專利名稱：含苯并噻唑類化合物的藥物組合物的制備方法
本專利申請是CN92101908.4的分案申請。原申請的申請日為1992年2月12日;原申請的發明名稱為“4-[(2-苯并噻唑基)甲氨基]-α-[(3，4-二氟苯氧基)甲基]-1-哌啶乙醇”。
美國專利US-4，861，785報道了苯并噁唑-和苯并噻唑胺衍生物具有抗缺氧活性。與結構相關的上述化合物Sabeluzole比較，本發明提供的苯并噻唑類化合物顯示出意想不到的抗中風活性。
本發明涉及到4-[(2-苯并噻唑基)甲氨基]-α-[(3，4-二氟苯氧基)甲基]-1-哌啶乙醇的外消旋混合物和(S)構型體及其藥學上可以接受的酸加成鹽。該化合物可用式(Ⅰ)表示 上面提到的酸加成鹽包括式(Ⅰ)化合物形成的有治療活性的無毒的酸加成鹽。它可以通過用合適的酸，例如無機酸，如氫鹵酸(鹽酸、氫溴酸等)、硫酸、硝酸、磷酸等;或有機酸，如乙酸、丙酸、羥基乙酸、2-羥基丙酸、2-氧代丙酸、乙二酸、丙二酸、丁二酸、(Z)-2-丁烯二酸、(E)-2-丁烯二酸、2-羥基丁二酸、2，3-二羥基丁二酸、2-羥基-1，2，3-丙三酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、4-甲基苯磺酸、環己烷基氨基磺酸、2-羥基苯甲酸、4-氨基-2-羥基苯甲酸、7，7-二甲基-2-氧代雙環[2，2，1]庚烷-1-甲磺酸、2-[(4-甲基苯基)磺酰氨基]戊二酸等處理堿形式的式(Ⅰ)化合物而獲得。反過來也可以用堿處理酸加成鹽，使其變成游離的堿。
上述酸加成鹽也包括式(Ⅰ)化合物形成的溶劑化物，該溶劑化物包括在本發明之中。例如，水合物、醇合物等。
本發明的化合物有一個手性碳原子，不對稱中心的絕對構型可用立體化學符號R和S來表示。除非提到或指示出立體構型外，該化合物的化學名稱表示該化合物所有的立體異構體的混合物。
術語“對映純”表示其中一種對映體至少有94%的余量(即存在至少97%的其中一種對映體和最多3%的另一種對映體)到100%的余量(即存在100%的其中一種對映體，而沒有另一種對映體)。優選的情況是其中一種對映體有96%到100%的余量，更優選的情況是其中一種對映體有98%到100%的余量。
本發明優選的化合物是(S)-4-[(2-苯并噻唑基)甲氨基]-α-[(3，4-二氟苯氧基)甲基]-1-哌啶乙醇和它的二氫氯酸鹽。
式(Ⅰ)化合物通常可用式(Ⅲ)所示的烷基化試劑按現有技術中的N-烷基化方法與式(Ⅱ)所示的哌啶化合物進行N-烷基化反應來制備。
在式(Ⅲ)中，W1表示一種合適的離去基團，例如鹵素(氯、溴和碘)、磺酰氧基(如甲磺酰氧、三氟甲磺酰氧、苯磺酰氧、4-甲基苯磺酰氧等)。該N-烷基化反應通常可通過在任意一種惰性溶劑中混合反應試劑來進行，該惰性溶劑可以是芳香化合物，例如，苯、甲苯、二甲苯等;C1-6的鏈烷醇，例如，甲醇、乙醇、1-丁醇等;酮，例如，丙酮、4-甲基-2-戊酮等;酯，例如，乙酸乙酯、γ-丁內酯等;醚，例如，乙醚、四氫呋喃、1，4-二噁烷等;偶極非質子溶劑，例如，N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲亞砜、吡啶、1-甲基-2-吡咯烷酮、硝基苯、乙腈等;或是這些溶劑的混合物。反應中還可選擇性地加入一種合適的堿，這種堿可以是堿金屬或堿土金屬的碳酸鹽、碳酸氫鹽、氫氧化物、氧化物、羧酸鹽、醇鹽、氫化物或氨化物，例如，碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、氫氧化鈉、氧化鈣、醋酸鈉、甲醇鈉、氫化鈉、氨化鈉等;該堿還可以是象叔胺之類的有機堿，例如，三乙胺、N-(1-甲基乙基)-2-丙胺、4-乙基嗎啉、1，4-二氮雜二環[2，2，2]辛烷、吡啶等，用來吸收反應中生成的酸。在某些情況下加入一種碘化物鹽(其中優選的碘化物是堿金屬碘化物)或冠醚(例如，1，4，7，10，13，16-六氧雜環十八烷等)是適當的。攪拌和稍升高溫度可提高反應速率，其中優選的方案是使反應混合物在回流溫度下反應。該N-烷基化反應可以選擇現有技術中相轉移催化反應的條件來進行。升高反應溫度對提高反應速率是適當的。
在該反應和后面的制備反應中，反應產物可以按照現有技術中的一般方法，例如，提取、結晶、研制和層析來從反應介質分離和進一步純化(如果需要的話)。
式(Ⅰ)化合物也可以通過式(Ⅱ)所示的哌啶與式(Ⅳ)所示的環氧化合物反應來制得。
在惰性溶劑中通過攪拌和加熱(如果需要)反應物可完成這個反應，該反應的溶劑可以是水;芳香烴，例如，苯、甲苯等;醇，例如，甲醇、乙醇、異丙醇、1-丁醇等;酮，例如，丙酮、4-甲基-2-戊酮等;偶極非質子溶劑，例如，N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺等或這些溶劑的混合物。
式(Ⅰ)化合物也可通過環合式(Ⅶ)所示的硫脲衍生物來制備。式(Ⅶ)化合物可通過式(Ⅴ)所示的胺與式(Ⅵ)所示的異硫氰酸酯在適當的惰性溶劑如鏈烷醇、醚、酮等中反應而制得。
式(Ⅵ)和式(Ⅶ)中W2表示諸如氫、鹵素(例如氯和溴)、C1-6的烷氧基或C1-6的烷硫基的基團。上述環合反應可選擇性地在合適的氧化劑如二鹵化物(氯和溴)存在下進行。環合反應可以在惰性的溶劑中進行，諸如鹵代烴，例如，四氯化碳、三氯甲烷、二氯甲烷等;烴類，例如，苯、甲苯、已烷等;醚，例如，四氫呋喃等;酮，例如，丙酮、丁酮等;醇，例如，甲醇、乙醇、2-丙醇等;偶極非質子溶劑，例如，N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺等。升高溫度和攪拌可增加反應的速率。
式(Ⅰ)化合物也可通過一種合適的如式(Ⅷ)所示的化合物與式(Ⅸ)所示苯并噻唑的反應來制備。
在(Ⅷ)和(Ⅸ)中，Q1和Q2可選擇烷基化反應中能生成-N(CH3)-基團的反應基團。例如，當Q1是合適的離去基團時，Q2是-NHCH3;或者，當Q1是-NHCH3時，Q2是合適的離去基團。合適的離去基團有鹵素，例如，氯、溴等;磺酰氧基，例如甲磺酰氧基、4-甲基苯磺酰氧基等。反應所用的惰性溶劑有芳香烴，如苯、甲苯等;醚，如1，4-二噁烷、四氫呋喃等;鹵代烷，如三氯甲烷、四氯化碳等;醇，如甲醇、乙醇、1-丁醇等;酮，如丙酮、4-甲基-2-戊酮等;偶極非質子溶劑，如N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺等。加入合適的堿，如堿金屬碳酸鹽或碳酸氫鹽(碳酸鈉、碳酸氫鈉等);氫化鈉;或有機堿，如三乙胺等可以吸收反應過程中生成的酸。
式(Ⅰ)化合物也可以通過式(Ⅹ)所示的N-取代的4-哌啶酮與式(Ⅺ)所示的苯并噻唑胺按現有技術中的還原性N-烷基化方法來制得。
式(Ⅹ)化合物和(Ⅺ)化合物的反應可通過在適當的惰性溶劑中將反應試劑與合適的還原劑混合而方便地進行。優選的方案是將式(Ⅹ)所示的酮首先與式(Ⅺ)所示的中間體反應生成一個烯胺，該烯胺可選擇性地被分離和進一步純化，然后再還原該烯胺。合適的溶劑有水;C1-6烷醇，如甲醇、乙醇、2-丙醇等;醚類，如1，4-二噁烷等;鹵代烴，如三氯甲烷等;偶極非質子溶劑，如N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲亞砜等;或這些溶劑的混合物。合適的還原劑有金屬或絡合金屬氫化物，如硼氫化鈉、氰基硼氫鈉、氫化鋁鋰等。另外在鈀炭、鉑炭等合適的催化劑存在下氫氣可用于還原反應。為了防止反應物和產物中的某些官能團不需要的過分氫化，可以在反應混合物中加入一種合適的催化劑的毒物，如噻吩等。
對映純的式(Ⅰ)化合物可以通過用合適的拆解試劑，如手性酸將式(Ⅰ)化合物的外消旋混合物轉化成非對映的鹽的混合物，然后用物理方法分離該混合物，最后在酸性或堿性含水介質中分解分離出的非對映的鹽而將其轉變成相應的式(Ⅰ)化合物的對映體形式的方法來獲得。其中手性酸有酒石酸、蘋果酸、扁桃酸、樟腦磺酸、4，5-二氫-1H-2-苯并吡喃-2-酸等。物理分離方法有選擇性結晶或層析技術，如液相層析等。上述反應過程可選擇性地利用提高反應溫度的手段。
另外，合適的原料的對映純異構體發生立體有擇反應也可以方便地得到對映純的化合物。例如，用對映純的式(Ⅳ)所示的環氧化合物與式(Ⅱ)所示的中間體反應，如前所述，可以制備對映純的式(Ⅰ)化合物。對映純的式(Ⅳ)環氧化合物可通過對映純的式(ⅩⅦ)所示的環氧化合物與3，4-二氟苯酚反應來制備，這將在后面描述。
另外，對映體還可通過使用手性固定相的液相層析來分離。
前面所述的制備方法中的一些中間體和原料是已知物，可以按照現有技術中制備該化合物或相似化合物的方法來制備。其它中間體的制備方法將在下面更詳細地描述。
式(Ⅱ)所示的中間體可按照前述由式(Ⅶ)化合物制備式(Ⅰ)化合物的方法氧化環合如式(Ⅻ)所示的硫脲衍生物，隨后除去式(ⅩⅢ)所示的中間體中的保護基團P而制備。其中P是一個合適的離去基團，如C1-6的烷氧羰基、苯甲氧羰基、芐基等;W2定義如前。
按照現有技術中已知的方法，如在酸性或堿性介質中水解或催化氫化，同時根據P基團的性質可以除去(ⅩⅢ)中的保護基團P。
按照前面描述過的從(Ⅴ)和(Ⅵ)制備(Ⅶ)的方法，通過式(ⅩⅣ)所示的胺與式(ⅩⅤ)所示的異硫氰酸酯的反應可以制備上述式(Ⅻ)所示的中間體。
通過式(ⅩⅥ)所示的3，4-二氟苯酚與式(ⅩⅦ)所示的環氧化合物的反應可制備式(Ⅳ)所示的中間體。式(ⅩⅦ)中W1的含意和前面描述過的一樣。
該烷基化反應可以按照前述從(Ⅱ)和(Ⅲ)制備(Ⅰ)的方法來進行。
式(Ⅰ)化合物[外消旋混合物和(S)-構型體]和它們的藥學上可接受的酸加成鹽具有在體內抗中風的生物活性，該活性可以通過“大白鼠光化學中風模型后處理”的試驗來證實，該試驗將在后面實驗部分描述。
同US-4，861，785中已知的化合物(例如Sabeluzole)一樣，本發明的化合物是強的抗缺氧藥物。本發明化合物比已知化合物意想不到的性質在于本發明化合物在體內具有強的抗中風活性，而已知化合物沒有被觀察到這種性質。雖然本發明化合物的抗缺氧活性較Sabeluzole弱一些，但是它具有抗中風活性是意想不到的。顯然，在體內抗缺氧活性和體內抗中風活性之間并沒有簡單的聯系。因而本發明化合物可用于中風的緊急性治療，而現有技術中的化合物僅用于中風的長期性治療，如維持治療。與現有技術中的化合物相比，本發明化合物更進一步的優點是具有更長效的抗缺氧活性，且不引起小白鼠鎮靜和運動失調以及大白鼠瞼下垂。
鑒于它們有益的藥理學的活性，本發明化合物可被配制成各種藥劑形式以滿足用藥。為了制備本發明的藥物組合物，將一種有效量的特定的化合物，以酸加成鹽或堿的形式，作為活性組分與藥學上可接受的載體結合成緊密的混合物，根據用藥所需的劑型，可以有各種不同的藥物載體。這些藥物組合物要求有合適的單一劑量，特別是對于口服、直腸、皮膚或腸胃外注射給藥。例如，在口服藥劑的配制中，任何藥學上常用的介質，如水、脂肪族二元醇類，油類，醇類等都可用于口服的液體制劑，如懸浮液、糖漿劑、酏劑和溶液;固體載體，如淀粉、糖、高嶺土、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等可用于粉劑、丸劑、膠囊劑和片劑。由于片劑和膠囊易于服用，因此它們是最便利的單元形式的口服藥劑，而它們顯然要使用固體藥物載體。腸胃外給藥的藥劑，盡管也要使用其他組分，如助溶劑，但至少最常用的載體主要是無菌水。例如，配制注射液的載體有鹽水、葡萄糖溶液和糖鹽水。含式(Ⅰ)化合物的注射液可配制成油劑以延長藥效。適應這個目的的合適的油有花生油、芝麻油、棉籽油、玉米油、豆油、合成的長鏈脂肪酸甘油酯以及這些油和其他油的混合油。還可以配制懸浮注射液，其中可使用合適的液體載體，懸浮劑等。在適于透過皮膚吸收的藥物組合物中，載體選擇性地包括滲透增強劑和/或合適的濕潤劑，并選擇性地與少量合適的任何性質的添加劑結合。但該添加劑不能在皮膚上導致任何嚴重的有害的影響。該添加劑可以促進皮膚給藥和/或有助于所需要的組合物的配制。這些藥物組合可以各種方式給藥，如透皮藥膏、spot-on或軟膏。由于(Ⅰ)的酸加成鹽比相應的堿形式水溶性強，顯然更適合于含水組合物的制備。
這些組合物中使人感興趣的是含有環糊精(CD)或它的醚衍生物的組合物，它們可作為配位劑和增溶劑。本文涉及到的這類環糊精有α-CD、β-CD、γ-CD和它們的醚或混合醚衍生物。
具體的環糊精衍生物在US-3，459，731、EP-A-0，149，197和EP-A-0，197，571中描述。
典型的醚或混合醚的衍生物包括其中一個或多個羥基被取代的α-、β-、或γ-CD，取代基有C1-6烷基，特別是甲基、乙基或異丙基;羥基C1-6烷基，特別是羥乙基、羥丙基或羥丁基;羧基C1-6烷基，特別是羧甲基或羧乙基;C1-6烷氧羰基C1-6烷基或羧基C1-6烷氧基C1-6烷基，特別是羧甲氧基丙基或羧乙氧基丙基。用作配位劑和增溶劑特別值得注意的是β-CD，2，6-二甲基-β-CD，尤其是2-羥丙基-β-CD、2-羥基乙基-β-CD、2-羥乙基-γ-CD、2-羥丙基-γ-CD和(2-羧基甲氧基)丙基-β-CD。在前面提到過的環糊精衍生物中，DS(取代度，即平均每個葡萄糖單位被取代的羥基數)優選的范圍是0.125到3，尤其是0.2到2，或0.2到1.5。更優選的范圍是0.2到0.7，尤其是0.35到0.5，而最優選的是大約0.4。MS(摩爾取代度，即平均每葡萄糖單位取代劑的摩爾數)的范圍是0.125到10，尤其是0.3到3，或0.3到1.5。更優選的MS范圍是0.3到0.8，尤其是0.35到0.5，而最優選的是大約0.4。通過將環糊精或其醚衍生物溶解在水中并在其中加入式(Ⅰ)化合物和其他輔劑和組分，如氯化鈉、硝酸鉀、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇和諸如磷酸鹽、乙酸鹽或檸檬酸鹽的緩沖劑，并選擇性地通過減壓蒸發或冷凍干燥的方法濃縮或干燥該溶液，或更進一步選擇性地用水恢復冷凍干燥的殘留物成上述藥物組合物。最終組合物中的環糊精或其醚衍生物的量的一般范圍是約1%到40%，優選范圍是2.5%到25%，更優選的范圍是5%到20%。
將前面提到的藥物組合物配制成服用方便的并且劑量均勻的藥劑單位是非常有利的。用于說明書和權利要求書的藥劑單位指的是適用于單劑量的獨立單位，為了使其與藥物載體一起產生所期望的治療效果，每個藥劑單體都含有經計算的預定量的活性成分。這樣的藥劑單位的實例有片劑(包括模壓片和包衣片)、膠囊劑、丸劑、袋裝粉劑、糯米紙劑、溶液型注射劑和懸浮液型注射劑、茶匙劑、湯匙劑等，并且可將上述藥劑單位分成更小單位。
鑒于抗中風性質，式(Ⅰ)化合物〔外消旋混合藥和(S)構型體〕及其酸加成鹽可用于各種病情的緊急治療，例如局部缺血性中風、出血性中風、蛛網膜下出血，它們也可以用于胎兒窒息后腦損傷的緊急治療。進一步講，本發明還提供了上述疾病的治療方法，該方法包括系統服用抗中風有效量的式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的加成鹽。在上述疾病的治療中的專業人員可容易地從后面公開的實驗結果中確定有效量。一般說來，抗中風有效劑量為每天約0.1mg到100mg，優選的范圍是1mg到50mg，對用藥者來說，所需要的劑量每天以合適的時間間隔，用藥二、三、四或更多次的分劑量是合適的。該分劑量可以被配制成單位藥劑形式，例如，每單位藥劑形式含有0.1到100mg，尤其是含有1到50mg的活性成分。
式(Ⅰ)化合物優選的給藥方式是靜脈給藥。除了抗中風有效量的式(Ⅰ)化合物，靜脈給藥的藥物組合物可以含有緩沖系統、等滲劑、水、環糊精及其醚衍生物和任意選擇的其他藥學上可接受的組分。
下述實施例目的在于說明本發明，而不是限制本發明的范圍。
實驗部分A.中間體的制備實施例1攪拌并冷卻(冰浴)13.0g3，4-二氟苯酚和200mlN，N-二甲基甲酰胺的混合物，在其中加入4.8g氫化鈉在礦物油中的分散體(50%)，攪拌1小時后再加入22.8g(S)-(環氧乙烷基甲基)4-甲基苯磺酸酯的N，N-二甲基甲酰胺溶液。室溫下攪拌過夜。反應混合物倒入冰水中，用甲苯提取產物。提取液用NaCl(稀)和水洗滌后干燥，過濾并蒸發，蒸餾殘留物(13.3Pa，55℃)，得9.5g(51.0%)(S)-[(3，4-二氟苯氧基)甲基]環氧乙烷。(中間體1)實施例2將117.1g3，4-二氟苯酚，185.5g氯甲基環氧乙烷，125g碳酸鉀和500ml丙酮的混合物攪拌回流48小時。蒸發反應混合物，殘留物溶于二氯甲烷中。依次用水、NaOH(aq.)(2X)和水洗滌，然后干燥、過濾并蒸發。蒸餾殘留物(13.3Pa，58℃)，得90.4g(54.0%)[(3，4-二氟苯氧基)甲基]環氧乙烷(中間體2)。
B.最終化合物的制備實施例3
將3.4g中間體2，6.1gN-甲基-N-(4-哌啶基)-2-苯并噻唑胺二氫溴化物，100ml2-丙醇和5.3g碳酸鈉的混合物攪拌回流過夜。蒸發反應混合物。將殘留物分配到水和二氯甲烷中。分離出有機層，將其干燥、過濾、蒸干、殘留物經柱層析(硅膠，CHCl3/CH3OH98∶2)純化。蒸發所需的流分，將殘留物在2-丙醇中轉變成二氫氯化物鹽。濾出產物，用2-丙醇和2，2′-氧二丙烷洗滌，并在60℃和80℃干燥。得6.1g(80.3%)4-(2-苯并噻唑基)甲氨基]-α-[(3，4-二氟苯氧基)甲基]-1-哌啶乙醇二氫氯化物。mp211.8°(化合物1)。
用相似的方法也可以制備(-)-(S)-[(2-苯并噻唑基)甲氨基]-α-[(3，4-二氟苯氧基)甲基]-1-哌啶乙醇(E)-2-丁烯二酸酯(1∶1);mp167.8℃;[α]20D＝-7.44°，(濃度＝1%，在甲醇中)(化合物2)。
實施例4攪拌10g中間體1;14.3份N-甲基-N-(4-哌啶基)-2-苯并噻唑胺(根據US-4，861，785的方法制備);14.2g碳酸鈉和112ml正丁醇的混合物，并往其中滴加11.2ml水。攪拌回流16小時后，用100ml水稀釋反應混合物。分出有機層、干燥、過濾并蒸發。將殘留的油狀物溶于200ml二氯甲烷中，溶液加50g硅膠攪拌2小時。濾出硅膠，用二氯甲烷和甲醇(95∶5)的混合液洗滌。蒸發濾液，殘留的油狀物用2，2′-氧二丙烷結晶。濾出結晶，在50℃干燥，得7.5g(38.7%)(+)-(S)-4-[(2-苯并噻唑基)甲氨基]-α-[(3，4-二氟苯氧基)甲基]-1-哌啶乙醇;mp65.8℃;[α]20D＝+4.38°(濃度＝1%，在甲醇中)(化合物3)。
用相似方法也可以制備(±)-(RS)-4-[(2-苯并噻唑基)甲氨基]-α-[(3，4-二氟苯氧基)甲基]-1-哌啶乙醇;mp86.4℃(化合物4)。
實施例54.0g化合物2用氨處理成游離堿形式。蒸發溶液，將殘留物在2-丙醇中轉化成二氫氯化物鹽。濾出該鹽，用2-丙醇和2，2′-氧二丙烷洗滌，在30℃真空干燥，得3.0g(81.4%)(-)-(S)-4-[(2-苯并噻唑基)甲氨基]-α-[(3，4-二氟苯氧基)甲基]-1-哌啶乙醇二氫氯化物;mp148.7℃;[α]20D＝-9.01(濃度＝1%，在甲醇中)(化合物5)。
實施例6將6.9g化合物3溶于100ml丙酮中，室溫下攪拌并滴加10ml溴化氫飽和的2-丙醇溶液。濾出沉淀，蒸發濾液。在丙酮中將殘留物轉化成氫溴酸鹽。濾出產物，用2，2′-氧二丙烷洗滌，60℃下干燥，得5.5g(58.1%)(-)-(S)-4-[(2-苯并噻唑基)甲氨基]-α-[(3，4-二氟苯氧基)甲基]-1-哌啶乙醇二氫溴化物;mp213.7℃(化合物6)。
實施例7將4.38g化合物3溶于150ml乙酸乙酯中，攪拌并加入9.40g7，7-二甲基-2-氧代雙環[2，2，1]庚烷-1-甲磺酸。將反應混合物加熱到均一。冷卻到20℃后，攪拌24小時。濾出結晶產物，用25ml乙酸乙酯洗滌兩次，在50℃下真空干燥，得7g(77.9%)(+)-(S)-4-[(2-苯并噻唑基)甲氨基]-α-[(3，4-二氟苯氧基)甲基]-1-哌啶乙醇(S)-7，7-二甲基-2-氧代雙環[2，2，1]庚烷-1-甲磺酸酯(1∶2);mp119.5℃(化合物7)。
實施例8將4.38g化合物3溶于100ml2-丙醇中，并加入3.11g(+)-(L)-2-[(4-甲基苯基)磺酰氨基]戊二酸。將反應混合物加熱到均一。慢慢冷卻到20℃，并在此溫度下攪拌68小時。濾出沉淀，用25ml2-丙醇洗滌。50℃下真空干燥，得6.87g(93.5%)(+)-(S)-4-[(2-苯并噻唑基)甲氨基]-α-[(3，4-二氟苯氧基)甲基]-1-哌啶乙醇(+)-(L)-2-[(4-甲基苯基)磺酰氨基]戊二酸酯(1∶1)(化合物8)。
c.藥理學實施例式(Ⅰ)化合物的有用的抗中風特性可由下述實驗程序得到證明。
實施例9大白鼠光化學模型的后處理將重260-280g的雄性Wister大白鼠在N2O/O2混合氣中用鹵代烷麻醉。實驗動物被放置到定向裝置中，切開頭皮露出顱骨表面，將導管插入外側尾靜脈。以正常的血液動力學指標和血液氣體，在2分鐘內往實驗動物體內靜脈輸注RoseBengal(30mg/kg，15mg/ml，在0.9%NaCl中)。然后，用纖維光束形式的冷白光集中照射顱骨。照射范圍為直徑1mm，照射時間為5分鐘，光束對準右側頂骨的感覺運動的大腦皮層的后肢區域。栓塞形成五分鐘后(即光偏移五分鐘后)，給大鼠靜脈注射化合物5的集合藥團或它的媒介物，10%羥丙基-β-環糊精。
神經系統學實驗，包括肢體位置反應，在栓塞形成的最初兩天內，間隔24小時進行。觸覺的前向和側向的位置反應的試驗通過用爪子的背部或側面輕輕觸及實驗臺邊緣來進行(試驗2次)。本體感受的前向和側向位置反應包括在實驗臺邊緣推大白鼠的爪子以刺激肢體肌肉和關節(試驗2次)。也可將大白鼠放在升高的平臺邊緣以估計本體感受的內收作用;將一只爪子從實驗臺邊緣向下輕輕拉動使其離開試驗臺邊緣，突然松開，檢查它的恢復和位置反應(試驗1次)。5次試驗中每次的位置反應的得分數為0，表示沒有位置反應;1，表示有不完全的和/或滯后的位置反應;2，表示有迅速的完全的位置反應。對每個肢體來說，總計觸覺/本體感受的位置反應的得分，包括平臺試驗，其最大值是10。我們報告的是從后肢對側中樞缺損到新皮質層栓塞的結果。每個劑量用六只大白鼠。下面給出化合物5的實驗結果。
表1列出了肢體位置反應的得分數的中值和極值以及在栓塞形成1天和2天后被保護的大白鼠數(位置反應得分數≥5)。在栓塞形成1天和2天后，化合物5的ED50(在50%的大白鼠中產生神經系統功能保護的劑量準確率在95%以上)分別是0.16(0.13-0.20)和0.13(0.08-0.20)mg/kg(iv)。

實施例10大白鼠光化學中風模型的后處理除了靜脈注射60分鐘后將10mg/kg恒定劑量的受試化合物以口服給藥方式提供給受試動物外，實驗條件與實施例9相同。
一些本發明化合物的實驗結果與US-4，861，785公開的兩種對照化合物作了比較。
表2列舉了栓塞形成2天后肢體位置反應得分數的中值和極值以及被保護的大白鼠數(得分數≥5)。其用藥劑量是1.25mg/kg(iv)+10mg/kg(p.o.)的受試化合物。
c.組合物實施例下列配方舉例說明了按照本項發明，對溫血動物系統或局部用藥時，合適的單位劑量形式的典型的藥物組合物。
在這些實施例中使用的“活性組分”(A.I.)指的是式(Ⅰ)化合物，藥學上可接受的酸加成鹽或其立體化學異構體。
實施例11注射液a)1.8g4-羥基苯甲酸甲酯和0.2g4-羥基苯甲酸丙酯溶解于大約0.5l注射用沸水中，冷卻到約50℃后，攪拌并加入4g乳酸，0.05g丙二醇和1gA.I.。溶液冷卻到室溫，補充注射用水到1l，得每ml含A.I.1mg的溶液。過濾使溶液消毒(U.S.P.ⅩⅦP.811)并裝在消毒容器中。
b)活性成分4mg氯化鈉3.59mg檸檬酸鈉(2aq)5.8mg檸檬酸(1aq)62μg羥丙基-β-環糊精(MS＝0.4)100mg鹽酸(1N)或氫氧化鈉(1N)調至pH6.9水補充至1ml制備方法18l冷的無熱原水過濾消毒，邊攪拌邊加入2kg羥丙基-β-環糊精(MS＝0.4)，116g檸檬酸鈉(2aq)，1.24g檸檬酸(1aq)和71.8g氯化鈉。將溶液冷卻到25℃。通過加NaOH(1N)或鹽酸(1N)將pH值調整到6.9。溶液攪拌到均一，并冷卻至2℃到8℃。將80g式(Ⅰ)化合物加到檸檬酸緩沖溶液中，在低于8℃的溫度下，攪拌5分鐘。用冷的無熱原水稀釋到20l，在消毒氮氣中過濾消毒，最后把溶液分裝到1ml消毒容器中。
用適量的組分以相似的方法可配制下列配方以獲得所需的組合物溶液。
c)活性組分1mg鹽酸(1N)6.35mg羥丙基-β-環糊精10mg無水葡萄糖46mg氫氧化鈉(1N)調至pH4水補充至1ml實施例12口服滴劑在60～80℃下，將50gA.I.溶解于0.5l2-羥基丙酸和1.5l聚乙二醇中。冷卻到30～40℃后，加35l聚乙二醇，充分攪拌混合物。然后加入1750g糖精于2.5l純水的溶液，邊攪拌邊加2.5l可可香精和適量的聚乙二醇，使體積為50l。得到含1mg/mlA.I.的口服滴劑。將得到的溶液裝入合適的容器中。
實施例13口服溶液將9g4-羥基苯甲酸甲酯和1g4-羥基苯甲酸丙酯溶于4l煮沸的純水中。首先將10g2，3-二羥基丁二酸，然后再將8gA.I。溶于3l上述溶液中。將上述后一個溶液與剩余的前一個溶液合并，并加入12l1，2，3-丙三醇和3l70%山梨醇溶液。將40g糖精鈉溶于0.5l水中，并加入2ml覆盆子和2ml鵝莓香精。將后一個溶液和前一個溶液合并，加適量的水，使總體積為20l，得到每茶匙(5ml)含2mgA.I.的口服液。將得到的溶液裝入合適的容器內。
實施例14膠囊劑將2gA.I.，6g十二烷基硫酸鈉，56g淀粉，56g乳糖，0.8g膠體二氧化硅和1.2g硬脂酸鎂放在一起用力攪拌。得到的混合物裝入1000粒合適的硬明膠膠囊中。每粒含2mgA.I.。
實施例15包衣片劑片芯的制備將10gA.I.，570g乳糖和200g淀粉充分混合。然后用5g十二烷基硫酸鈉和10g聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-K90 )在約200ml水中的溶液濕潤。將濕粉混合物過篩，干燥并再次過篩。然后，加入100g微晶纖維素(Avicel )和15g氫化植物油(Sterotex )。充分混合均勻，壓片，共得10，000片，每片含1mg活性成分。
包衣將5g乙基纖維素(Ethocel 22CPS )在150ml二氯甲烷中的溶液加到10g甲基纖維素(Methocel 60HG )在75ml變性酒精的溶液中。然后，加入75ml二氯甲烷和2.5ml1，2，3-丙三醇。將10g聚乙二醇溶融并溶于75ml二氯甲烷中。將后形成的溶液加到前一個溶液中，再加入2.5g硬脂酸鎂，5g聚乙烯吡咯烷酮和30ml濃色素懸浮液(Opaspray K-1-2109 )并使之均漿。在包衣鍋中用該混合物使片芯包衣。
權利要求
1.一種藥物組合物的制備方法，該方法包括將抗中風有效量的式(1)所示的化合物、其外消旋混合物、(S)構型體或它們藥學上可接受的酸加成鹽與藥學上可接受的載體緊密混合，所說式(1)為
2.按照權利要求1的方法，其特征在于活性組分與環糊精或其醚衍生物水溶液緊密混合，在該混合之前、之中或之后可選擇性地加入其它藥學上可接受的組分，并可選擇性地冷凍干燥所獲得的溶液，也可選擇性地用水恢復冷凍干燥后的殘留物。
全文摘要
一種含式(I)所示的化合物、其外消族混合物、(S)構型體或它們藥學上可以接受的酸加成鹽的藥物組合物的制備方法，所說式(1)為上式。
文檔編號A61K9/48GK1113437SQ9510563
公開日1995年12月20日 申請日期1995年5月30日 優先權日1991年2月25日
發明者R·A·施托布羅克斯, G·A·J·格羅韋爾斯 申請人:詹森藥業有限公司