專利名稱：鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學上可接受的鹽、其制備方法及其用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學上可接受的鹽、其制備方法、及其在 制備預防和/或治療腫瘤等機體異常增生疾病的藥物或功能食品中的應用、以及其在制備 預防和/或治療機體炎癥、痛疼等疾病的藥物或功能食品中的應用。
背景技術：
惡性腫瘤(癌癥)是嚴重威脅人類健康的常見病和多發病。根據世界衛生組織的 報告報道，全球2008年約有1240萬人確診罹患某種類型癌癥，其中760萬人因此死亡。報 告預計，到2010年，癌癥致死率將超過心臟病，成為全球頭號殺手；到2030年，全球每年可 能將有癌癥患者2640萬人，其中1700萬人將因此死亡。在過去的幾十年中，為了應對癌癥， 各國醫學科學家和藥物科學家一直在不懈地努力，也取得了不俗的成就，但是，截止目前， 還沒有藥物能完全預防或治愈癌癥。在相當長一段時期內，細胞毒性藥物仍將是腫瘤藥物 治療的主體。目前，針對腫瘤形成及增殖機制的多環節作用的新型抗腫瘤藥物(對腫瘤細 胞具有靶向殺傷作用，而對人體正常組織損傷很小，甚至無)正逐漸成為國內、外研究機構 關注的熱點?？茖W家在很久以前就已注意到炎癥、組織損傷與癌癥密切相關，在1863年，Rudolf Virchow就指出癌癥常常產生于機體的慢性炎癥部位。事實上，流性病學調查表明，慢性乙 肝、慢性胃腸炎和慢性胰腺炎病人患肝癌、胃腸癌與胰腺癌的風險顯著增加；同樣地，外傷 病人患癌癥的風險也會增加。在此過程中，細胞內的環氧合酶(Cyclo-oxygenase，COX)、 脂氧合酶(Lipoxygenase，L0X)及其代謝產物起著非常關鍵的作用。這些可能成為預防和 治療癌癥的革巴點(參閱Coussens LM, Werb Z. (2002) Inflammation and cancer. Nature 420 860-7)。COX及其代謝產物與腫瘤生成、進展、轉移及血管的生成密切相關。在人體內， 已鑒定與癌癥相關的COX至少有二種:C0X-1 (參閱=Xie W，Chipman JG, Robertson DL, et al. (1991)Expression of a mitogen-responsive gene encoding prostaglandin synthase is regulated by mRNA splicing. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:2692-6)禾口 C0X_2(參閱Hla Τ, Neilson K. (1992)Human cyclooxygenase-2cDNA. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:7384-8)。C0X-1是生理性的，在胃腸道、腎臟、血管平滑肌和血小板中都有 表達，參與人體的正常生理機能；然而，C0X-2在絕大多數正常組織中無法檢測到，但能被 各種各樣刺激因素(如生長因子、炎癥相關的細胞介質)快速誘導表達(參閱=Morita I. (2002)Distinct functions of C0X-1 and C0X-2. Prostaglandins Other Lipid Mediat. 68-69 =165-75) 0在許多腫瘤組織(如胰腺癌、肺癌、結腸癌、胃腺癌、乳癌和前 列腺癌等)中，C0X-2表達是大量增加的，還伴隨著C0X-2代謝產物前列腺素的增加(參 閱:Molina MA, Sitja-Amau M， Lemoine MG, et al. (1999)Increased cyclooxygenase-2 expression in human pancreatic carcinomas and cell lines growth inhibition bynonsteroidal anti-inflammatory drugs. Cancer Res. 59 :4356_62 ；Wolff H，Saukkonen K，Anttila S，et al. (1998)Expression of cyclooxygenase-2in human lung carcinoma. Cancer Res. 58 4997~5001 ；Uefuji K,Ichikura TiMochizuki H，et al. (1998)Expression of cyclooxygenase-2protein in gastric adenocarcinoma. J. Surg. Oncol. 69 :68_72 ； Hwang D，Scollard D，Byrne J, et al. (1998). Expression of eyelooxygenase-land cyclooxygenase-2in human breast cancer. J. Natl. Cancer Inst. 90 :455_60 ；Kutchera W, Jones DA, Matsunami N， et al. (1996)Prostaglandin Hsynthase 2 is expressed abnormally in human colon cancer :evidence for a transcriptional effect. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93 4816-20 ；Gupta S, Srivastava Μ, Ahmad N， et al. (2000) Over-expression of cyclooxygenase-2in human prostate adenocarcinoma. Prostate 42:73-78)。過度表達的COX-2及其代謝產物參與腫瘤的生成、發展及血管的增生(參 閱:Qiao L，Kozoni V，Tsioulas GJ, et al. (1995) Selected eicosanoids increase the proliferation rate of human colon carcinoma cell lines and mouse colonocytes in vivo.Biochim. Biophys. Acta 128 :215_23 ；MulIer-Decker K，Neufang G，Berger I， et al. (2002)Transgenic cyclooxygenase-2overexpression sensitizes mouse skin for carcinogenesis.Proc.Natl.Acad.Sci. USA 99 12483-88 ；Prescott SM. (2000) Is cyclooxygenase-2 the alpha and the omega in cancer ？ J Clin. Invest. 105 1511-94)。基因敲除的實驗研究表明，COX-I也與腫瘤的發展密切相關(參閱=Chulada PC, Thompson MB， Mahler JF, et al. (2000)Genetic disruption of Ptgs-1， as well as of Ptgs—2，reduces intestinal tumorigenesis in Min mice. Cancer Res. 60 4705-8) ο C0X-2的抑制劑、C0X1/2抑制劑可以抑制腫瘤的生長(參閱:Piazza GA，Rahm AK, Finm TS, et al. (1997)Apoptosis primarily accounts for the growth-inhibitory properties of sulindac metabolites and involves a mechanism that is independent of cyclooxygenase inhibition, cell cycle arrest, and p53 induction. Cancer Res. 57 2452-9 ；Seed MP, Brown JR, Freemantle, et al. (1997)The inhibition of colon_26adenocarcinoma development and angiogenesis by topical diclofenac in 2. 5% hyaluronan. Cancer Res. 57 :1625-9)。 LOX及其代謝產物與腫瘤生成、進展、轉移及血管的生成也密切相關。LOX在催 化花生四烯酸代謝的過程中，根據將氧原子插入花生四烯酸位置的不同，可分為不同的亞 型 5-L0X、8-L0X、12-L0X 和 15_L0X(參閱=Brash AR. (1999) Lipoxygenases :occurrence, functions, catalysis, and acquisition of substrate. J. Biol. Chem. 274 :23679_82)。 越來越多的研究證據表明，5-L0X及其代謝產物參與了腫瘤的進展(參閱=Steele VE, Holmes CA, Hawk ET, et al. (1999)Lipoxygenase inhibitors as potential cancer chemo-preventives. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 8 467-83)、是月中瘤細胞增殖 的介質(參閱Anderson KM，Seed T，Jajeh Α，et al. (1996)An in vivo inhibitor of 5—lipoxygenase，MK886，at micromolar concentration induces apoptosis inU937 and CML cells. Anticancer Res. 16 :2589_99) ；5-L0X的抑制劑可以抑制腫瘤的生長(參閱 Gunning WT, Kramer PM, Steele VE et al. (2002)Chemo-prevention by lipoxygenase and leukotriene pathway inhibitors of vinyl carbamate—induced lung tumors inmice. Cancer Res. 62 4199-201)。其它 8-L0X、12-L0X、15_L0X 及其代謝產物也參與了 腫瘤的生存和發展，8-L0X和12-L0X及其代謝產物可能促進腫瘤的生成和發展(參閱 Muga SJ, Thuillier P， PavoneA, et al. (2000)8S-lipoxyge-nase products activate peroxisome proliferators-activated receptor alpha and induce differentiation in murine keratino-cytes. Cell Growth Differ. 11 447-54 ；Honn KV, Tang DG, Gao X，et al. (1994) 12-lipoxygenases and 12(s)-HETE :role in cancer metastasis. Cancer Metastasis Rev. 13 :365_96)，而15-L0X及其代謝產物可能抑制腫瘤的發展(參 閱:His LC, Wilson LC, Eling TE. (2002)Opposing Effects of 15-Lipoxygenase-l and-2 Metabolites on MAPK Signaling in Prostate. Alteration in peroxisome proliferatoractivated receptor gamma. J. Biol. Chem. 277 40549-56)。一系列的研究表明，在腫瘤組織中LOX及C0X、特別是5-L0X及C0X-2表達和 活性是增加的，抑制5-L0X和C0X-2表達和/或活性可能是預防和治療癌癥的有效途徑 (參閱RomanoM, Claria J. (2003) Cyclooxygenase-2 and 5-lipoxygenase converging functions on cell proliferation and tumor angiogenesis -implications for cancer therapy. FASEB J 17:1986-95)。非留體類抗炎藥是一類目前在臨床廣泛應用的解熱鎮 藥，有的是COX的抑制劑，有的是COX和LOX的雙重抑制劑。托芬那酸，屬于非留體類解 熱鎮痛藥，是COX和LOX的雙重抑制劑，最先由丹麥GEA公司研制幵發，并首先在丹麥上 市，主要用于治療偏頭痛。最近的研究表明，托芬那酸對實驗動物的人胰腺癌、結直腸癌 具有明顯的抑制作用，而且可以增加胰腺癌細胞對放射治療的敏感性；其作用機制可能與 托芬那酸能降解腫瘤細胞內的核轉錄因子(SP1、SP3、SP4)、抑制表皮生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor，VEGF)及 VEGF 受體的產生、抑制生存素(Surviv in)生成 和激活 ESE-1/EGR-1 信號通路相關(參閱Abdelrahim M，Baker CH, Abbruzzese 幾， et al. (2006)Tolfenamic acid and pancreatic cancer growth, angiogenesis, and Sp protein degradation. J. Natl. Cancer Inst. 98 855~68 ；Abdelrahim MBiAbbruzzese CH, Sheikh-Hamad JL, et al. (2007)Regulation of vascular endothelial growth factor receptor-1expression by specificity proteins 1,3, and 4 in pancreatic cancer cells.Cancer Res. 67 3286~94 ；Konduri S,Colon JiBaker CH,et al. (2009)Tolfenamic acid enhances pancreatic cancer cell and tumor response to radiation therapy by inhibiting survivin protein expression. Mol. Cancer Ther. 8 :533_42 ；Lee SH, Bahn JH, Choi CK, et al. (2008)ESE-l/EGR-lpathway plays a role in tolfenamic acid-induced apoptosis in colorectal cancer cells. Mol. Cancer Ther· 7 :3739_50·)0 然而，托芬那酸的抗腫瘤活性不強(參閱:Abdelrahim M，Baker CH，Abbruzzese幾，et al. (2006)Tolfenamic acid and pancreatic cancer growth, angiogenesis, and Sp protein degradation. J. Natl. Cancer Inst. 98 :855-68.)。非留體類抗炎藥在抗腫瘤方面的潛力已引起研究者的重視，早在1999年，就有研 究者申請專利，將含羧基的非留體類抗炎藥修飾成腫胺衍生物后，其可選擇性抑制C0X-2， 并具有抗腫瘤活性(參閱us 6399647B2, Amide derivatives for antiangiogenic and/ or antitumorigenic use)。其在評價修飾物時，是用抑制COX的活性為指標的，這可能有 一定的局限性，因為最近的研究表明L0X也參與腫瘤的發展和血管的生成，而且非LOX和COX作用也可能參與抗腫瘤活性。盡管在專利中，也提到了托芬那酸，但沒有具體的實施例。
托芬那酸是鄰苯胺基苯甲酸的一種。本發明擬以鄰苯胺基苯甲酸為先導化合物， 修飾合成一系列新的化合物，以增加抗腫瘤活性和改善藥物代謝動力學為目標，找到高效 (抗腫瘤、解熱鎮痛等)、低毒的新化合物。

發明內容
本發明的目的在于提供一類具有抗癌和解熱鎮痛活性的新型低毒化合物及其制 備方法。該類化合物對小鼠的急性毒性較低，ICR小鼠，靜脈給藥，半數致死量(LD5tl)大 于100mg/kg ；在一定劑量下，對于人肺癌(NCI-460)、肝癌(SMMC-7721, BEL-7402)、胃癌 (BGC-823)、鱗狀上皮癌(KB)、前列腺癌(PC-3)、宮頸癌(HELA)、卵巢癌(H0-8910)、乳腺癌 (BT549)、結腸癌(Caco-2)、胰腺癌(ASPC-1，PANC-1)、白血病(HL-60，K562)和膠質細胞瘤 (U251)細胞株具有較強的抑制作用；對移植裸鼠的人腫瘤細胞也具有明顯的抑制作用；靜 脈注射后，該類化合物能迅速分布到組織，有較長消除半衰期；對熱、化學性刺激引起的疼 痛具有明顯的抑制作用；而且，該類化合物的制備方法簡便，易于操作，成本很低，非常有利 于產業化。本發明采用的技術方案是如通式I所示的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學上可接受的鹽
權利要求
如通式I所示的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學上可接受的鹽I式中，R1為氫、硝基或氨基；R2為氫、硝基或鹵素；R3為氫或鹵素；R4為氨基、C1 C10烷仲胺基、二C1 C5烷叔胺基、苯仲胺基、苯C1 C3烷氧仲胺基、羥基、C1 C10烷氧基、苯氧基、苯C1 C3烷氧基；若R4是羥基，則R1、R2和R3不同時為氫。F2009101010048C0000011.tif
2.根據權利要求1所述的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學上可接受的鹽，其中，R1為 氫、硝基或氨基；R2為氫、硝基、氟或氯；R3為氫或氯；R4為氨基X1-Cltl烷仲胺基、二 C1-C5烷 叔胺基、苯仲胺基、苯C1-C3烷氧仲胺基、羥基、C1-C5烷氧基、苯氧基、苯C1-C3烷氧基；若R4 是羥基，則R1、R2和R3不同時為氫。
3.根據權利要求2所述的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學上可接受的鹽，其中，R1為 氫；R2為硝基或氟；R3為氯；R4為氨基、(^-(5烷仲胺基、二C1-Qg叔胺基、苯仲胺基、苯C1-C3 烷氧仲胺基、羥基、C1-C5烷氧基、苯氧基、苯C1-C3烷氧基。
4.根據權利要求3所述的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學上可接受的鹽，其選自-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮甲酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮乙酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮戊酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮苯甲酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮苯酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮單甘油酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰乙胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰正丙胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰正辛胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰苯甲胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰苯胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰苯甲氧胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰二乙醇胺、4-硝基-2-[(3-氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸乙酯、 4-硝基-2-[(3-氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸酰正丙胺、 6-氯-2-[(3-氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸、 2-[(3_氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸乙酯、 2-[(3_氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸酰正丙胺。
5.制備如權利要求1所述的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學上可接受的鹽的方法，其 包括以下步驟a).將式II化合物
6.根據權利要求1-4任一項所述的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學上可接受的鹽在 制備預防和/或治療腫瘤疾病的藥物或功能食品中的應用。
7.根據權利要求6所述的腫瘤疾病是指肺癌、肝癌、胃癌、鱗狀上皮癌、前列腺癌、宮頸 癌、卵巢癌、乳腺癌、結腸癌、胰腺癌、白血病或膠質細胞瘤。
8.根據權利要求1-4任一項所述的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學上可接受的鹽在 制備預防和/或治療機體炎癥、痛疼疾病的藥物或功能食品中的應用。
全文摘要
本發明提供了鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學上可接受的鹽、其制備方法、及其在制備預防和/或治療腫瘤等機體異常增生疾病的藥物或功能食品中的應用、以及其在制備預防和/或治療機體炎癥、痛疼等疾病的藥物或功能食品中的應用。
文檔編號A61P29/00GK101985428SQ20091010100
公開日2011年3月16日 申請日期2009年7月29日 優先權日2009年7月29日
發明者吳耀東, 張濤, 楊嵐, 王樹龍, 葛求富, 郭殿武, 黃濱南 申請人:杭州民生藥業有限公司