專利名稱：從巖黃連總生物堿中提純脫氫卡維丁及注射制劑增溶方法
技術領域：
本發明涉及一種脫氫卡維丁的提純、增溶方法，特別涉及一種從巖黃連總生物堿中提純脫氫卡維丁及其注射制劑的增溶方法。
背景技術：
脫氫卡維丁，又稱巖黃連堿，存在于罌粟科植物中，是罌粟科植物巖黃連中治療肝炎疾病的有效成份。
在本發明之前，已經有供肌肉注射用的注射制劑。由于目前只能得到巖黃連總生物堿，而所含的脫氫卡維丁的水溶性非常小，無法制成水溶性的藥物制劑，故肌肉注射制劑采用添加表面活性劑如聚山梨酯80，使其增溶，然后制成肌肉注射制劑。這是目前采用的方法。
但這種增溶方法或工藝存在著諸多缺陷，其中最大的缺陷一是只能制成肌肉注射制劑，而肌肉注射制劑的藥物治療效果遠遜于靜脈注射制劑；二是所用表面活性劑聚山梨酯80具有溶血作用，臨床應用時有相當大的副作用，不利于病人身體恢復和健康。此外，這種含有脫氫卡維丁的提取物只是巖黃連總生物堿的粗提物，其本身治療效果也是有限的。所以，現有的肌肉注射制劑在療效和安全性上都不能得到有效保證。

發明內容
本發明的目的就在于克服上述缺陷，研制一種提取純化脫氫卡維丁及其可用于靜脈注射制劑的增溶方法或工藝。
本發明的技術方案是從巖黃連總生物堿中提純脫氫卡維丁及注射制劑增溶方法，步驟包括PH值分級相轉移法(1)取巖黃連總生物堿1份，加純化水或去離子水2～50份混合；(2)加入10％酸性物質溶液，調節PH值在2～4內；(3)加熱、攪拌，使之溶解；(4)澄清過濾，濾液用濃度低于10％的堿性物質溶液，調節PH值；(5)當PH值為7時，進行PH梯度調節；(6)采用有機溶媒進行相轉移，用量為總生物堿的1～10倍，提取3～5次；(7)輔以薄層層析和/或高效液相分析，將在347nm處有最大吸收的部分保留、合并；(8)減壓、蒸干有機溶媒；(9)40～100％醇溶液回流使相轉移得到的脫氫卡維丁溶解；(10)冷置8小時以上，使析出脫氫卡維丁結晶；(11)過濾，用注射用水洗滌數次并抽干后，在20～80℃干燥4小時以上，得高純度脫氫卡維丁。
或柱層析分離法(1)用固體量2～20倍體積的90％醇溶液回流，使之溶解；(2)醇溶液上層析柱采用柱層析分離純化；
(3)采用梯度醇液洗脫，分段收集洗脫液；(4)輔以薄層層析和/或高效液相分析，將富含脫氫卡維丁的部分分離、析出、合并；(5)減壓蒸去部分溶劑，冷置8小時以上，使析出的脫氫卡維丁結晶完全；(6)過濾，用注射用水洗滌數次并抽干后，在20～80℃干燥4小時以上，得高純度脫氫卡維丁。
或PH值分級相轉移法、柱層析分離法結合(1)巖黃連總生物堿1份，加純化水或去離子水2～50份混合；(2)加入10％酸性物質溶液，調節PH值在2～4內；(3)加熱、攪拌，使之溶解；(4)澄清過濾，濾液用濃度低于10％的堿性物質溶液，調節PH值；(5)當PH值為7時，進行PH梯度調節；(6)采用有機溶媒進行相轉移，用量為總生物堿的5～10倍，提取3～5次；(7)輔以薄層層析和/或高效液相分析，將在347nm處有最大吸收的部分保留、合并；(8)減壓、蒸干有機溶媒；(9)用固體量2～20倍體積的90％醇溶液回流，使之溶解；(10)醇溶液上層析柱采用柱層析分離純化；(11)采用梯度醇液洗脫，分段收集洗脫液；
(12)輔以薄層層析和/或高效液相分析，將富含脫氫卡維丁的部分分離、合并；(13)減壓蒸去部分溶劑，冷置8小時以上，使析出的脫氫卡維丁結晶；(14)過濾，用注射用水洗滌數次并抽干后，在80℃干燥4小時以上，得高純度脫氫卡維丁。
本發明的進一步技術方案是將提純的脫氫卡維丁懸浮于水中，以酸性物質溶液或將脫氫卡維丁加入到酸性物質溶液中使成鹽，調節PH值3～6.5之間，并不停攪拌使溶解，然后按常規制劑工藝或方法制成注射制劑，包括小容量注射液、凍干型注射劑、分裝型粉針劑、氯化鈉或葡萄糖的等滲輸液型注射劑。
本發明的優點和效果在于采用PH分級相轉移法，或柱層析分離法，或二者相結合的方法分離提純脫氫卡維丁，然后直接用酸性物質對脫氫卡維丁進行增溶，制成可靜脈滴注的注射制劑，其治療效果遠高于肌肉注射。解決了以往用添加表面活性劑才能制成肌肉注射制劑的局限，避免了加入表面活性劑聚山梨酯80帶來的溶血副作用，從而有利于病人身體健康和恢復。本發明工藝簡單、成本低、療效好，脫氫卡維丁純度高達99.00％以上。
具體實施例方式
實施例1PH值分級相轉移法
取巖黃連總生物堿1份，加純化水或去離子水35份混合；加入10％的鹽酸溶液，調節PH值在3.5；加熱、攪拌，使之溶解；澄清過濾，濾液用8％的碳酸鈉溶液，調節PH值；當PH值為7時，進行PH梯度調節，即PH為7、PH為9、PH為11、PH為13時，分別采用氯仿或乙酸乙酯進行相轉移；用量為總生物堿的8倍，分3～5次進行提取；合并每級的相轉移提取物，輔以薄層層析和/或高效液相分析，將在347nm處有最大吸收的部分保留、合并；減壓、蒸干有機溶媒，用90％乙醇回流使溶解后，加1％活性炭脫色，過濾脫炭；冷置8小時以上，使析出脫氫卡維丁結晶；過濾，濾餅用注射用水洗滌數次并抽干后，在80℃干燥4小時以上，得高濃度脫氫卡維丁。
實施例2柱層析分離法結合用固體量5倍體積的90％醇溶液回流，使之溶解；醇溶液上硅膠層析柱采用柱層析分離純化；采用梯度醇液洗脫，每一梯度15％的醇濃度差，從0～100％分段收集洗脫液；輔以薄層層析和/或高效液相分析，將富含脫氫卡維丁的部分分離出后合并，將這部分溶液活性炭脫色、過濾，適當濃縮；冷置24小時以上，使析出黃棕色的脫氫卡維丁結晶；過濾，用注射用水洗滌濾餅數次并抽干后，在80℃干燥4小時以上，得高純度脫氫卡維丁。
實施例3PH值分級相轉移法、柱層析分離法結合取巖黃連總生物堿1份，加純化水或去離子水30份，混合，使其分散；用10％酸性物質溶液包括無機或有機酸，無機酸包括鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸等，有機酸包括乙酸、丙酸、丁酸、枸櫞酸等，本例中具體是無機酸鹽酸，調節PH值到3(左右)，并加熱攪拌，使之溶解；澄清、過濾，濾液用10％堿性物質溶液碳酸鈉(也可氫氧化鈉或氫氧化銨)調節溶液的PH值；從PH值為7開始，進行PH值梯度調節，每級2個PH值差；再用有機溶媒乙醚(或氯仿、乙酸乙酯)進行相轉移，使之與水形成互不相溶的兩相，并使脫氫卡維丁轉溶于有機溶媒乙醚中，獲得游離生物堿，用量為總生物堿的8倍，提取3至5次；這一步也可用鹽析法取代；然后，再輔以薄層層析和/或高效液相分析，將在347nm處有最大吸收的部分保留并合并；再減壓蒸干有機溶媒；用固體量15倍體積的90％甲醇(或乙醇)回流并使之溶解；醇溶液上層柱析進行柱層析分離、純化，柱層析分離包括離子樹脂柱層析、大孔樹脂柱層析、硅膠柱層析、氧化鋁柱層析、聚酰胺柱層析分離等，本例中采用的是硅膠柱層析；梯度醇溶液洗脫，每級15％濃度差，從0～100％；然后，分段收集洗脫液，輔以薄層層析和/或高效液相分析，將脫氫卡維丁成份分離出，其濃度可大于或等于99.0％，未達到的可重復上柱分離，直至達到；再將含有高純度的脫氫卡維丁的洗脫液適當濃縮后，放置在冷處24小時或以上，就有大量黃棕色針狀結晶析出，過濾；濾餅用注射用水洗滌數次并抽干，在80℃溫度下干燥4小時或以上，即可得高純度脫氫卡維丁；將脫氫卡維丁懸浮于水中，再用酸性溶液(包括鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機酸或乙酸、丙酸、丁酸、甲磺酸、枸櫞酸、酒石酸、重酒石酸、富馬酸、乳酸、苯甲酸、水楊酸、馬來酸、山梨酸、谷氨酸、抗壞血酸等有機酸)鹽酸調節溶液PH值在3～6.5之間，并不停攪拌，必要時可適度加溫以促進溶解，進而得脫氫卡維丁的水溶性鹽溶液；再按常規制劑工藝將其制成適合注射的藥劑如小容量注射液、凍干型注射劑、分裝型粉針劑、大容量注射液即含有氯化鈉或葡萄糖的等滲輸液型注射劑。
巖黃連總生物堿的提取是根據中華人民共和國國家藥品監督管理局2002年11月16日頒布的編號為WS-1149(2D-1149)-2002的國家藥品標準(試行)公布的巖黃連提取物制法進行提取所獲得。
巖黃連總生物堿包括脫氫卡維丁、右旋四氫巴馬丁、小檗堿和延胡素丑素。
本發明的保護范圍和說明并不僅僅局限于本實施例的描述。
權利要求
1.從巖黃連總生物堿中提純脫氫卡維丁及注射制劑增溶方法，步驟包括PH值分級相轉移法(1)取巖黃連總生物堿1份，加純化水或去離子水2～50份混合；(2)加入10％酸性物質溶液，調節PH值在2～4內；(3)加熱、攪拌，使之溶解；(4)澄清過濾，濾液用濃度低于10％的堿性物質溶液，調節PH值；(5)當PH值為7時，進行PH梯度調節；(6)采用有機溶媒進行相轉移，用量為總生物堿的1～10倍，提取3～5次；(7)輔以薄層層析和/或高效液相分析，將在347nm處有最大吸收的部分保留、合并；(8)減壓、蒸干有機溶媒；(9)40～100％醇溶液回流使相轉移得到的脫氫卡維丁溶解；(10)冷置8小時以上，析出脫氫卡維丁結晶；(11)過濾，用注射用水洗滌數次并抽干后，在20～80℃干燥4小時以上，得高純度脫氫卡維丁。或柱層析分離法(1)用固體量2～20倍體積的90％醇溶液回流，使之溶解；(2)醇溶液上層析柱采用柱層析分離純化；(3)采用梯度醇液洗脫，分段收集洗脫液；(4)輔以薄層層析和/或高效液相分析，將富含脫氫卡維丁的部分分離、析出，合并；(5)減壓蒸去部分溶劑，冷置8小時以上，使析出的脫氫卡維丁結晶完全；(6)過濾，用注射用水洗滌數次并抽干后，在20～80℃干燥4小時以上，得高純度脫氫卡維丁。或PH值分級相轉移法、柱層析分離法結合(1)巖黃連總生物堿1份，加純化水或去離子水2～50份混合；(2)加入10％酸性物質溶液，調節PH值在2～4內；(3)加熱、攪拌，使之溶解；(4)澄清過濾，濾液用濃度低于10％的堿性物質溶液，調節PH值；(5)當PH值為7時，進行PH梯度調節；(6)采用有機溶媒進行相轉移，用量為總生物堿的5～10倍，提取3～5次；(7)輔以薄層層析和/或高效液相分析，將在347nm處有最大吸收的部分保留、合并；(8)減壓、蒸干有機溶媒；(9)用固體量2～20倍體積的90％醇溶液回流，使之溶解；(10)醇溶液上層析柱采用柱層析分離純化；(11)采用梯度醇液洗脫，分段收集洗脫液；(12)輔以薄層層析和/或高效液相分析，將富含脫氫卡維丁的部分分離、合并；(13)減壓蒸去部分溶劑，冷置8小時以上，使析出的脫氫卡維丁結晶；(14)過濾，用注射用水洗滌數次并抽干后，在80℃干燥4小時以上，得高純度脫氫卡維丁。
2.根據權利要求1所述的從巖黃連總生物堿中提純脫氫卡維丁及注射制劑增溶方法，其特征在于PH值分級相轉移法步驟(2)、PH值分級相轉移法與柱層析分離法結合步驟(2)中的酸性物質溶液可以是有機酸性物質溶液或無機酸性物質溶液。
3.根據權利要求1所述的從巖黃連總生物堿中提純脫氫卡維丁及注射制劑增溶方法，其特征在于將提純的脫氫卡維丁懸浮于水中，以酸性物質溶液或將脫氫卡維丁加入到酸性物質溶液中使成鹽，調節PH值3～6.5之間，并不停攪拌使溶解，然后按常規制劑工藝或方法制成注射制劑，包括小容量注射液、凍干型注射劑、分裝型粉針劑、氯化鈉或葡萄糖的等滲輸液型注射劑。
全文摘要
本發明涉及一種從巖黃連總生物堿中提純脫氫卡維丁及其注射制劑的增溶方法。本發明采用pH分級相轉移法，或柱層析分離法，或二者相結合的方法分離提純脫氫卡維丁，然后直接用酸性物質對脫氫卡維丁進行增溶，制成可靜脈滴注的注射制劑，其治療效果遠高于肌肉注射。解決了以往用添加表面活性劑才能制成肌肉注射制劑的局限，避免了加入表面活性劑聚山梨酯80帶來的溶血副作用，從而有利于病人身體健康和恢復。本發明工藝簡單、成本低、療效好，脫氫卡維丁純度高達99.00％以上。
文檔編號A61P31/00GK1724533SQ20051003775
公開日2006年1月25日 申請日期2005年2月4日 優先權日2005年2月4日
發明者王寧馨, 郭曙平 申請人:郭曙平