痛的方法也在發明公開之列。
文檔編號A61K31/13GK1082026SQ9311101
公開日1994年2月16日 申請日期1993年3月30日 優先權日1993年3月30日
發明者計志忠, 陳海濤, 王蘭勤 申請人:沈陽藥學院