專利名稱：一種抗癌體內植入劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種抗癌體內植入劑，屬于藥物技術領域。
背景技術：
實體腫瘤的治療主要包括手術、放療及化療等方法。在所用的各種治療當中，化療較為安全可靠，已廣泛應用于多種惡性腫瘤。其中，較為常用的化療藥物為亞硝脲類抗癌藥物。然而，進一步研究發現，許多腫瘤細胞內的DNA修復及其它自身保護功能在化療藥物治療之后明顯增加，進而表現為對所用藥物的耐受性增強。后者常導致腫瘤細胞對其它抗癌藥物的耐受性的增強，其結果是治療更加困難，最終導致治療失敗。
最近發現，聯合化療能夠滅活或抑制細胞內的DNA修復蛋白的功能，從而增強部分腫瘤細胞對化療的敏感性，其中包括亞硝脲類抗癌藥物，參見多蘭等“O6-芐基鳥嘌呤類似物對人腫瘤細胞對烷化劑的細胞毒敏感性的作用”《癌癥研究》51期3367-3372頁(1991年)(Dolan et al.，Cancer Res.，51，3367-3372，1991)。然而，腫瘤間質中的血管、結締組織、基質蛋白、纖微蛋白及膠原蛋白等不僅為腫瘤細胞的生長提供了支架及必不可少的營養物質，還影響了化療藥物在腫瘤周圍及腫瘤組織內的滲透和擴散，參見尼提等“細胞外間質的狀況對實體腫瘤內藥物運轉的影響”《癌癥研究》60期2497-503頁(2000年)(Netti PA，Cancer Res.2000，60(9)2497-503)。由于實體腫瘤過度膨脹性增生，其間質壓力、組織彈性壓力、流體壓力及間質的粘稠度均較其周圍正常組織為高，因此，常規化療，難于腫瘤局部形成有效藥物濃度，單純提高給藥劑量又受到全身反應的限制，參見孔慶忠等“瘤內放置順鉑加系統卡莫司汀治療大鼠腦腫瘤”《外科腫瘤雜志》69期76-82頁(1998年)(Kong Q et al.，J Surg Oncol.1998 Oct；69(2)76-82)。除此之外，低劑量的抗癌藥物治療不僅能夠增加癌細胞的藥物耐受性，而且還可促進其侵潤性生長”，參見梁等“抗癌藥物脈沖篩選后增加了人肺癌細胞的藥物耐受性及體外侵潤能力并伴有基因表達的改變”《國際癌癥雜志》111期484-93頁(2004年)(Liang Y，et al.，Int J Cancer.2004；111(4)484-93)。
由于決定治療效果的主要因素除腫瘤細胞對藥物的敏感程度外，更為關鍵的是腫瘤局部的藥物濃度。由于腫瘤間質中的血管、結締組織、基質蛋白、纖微蛋白及膠原蛋白等不僅為腫瘤細胞的生長提供了支架及必不可少的營養物質，還影響了化療藥物在腫瘤周圍及腫瘤組織內的滲透和擴散。

發明內容本發明針對現有技術的不足，提供一種抗癌體內植入劑。
本發明抗癌體內植入劑，包括抗癌有效量的抗癌有效成分和藥用輔料，抗癌有效成分為亞硝脲類抗癌藥物和亞硝脲類抗癌藥物增效劑。亞硝脲類抗癌藥物增效劑選自鉑類化合物、紫杉醇類抗癌藥物或植物生物堿之一或組合。
亞硝脲類藥物選自下列之一或多種阿雌莫司汀(Alestramustine)、鏈佐星(streptozotocin，STZ)、阿莫司汀(Atrimustine)、氨莫司汀(Ambamustine)、尼莫司汀(ACNU，Nimustine)、苯達莫司汀(Bendamustine)、二硫莫司汀(Ditiomustine)、波呋莫司汀(Bofumustine)、卡莫司汀(卡氮芥、BCNU、carmustine)、依莫司汀(Elmustine)、依考莫司汀(Ecomustine)、加莫司汀(Galamustine，GCNU)、福莫司汀(Fotemustine)、雌莫司汀(Estramustine，81)、合莫司汀(hemustine，heCNU)、奈莫司汀(Pentamustine，Neptamustine)、甘露莫司汀(Mannomustine，MCNU)、洛莫司汀(lomustine，CCNU，環己亞硝脲，羅氮芥)、甲基洛莫司汀(methyl-CCNU)、司莫司汀(Semustine、甲環亞硝脲、Me-CCNU)、雷莫司汀(Ranimustine)、潑尼莫司汀(Prednimustine)、烏拉莫司汀(Uramustine，UracilMustard)、薩莫司汀(SarCNU)、牛磺莫司汀(Tauromustine)、他莫司汀(Tallimustine)或螺莫司汀(Spiromustine)等。
以上亞硝脲類藥物還包括它們的鹽，如，但不限于，硫酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、乳糖酸鹽、醋酸鹽、天冬酸鹽、硝酸鹽、枸櫞酸鹽、嘌呤或嘧啶鹽、琥珀酸鹽及馬來酸鹽等。
以上亞硝脲類藥物及其鹽可單選或多選，但以鏈佐星(STZ)、雌莫司汀、尼莫司汀、洛莫司汀和卡莫司汀為優選。
以上亞硝脲類抗癌藥物在抗癌體內植入劑中的重量百分比含量為0.01％-99.99％，以1％-50％為佳，以2％-30％為最佳，上述鉑類化合物及其類似物或衍生物選自，如，但不限于，順鉑(順氯氨鉑、DDP)、卡鉑(Carboplatin，碳鉑)、庚鉑、得那鉑、恩洛鉑(Enloplatin)、環硫鉑(環乙二胺硫酸鉑)、順螺鉑(螺磺鉑胺)、右奧馬鉑(Dexormaplatin)、異丙鉑(lproplatin)、洛鉑(Lobaplatin)、米鉑(Miboplatin)、奈達鉑(Nedaplatin)、奧馬鉑(Ormaplatin)、奧沙利鉑(Oxaliplatin，Oxaloplatin)、司鉑(Sebriplatin)、螺鉑(Spiroplatin)或折尼鉑(Zeniplatin)等。以上鉑類化合物可單選或多選，以順鉑、卡鉑、右奧馬鉑和奧沙利鉑為優選。以上鉑類化合物在抗癌體內植入劑中的重量百分比含量為1-35％。
紫杉醇類抗癌藥物(taxanes)選自，如，但不限于，紫杉酚(Paclitaxel，taxol，泰素)、多烯紫杉醇(Docetaxel，紫杉特爾、多西他賽)以及紫杉醇的衍生物，如，但不限于，2’-羥基紫杉酚(paclitaxel-2’-hydroxy)、10-去乙酰漿果赤霉素III(10-deacetylbaccatin III，DAB)、14β-羥基-10-去乙酰漿果赤霉素III(14-OH-DAB)、9-二氫-13-漿果赤霉素III(DHB)、IDN5109、10-去乙酰紫杉酚(10-deacetyl taxol)、7-表-紫杉酚(7-epi-taxol)、漿果赤霉素、漿果赤霉素III(baccatin III)、漿果赤霉素V、云實紫杉(Taxus brevifolia)、加拿大紫杉(Taxus Canadensis)、漿果紫杉(Taxus baccata)以及中國紫杉(Taxus chinensis)、尖齒紫杉(Taxus cuspidata)、培植紫杉(Taxus X media cultivars)、云南紫杉Taxusyunnanensis)及佛羅里達紫杉(Taxus floridana)等。以上紫杉醇類抗癌藥物還包括其鹽，如，但不限于，硫酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、乳糖酸鹽、醋酸鹽、天冬酸鹽、硝酸鹽、枸櫞酸鹽、嘌呤或嘧啶鹽、琥珀酸鹽及馬來酸鹽等。
上述紫杉醇類抗癌藥物及其鹽可單選或多選。以紫杉酚(Paclitaxel，taxol)和多烯紫杉醇(Docetaxel，多西他賽)為優選。以上紫杉醇類抗癌藥物在抗癌體內植入劑中的重量百分比含量為1-35％。
植物生物堿是來源于植物的抗腫瘤植物藥，選自，但不限于，長春堿、異長春堿、長春吲哚、長春氮芥、氧橋長春堿、長春新堿(Vincristine，醛基長春堿)、足葉草肼(米托肼)、(硫酸)長春新堿、長春花堿(Vinblastine)、酒石酸脫水長春堿、酒石酸環氧長春堿、環氧長春堿、酒石酸長春質堿、海南粗榧新堿、海南粗榧內酯、長春西汀、長春瑞濱(Vinorelbine，異長春花堿)、重酒石酸長春瑞濱、長春瑞賓雙酒石酸鹽、酒石酸長春瑞賓、長春倍酯(Vinmegallate)、長春羅新(Vinleurosine)、長春西醇(Vinleucinol)、長春甘酯(Vinglycinate)、硫酸長春苷酯、長春素、長春磷汀(Vinfosiltine)、長春米特(Vinformide)、長春氟寧(Vinflunine)、長春匹定(Vinepidine)、長春地辛(Vindesine，長春花堿酰胺)、長春利定(Vinzolidine)、長春曲醇(Vintriptol)、長春羅定(Vinrosidine)、氧化苦參堿、三尖杉堿(Cephalotaxin)、脫氧三尖杉酯堿、高三尖杉酯堿(Homoharringtonine)、珠囊殼素、野百合堿(Monocrotaline)、美坦新、依利醋銨、駱駝蓬總堿、心菊內酯、梅登素、冬凌草甲素、漳州水仙堿、鹽酸前水仙堿、甲基芐肼、鹽酸甲基芐肼、唐松草堿、唐松草新堿、異娃兒藤堿、娃兒藤新堿或白芙堿等。
以上植物生物堿抗癌藥物還包括它們的鹽，如，但不限于，硫酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、乳糖酸鹽、醋酸鹽、天冬酸鹽、硝酸鹽、枸櫞酸鹽、嘌呤或嘧啶鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽或馬來酸鹽等。
以上植物生物堿及其鹽可單選或多選。以長春新堿、長春花堿、長春瑞濱及三尖杉堿為優選。以上植物生物堿在抗癌體內植入劑中的重量百分比含量為1-35％。
上述亞硝脲類抗癌藥物增效劑在抗癌體內植入劑中所占的比例因具體情況而定，可從0.01％-99.99％，以1％-35％為佳，以2％-20％為最佳。
藥用輔料包括下列之一或其組合(1)生物相容性多聚物，包括生物可降解的或生物不可降解的多聚物及其混合物或共聚物，(2)水溶性低分子化合物，或/和(3)用于實現針劑和緩釋劑等藥物劑型的合適的添加劑及賦型劑。
上述生物可降解的多聚物包括天然的和/或合成的多聚物。合成的多聚物如，但不限于，聚酐類、聚羥基酸、聚酯(polyesters)、聚酰胺(polyamides)、聚原酸酯(polyorthoesters)、聚磷腈(polyphosphazenes)、對羧苯基丙烷(p-CPP)、葵二酸(sebacicacid)等；天然的多聚物如，但不限于，蛋白質及多糖，包括透明質酸、膠原蛋白、明膠、白蛋白等。
上述聚酐類可選用，但不限于，芳香聚酐、脂肪族聚酐；其中芳香聚酐將解較慢，熔點高，有機溶劑中溶解度低，然而，芳香聚酐與脂肪族聚酐的共聚物卻較為理想(美國專利4757128)。其中的代表物是聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸(SA)的共聚物)，而對羧苯基丙烷為芳香聚酐，葵二酸則是一個芳香二酸與一個脂肪二酸的共聚物?？蛇x用的其它芳香或脂肪族聚酐的共聚物在其它美國專利中已有詳細描述(US 4857311；4888176；4789724)。
上述聚羥基酸可選用，但不限于，聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚乳酸(PLA)與聚乙醇酸的混合物、乙醇酸和羥基羧酸的共聚物(PLGA)；當PLA和PLGA混合時，其含量重量百分比分別為0.1-99.9％和99.9-0.1％。聚乳酸的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以10,000-50000為優選，以10,000-20000為最優選；聚乙醇酸的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以10,000-50000為優選，以10,000-20000為最優選；以上聚羥基酸可單選或多選。當單選時，以聚乳酸(PLA)或羥基羧酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)為優選，共聚物的分子量可為，但不限于，1000-100,000，但以10,000-50000為優選；以10,000-20000為最優選；當多選時，以高分子多聚物或不同高分子多聚物組成的復合多聚物或共聚物為優選，以含不同分子量聚乳酸或葵二酸的復合多聚物或共聚物為最優選，如，但不限于，分子量為5000到10000的聚乳酸與分子量為20000到50000的聚乳酸混合、分子量為10000到20000的聚乳酸與分子量為30000到80000的PLGA混合、分子量為5000到10000的聚乳酸與葵二酸混合、分子量為30000到80000的PLGA與葵二酸混合。所指分子量均為由GPC測得的分子量峰值范圍。
上述生物不可降解的多聚物包括，但不限于有機硅聚合物、乙烯乙酸乙烯酯共聚物(Ethelene-vinyl acetate copolymer，EVAc)、聚丙烯腈(polyacrylonitriles)，聚氨基甲酸酯(polyurethanes)及聚磷腈(polyphosphazenes)等。組合物可通過直接擴散的方式將有效成分釋放出來。
為調節藥物釋放速度或改變本發明抗癌體內植入劑的其它特性，可以改變聚合物的單體成分或分子量、添加或調節藥用輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如， 但不限于，各種糖和鹽等。其中糖可為，但不限于，木糖醇、低聚糖及甲殼素等，其中鹽可為但不限于，鉀鹽和鈉鹽等。
本發明抗癌體內植入劑所用的藥用輔料可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質，但以水溶性高分子聚合物為主選，在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、葵二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLGA、乙醇酸和羥基羧酸的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乙醇酸和羥基羧酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和羥基羧酸共聚時的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是對羧苯基丙烷(p-CPP)，對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸共聚時的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％，共混重量比是10/90-90/10，最好是重量比25/75-75/25。
藥用輔料在《藥用輔料大全》(第123頁，四川科學技術出版社1993年出版，羅明生和高天惠主編)中已有詳細描述。另外，中國專利(申請號96115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美國發明專利(專利號5,651,986)也列舉了某些藥用輔料。包括充填劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻止劑。以上藥用輔料有的具有多重作用，因此有的同種物質被列為不同的類別。本發明抗癌體內植入劑可選用的支持物可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質，并不完全根據其分類或定義來限制組合物的技術特征。
抗癌體內植入劑的有效成分可均勻地包裝于整個藥用輔料中，也可包裝于載體支持物中心或其表面；可通過直接擴散或經多聚物降解的方式或如此兩種方式將有效成分釋放。除此之外，抗癌體內植入劑的有效成分也可均勻地包裝于脂質體中，或以現有技術方法制成微球。
本發明的特點在于所用的藥用輔料除高分子聚合物外，還含有上述任意一種或多種其它藥用輔料。添加的藥用輔料統稱為添加劑。添加劑可根據其功能分為充填劑、致孔劑、賦型劑、分散劑、等滲劑、保存劑、阻止劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑等。
藥用輔料還可為流質，如，但不限于芝麻油、混懸液、蒸餾水、生理沖液、以及半固態物質，如果凍、糊劑、軟膏等，上述藥用輔料適用于含或不含添加劑的組合物。
本發明抗癌體內植入劑可制成多種劑型。如，但不限于，針劑、渾懸液、軟膏、膠囊、緩釋劑、植入劑、緩釋植入劑等；呈各種形狀，如，但不限于，顆粒樣、片狀、球形、塊狀、針狀、棒狀及膜狀。在各種劑型中，以體內緩釋植入劑為優選。上述劑型和形狀適用于含或不含添加劑的組合物。
由于本發明抗癌體內植入劑可使常規化療、免疫治療、高熱治療、光化學治療、電療、生物治療、激素治療、磁療、超聲治療、放療及基因治療等方法的作用效果加強。因此在局部緩慢釋放的同時可與上述非手術療法合用，從而使其抗癌效果進一步加強。
當與上述非手術療法合用時，本發明抗癌體內植入劑可與非手術療法同時應用，也可在非手術療法實施前幾天內應用，其目的在于盡可能增強腫瘤的敏感性。不同類抗癌藥物間有增效明顯的作用，從而為根治各種人體及動物原發和轉移實體腫瘤提供一種更有效的新的方法，具有非常高的臨床應用價值。
給藥途徑本發明抗癌體內植入劑可經各種途徑應用，如動脈、皮下、肌肉、皮內、腔內、瘤內、瘤周等。給藥途徑取決于多種因素，如腫瘤所在部位、是否手術或轉移、腫瘤體積大小、腫瘤類別、病人年齡、身體狀況、生育狀況及要求等。為于腫瘤所在部位獲得有效藥物濃度，可選擇性地動脈灌注，腔內灌注(intracavitary)，腹腔(intraperitoneal)或胸腔(intrapleural)及椎管內(intraspinal)給藥，也可臟器內放置，如腸腔內、膀胱內、宮腔內、陰道內、胃內及食道內等。在多種途徑中，以局部給藥，如以選擇性動脈、瘤內、瘤周注射為主，以瘤內、瘤周或瘤腔緩慢釋放的形式為優選，如可選用可種緩釋泵及緩釋膠囊或體內緩釋植入劑。
當以局部給藥時，如以瘤內、瘤周或瘤腔緩慢釋放的形式為優選，局部給藥時還可與全身化療或放療聯合應用。
給藥劑量抗癌藥物的用量取決于很多因素，如，但不限于，腫瘤體積、病人體重、給藥方式、病情進展情況及治療反應。但其原則是在能夠降低腫瘤細胞的修復能力，增加化療作用效果的同時并不明顯增加藥物的毒性反應。
亞硝脲類抗癌藥物的有效劑量為0.01-200毫克/公斤體重，以1-30毫克/公斤體重為理想，以2-20毫克/公斤體重為最理想；亞硝脲類抗癌藥物增效劑的有效劑量為0.01-80毫克/公斤體重，以1-50毫克/公斤體重為理想，以2-10毫克/公斤體重為最理想。
本發明抗癌體內植入劑可以用于治療人、寵物及各種動物的各種癌、肉瘤或癌肉瘤等實體腫瘤，包括起源于大腦、中樞神經系統、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、黏膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宮、卵巢、子宮內膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結腸、直腸的原發或轉移的癌或肉瘤或癌肉瘤。
該抗癌體內植入劑中還可加入其它藥用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼藥、抗凝藥、止血藥等。以上藥用成分可單選或多選，可加入到含或不含添加劑的組合物，其含量因具體需要而定。
本發明抗癌體內植入劑可通過以下方式應用。
將上述有效成分包裝于藥用輔料中，然后局部應用。如選擇性動脈注射和直接瘤體內注射或放置為佳，其中又以局部緩慢釋放為最佳。當局部應用時，可直接置于原發或轉移的實體腫瘤周圍或瘤體內，也可直接置于原發或轉移的實體腫瘤全部或部分切除后所形成的腔內。
本發明的主要成份以生物可容性物質為支持物，故不引起異物反應。支持物體內放置后可降解吸收，故不再手術取出。因在腫瘤局部釋放所含藥物，從而選擇性地提高并延長局部藥物濃度，同時可降低由常規途徑給藥所造成的全身毒性反應。
抗癌體內植入劑可制成各種形狀，其中有效成份的含量因不同需要而定。可制成各種劑型，其中最優選劑型為生物可容性、可降解吸收的植入緩釋劑，可因不同臨床需要而制成各種形狀。其主要成份的包裝方法和步驟在美國專利中(US5651986)已有詳細描述，包括若干種制備緩釋制劑的方法如，但不限于，(iii)把載體支持物粉末與藥物混合然后壓制成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然后固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解于溶劑中，把待包裝的藥物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸發溶劑，乾燥，即所謂的溶解法；(iv)噴霧干燥法；及(v)冷凍粉碎法。其中溶解法可用以微球的制造，其方法是任意的，抗癌體內植入劑也可包裝脂質體中。
本發明制備技術的特點在于將藥物包裝于藥用輔料中，按照比例將有效成份和藥用輔料溶解，待充份混勻之后乾燥。待乾燥后立即成形并消毒分裝。
以上抗癌藥物聯合能夠不同程度的抑制或降低腫瘤細胞DNA修復酶的活性，本發明的體內外實驗發現其聯合應用具有明顯增效作用。當局部放置，不僅能夠克服全身給藥帶來的毒性反應，而且解決了腫瘤局部藥物濃度過低以及細胞對藥物的敏感性問題。
試驗一、亞硝脲類抗癌藥物及其增效劑對體外腫瘤細胞生長的抑制作用。
為驗證不同類抗癌藥物的相互增效所用，本試驗用多種體外培養的腫瘤細胞，包括CNS-1、C6、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)、肝癌等。將不同類抗癌藥物按表1所示之組合，抗癌藥物按10ug/ml的濃度加到體外培養24小時的各種腫瘤細胞中，繼續培養48小時后計數細胞總數并計算其對腫瘤細胞生長的抑制率(％)。
表1
注解(A)BCNU，為亞硝脲類抗癌藥物；(B)奧沙利鉑，為鉑類化合物；(C)多西他賽；為紫杉醇類抗癌藥物；(D)長春瑞賓和(E)長春新堿均為植物生物堿。
試驗二、按試驗一所述之方法檢測亞硝脲類抗癌藥物及其增效劑對體外腫瘤細胞生長的抑制作用。結果見表2。
表2
注解(A)ACNU，為亞硝脲類抗癌藥物；(B)順鉑，為鉑類化合物；(C)紫杉醇和(D)多西他賽均為紫杉醇類抗癌藥物；(E)長春瑞賓為植物生物堿。
試驗三、按試驗一所述之方法檢測亞硝脲類抗癌藥物及其增效劑對體外腫瘤細胞生長的抑制作用。結果見表3。
表3
注解(A)SarCNU，為亞硝脲類抗癌藥物；(B)卡鉑，為鉑類化合物；(C)紫杉醇和(D)多西他賽均為紫杉醇類抗癌藥物；()長春花堿，為植物生物堿。
試驗四、按試驗一所述之方法檢測亞硝脲類抗癌藥物及其增效劑對體外腫瘤細胞生長的抑制作用。結果見表4。
表4
注解(A)CCNU，為亞硝脲類抗癌藥物；(B)奧沙利鉑，為鉑類化合物；(C)紫杉醇(D)多西他賽均為紫杉醇類抗癌藥物；(E)長春瑞賓為植物生物堿。
試驗1到4的結果表明，所用的抗癌藥物在5-10ul/ml濃度時對體外培養腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，而所用的鉑類化合物、紫杉醇類抗癌藥物及植物生物堿對亞硝脲類抗癌藥物均具有明顯的增效作用(P＜0.001)。
試驗五、亞硝脲類抗癌藥物及其增效劑對體外腫瘤細胞生長的抑制作用。
以大白鼠為試驗對象，將2×105個腫瘤細胞皮下注射于其季肋部，待腫瘤生長14天后將其隨機分為以下10組(見表5)。所有藥物均經瘤內放置，劑量為5mg/kg。治療后第30天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表5)。
表5
試驗六、按試驗五所述之方法檢測亞硝脲類抗癌藥物及其增效劑對體內腫瘤細胞生長的抑制作用。結果見表6。
表6
試驗5到6的試驗結果表明，與對照組相比，上述各類抗癌藥物單獨應用對體內腫瘤生長均有明顯抑制作用(P＜0.05)。而所用的鉑類化合物、紫杉醇類抗癌藥物及植物生物堿對亞硝脲類抗癌藥物均具有明顯的增效作用(P＜0.001)。
總之，本發明中所用的鉑類化合物、紫杉醇類抗癌藥物及植物生物堿對亞硝脲類抗癌藥物均具有明顯的增效作用，是本發明的意外發現，但具普遍意義。因此，本發明所述的有效成分亞硝脲類抗癌藥物可與鉑類化合物、紫杉醇類抗癌藥物和植物生物堿中的任意一種或多種成分的組合，此乃本發明的主要技術特征。兩種或兩種以上抗癌藥物聯合不僅互相增效，還可有效地抑制及破壞腫瘤細胞內的DNA修復及其它自身保護功能，進而增加抗癌藥物的治療效果。體內植入劑在其降解吸收的過程中能將抗癌藥物緩慢釋放于腫瘤局部，因此在明顯降低其全身毒性反應的同時還可于腫瘤局部維持有效藥物濃度。本發明的抗癌體內植入劑可制成任意劑型或形狀，但以緩慢釋放劑型為優選。
本發明抗癌體內植入劑的制備方法可為現有技術中的任意方法，其中之一如下1.將稱重的藥用輔料放入容器中，加一定量的有機溶劑溶解均勻，有機溶劑的量不嚴格限定，以充分溶解為宜。
2.加入稱重之抗癌有效成份重新搖勻?？拱┯行С煞菖c藥用輔料的用量比例因具體要求而定。
3.去除有機溶劑。真空干燥或低溫干燥法均可。
4.將干燥后的固體組合物根據需要制成各種形狀。
5.分裝后射線滅菌(射線劑量因體積而異)備用。也可用其它方法滅菌。
具體實施方式
實施例一將80mg分子量為10000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)放入容器中，加一定量的有機溶劑溶解混勻后，加入10毫克卡莫司汀和10mg奧沙利鉑，重新搖勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到抗癌體內植入劑含10％卡莫司汀和10％奧沙利鉑。均為重量百分比。
實施例二按實施例一所述方法制成抗癌體內植入劑，但所不同的是所含之抗癌有效成分為(a)1-35％的阿雌莫司汀、鏈佐星、阿莫司汀、氨莫司汀、尼莫司汀、苯達莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、卡莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、二硫氮芥、加莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、司莫司汀、雷莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、薩莫司汀、?；悄就　⑺就』蚵菽就∨c1-35％的順鉑、卡鉑、庚鉑、得那鉑、恩洛鉑、環硫鉑、順螺鉑、右奧馬鉑、異丙鉑、洛鉑、米鉑、奈達鉑、奧馬鉑、奧沙利鉑、司鉑、螺鉑或折尼鉑的組合；或(b)1-35％的阿雌莫司汀、鏈佐星、阿莫司汀、氨莫司汀、尼莫司汀、苯達莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、卡莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、二硫氮芥、加莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、司莫司汀、雷莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、薩莫司汀、?；悄就?、他莫司汀或螺莫司汀與1-35％的紫杉醇、多西他賽、2’-羥基紫杉酚、10-去乙酰漿果赤霉素III、14β-羥基-10-去乙酰漿果赤霉素III、9-dihydro-13-漿果赤霉素III、IDN5109、10-去乙酰紫杉酚、7-表-紫杉酚、漿果赤霉素、漿果赤霉素III或漿果赤霉素V；或(c)1-35％的阿雌莫司汀、鏈佐星、阿莫司汀、氨莫司汀、尼莫司汀、苯達莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、卡莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、二硫氮芥、加莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、司莫司汀、雷莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、薩莫司汀、牛磺莫司汀、他莫司汀或螺莫司汀與1-35％的異長春堿、長春吲哚、長春氮芥、氧橋長春堿、長春新堿、足葉草肼、(硫酸)長春新堿、長春花堿、酒石酸脫水長春堿、酒石酸環氧長春堿、環氧長春堿、酒石酸長春質堿、海南粗榧新堿、海南粗榧內酯、長春西汀、長春瑞濱、重酒石酸、長春瑞濱、長春瑞賓雙酒石酸鹽、酒石酸長春瑞賓、長春倍酯、長春羅新、長春西醇、長春甘酯、硫酸長春苷酯、長春素、長春磷汀、長春米特、長春氟寧、長春匹定、長春地辛、長春利定、長春曲醇、長春羅定、氧化苦參堿、三尖杉堿、脫氧三尖杉酯堿、高三尖杉酯堿、珠囊殼素、野百合堿、美坦新、依利醋銨、駱駝蓬總堿、心菊內酯、梅登素、冬凌草甲素、漳州水仙堿、鹽酸前水仙堿、甲基芐肼、鹽酸甲基芐肼、唐松草堿、唐松草新堿、異娃兒藤堿、娃兒藤新堿或白芙堿的組合。
以上均為重量百分比。
實施例三將80mg乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mg尼莫司汀和10毫克異長春花堿，重新搖勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到抗癌體內植入劑含10％尼莫司汀和10％異長春花堿。均為重量百分比。
實施例四如實施例三所述，所不同的是抗癌有效成分為下列之一(a)5-25％的卡莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；(b)5-25％的尼莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；(c)5-25％的薩莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；或(d)5-25％的薩莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合。
以上均為重量百分比。
實施例五將80mg分子量為15000的聚乳酸(PLGA)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mg卡莫司汀和10毫克多西他賽，重新搖勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到抗癌體內植入劑含10％卡莫司汀和10％多西他賽。均為重量百分比。
實施例六如實施例五所述，所不同的是抗癌有效成分為下列之一(a)5-25％的卡莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；(b)5-25％的尼莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；
(c)5-25％的薩莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；或(d)5-25％的薩莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合.
以上均為重量百分比。
實施例七將70mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷葵二酸為2080)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入15mg卡莫司汀和15毫克紫杉醇，重新搖勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即壓片成形，分裝后射線滅菌，得到抗癌體內植入劑含15％卡莫司汀和15％紫杉醇。均為重量百分比。
實施例八如實施例七所述，所不同的是抗癌有效成分為下列之一(a)5-25％的卡莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；(b)5-25％的尼莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；(c)5-25％的薩莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；或(d)5-25％的薩莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合.
以上均為重量百分比。
實施例九將80mg分子量為30000的聚乳酸(PLGA)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mg尼莫司汀和10毫克多西他賽，重新搖勻后真空干燥去除有機溶劑。將干燥后的固體組合物立即成形，分裝后射線滅菌，得到抗癌體內植入劑含10％尼莫司汀和10％多西他賽。均為重量百分比。
實施例十如實施例九所述方法制成抗癌體內植入劑，所不同的是抗癌有效成分為下列之一(a)5-25％的卡莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；(b)5-25％的尼莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；(c)5-25％的薩莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；或(d)5-25％的薩莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合.
以上均為重量百分比。
實施例十一按實施例一到十所述方法制成抗癌體內植入劑，所不同的是所用藥用輔料分別為下列之一a)分子量為5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乳酸(PLA)；b)分子量為5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)；c)乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)；d)聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)共聚物)，對羧苯基丙烷∶葵二酸重量比為90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50或40∶60；e)透明質酸、膠原蛋白、明膠、白蛋白木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽或鈉鹽。
實施例十二按實施例五所述方法制成抗癌體內植入劑，但所不同的是抗癌有效成分為下列之一(a)10％卡莫司汀和10％順鉑；(b)10％卡莫司汀和10％卡鉑；(c)10％卡莫司汀和10％奧沙利鉑；(d)10％卡莫司汀和10％長春花堿；(e)10％卡莫司汀和10％長春新堿；(f)10％卡莫司汀和10％長春瑞濱；(g)10％卡莫司汀和10％多西他賽；或(h)10％卡莫司汀和10％紫杉醇；以上均為重量百分比。
實施例十三抗癌體內植入劑體外釋放特性比較將實施例十二中的抗癌體內植入劑放在室溫生理鹽水中浸泡，測不同時間藥物(卡莫司汀)的釋放量，并計算累計釋放百分數(％)。見表7所示。
表7
實施例十四抗癌體內植入劑體內釋放特性比較將實施例十二中的抗癌體內植入劑放于小白鼠皮下，定時取出測定藥物含量，根據剩余藥物量，并計算累計釋放百分數(％)。見表8所示。
表8
由表7可以看出，所試不同藥物體外釋放無明顯差異，第一天釋放20％左右，第14天釋放85-90。
由8上表可以看出，所試不同藥物體內釋放也無明顯差異，第一天釋放10％左右，第28天釋放95％以上。但體內外釋放卻有明顯差異，體外釋放較體內釋放為快。在體內可維持一個月，體外15天左右。
如上所述，抗癌體內植入劑可用現有的方法制成各種劑型。以上實施例僅用于說明，而并非局限本發明的應用。
權利要求
1.一種抗癌體內植入劑，包括抗癌有效量的抗癌有效成分和藥用輔料，其特征在于抗癌有效成分為亞硝脲類抗癌藥物和亞硝脲類抗癌藥物增效劑，所述亞硝脲類抗癌藥物增效劑為鉑類化合物、紫杉醇類抗癌藥物或植物生物堿之一或組合。
2.根據權利要求1所述之抗癌體內植入劑，其特征在于所述亞硝脲類抗癌藥物選自阿雌莫司汀、鏈佐星、阿莫司汀、氨莫司汀、尼莫司汀、苯達莫司汀、二硫莫司汀、波呋莫司汀、卡莫司汀、依莫司汀、依考莫司汀、二硫氮芥、加莫司汀、福莫司汀、雌莫司汀、合莫司汀、奈莫司汀、甘露莫司汀、洛莫司汀、甲基洛莫司汀、司莫司汀、雷莫司汀、潑尼莫司汀、烏拉莫司汀、薩莫司汀、?；悄就　⑺就』蚵菽就〉囊环N或多種，其在抗癌體內植入劑中的含量為1-50％。
3.根據權利要求1所述之抗癌體內植入劑，其特征在于所述的鉑類化合物選自順鉑、卡鉑、庚鉑、得那鉑、恩洛鉑、環硫鉑、順螺鉑、右奧馬鉑、異丙鉑、洛鉑、米鉑、奈達鉑、奧馬鉑、奧沙利鉑、司鉑、螺鉑或折尼鉑之一或組合，鉑類化合物在抗癌體內植入劑中的重量百分比含量為1-35％。
4.根據權利要求1所述之抗癌體內植入劑，其特征在于所述的紫杉醇類抗癌藥物選自紫杉醇、多西他賽、2’-羥基紫杉酚、10-去乙酰漿果赤霉素III、14β-羥基-10-去乙酰漿果赤霉素III、9-dihydro-13-漿果赤霉素III、IDN5109、10-去乙酰紫杉酚、7-表-紫杉酚、漿果赤霉素、漿果赤霉素III或漿果赤霉素V之一或組合，以上紫杉醇類抗癌藥物在抗癌體內植入劑中的重量百分比含量為1-35％。
5.根據權利要求1所述之抗癌體內植入劑，其特征在于所述的植物生物堿選自長春堿、異長春堿、長春吲哚、長春氮芥、氧橋長春堿、長春新堿、足葉草肼、(硫酸)長春新堿、長春花堿、酒石酸脫水長春堿、酒石酸環氧長春堿、環氧長春堿、酒石酸長春質堿、海南粗榧新堿、海南粗榧內酯、長春西汀、長春瑞濱、重酒石酸、長春瑞濱、長春瑞賓雙酒石酸鹽、酒石酸長春瑞賓、長春倍酯、長春羅新、長春西醇、長春甘酯、硫酸長春苷酯、長春素、長春磷汀、長春米特、長春氟寧、長春匹定、長春地辛、長春利定、長春曲醇、長春羅定、氧化苦參堿、三尖杉堿、脫氧三尖杉酯堿、高三尖杉酯堿、珠囊殼素、野百合堿、美坦新、依利醋銨、駱駝蓬總堿、心菊內酯、梅登素、冬凌草甲素、漳州水仙堿、鹽酸前水仙堿、甲基芐肼、鹽酸甲基芐肼、唐松草堿、唐松草新堿、異娃兒藤堿、娃兒藤新堿或白芙堿之一或組合，以上植物生物堿在抗癌體內植入劑中的重量百分比含量為1-35％。
6.根據權利要求1所述之抗癌體內植入劑，其特征在于抗癌有效成分為下列之一(a)5-25％的卡莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；或(b)5-25％的尼莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；或(c)5-25％的薩莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；或(d)5-25％的薩莫司汀與5-15％的順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、長春花堿、長春新堿、長春瑞濱、多西他賽或紫杉醇的組合；以上均為重量百分比。
7.根據權利要求1所述之抗癌體內植入劑，其特征在于，藥用輔料選自生物可容性可降解吸收的高分子多聚物及其混合物或共聚物。
8.根據權利要求1所述之抗癌體內植入劑，其特征在于，所用藥用輔料分別為下列之一a)分子量為5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乳酸；b)分子量為5000-15000、10000-20000、25000-35000或30000-50000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；c)乙烯乙酸乙烯酯共聚物；d)對羧苯基丙烷與葵二酸的共聚物，對羧苯基丙烷∶葵二酸為90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50或40∶60；e)透明質酸、膠原蛋白、明膠、白蛋白木糖醇、低聚糖、甲殼素、鉀鹽或鈉鹽。
9.權利要求1所述之抗癌體內植入劑用于制備治療起源于人及動物大腦、中樞神經系統、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、粘膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宮、卵巢、子宮內膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結腸或直腸的原發或繼發的癌、肉瘤或癌肉瘤的藥物。
全文摘要
一種抗癌體內植入劑，屬于抗癌藥技術領域。包括藥用輔料以及包于其中的抗癌有效成分組成?？拱┯行С煞譃閬喯蹼孱惪拱┧幬锖涂拱┧幬镌鲂??？拱┧幬镌鲂┻x自鉑類化合物、紫杉醇類抗癌藥物和植物生物堿之一或組合。以上組合可更有效地抑制腫瘤細胞內的DNA修復功能，并能降低腫瘤細胞對抗癌藥物的耐受性，而藥用輔料主要為生物可容性可降解吸收的高分子多聚物，在其降解吸收的過程中能將抗癌藥物緩慢釋放于腫瘤局部，因此在明顯降低其全身毒性反應的同時還可于腫瘤局部維持有效藥物濃度。腫瘤局部放置該抗癌體內植入劑不僅能夠降低抗癌藥物的全身毒性反應，同時還能選擇性地提高腫瘤局部的藥物濃度，增強化療藥物及放射治療等非手術療法的治療效果。
文檔編號A61P35/00GK1679949SQ20051004243
公開日2005年10月12日 申請日期2005年2月3日 優先權日2005年2月3日
發明者孔慶忠, 孫娟, 于建江, 孫憲德 申請人:山東藍金生物工程有限公司, 孔慶忠