專利名稱：用選擇性cox－2抑制劑治療尿失禁的制作方法
技術領域：
本發明涉及用環加氧酶-2同工酶(COX-2)的選擇性抑制劑治療哺乳動物，包括人的下泌尿道神經肌肉功能不良的組合物和方法。
背景技術：
在哺乳動物中，排尿是一個復雜的過程，它需要膀胱、膀胱內括約肌和外括約肌以及骨盆壁肌肉系統的綜合作用。對這些肌肉的神經學控制發生在三個水平膀胱壁或括約肌中，脊髓的自主神經節中，以及處于大腦皮層控制之下的腦干的腦橋排尿中樞的中樞神經系統中。
膀胱逼尿肌收縮導致排尿，所述逼尿肌由處于骶脊髓的副交感神經自主控制之下的交錯的平滑肌纖維構成。感覺神經對疼痛、溫度以及從膀胱傳到骶索的膨脹形成了簡單的排尿反射。然而，傳自膀胱的感覺來還到達腦橋排尿中樞，這導致了神經沖動的產生，它通常作用于脊髓以壓迫控制膀胱排空的骶脊髓反射弧。其結果是，通過隨意壓抑皮質的反射弧抑制并松弛盆骨壁和外括約肌的肌肉，就開始了正常的排尿。這些事件后面是逼尿肌收縮和排尿。
下泌尿道功能異常，例如排尿困難，失禁和遺尿在普通人群中是常見的。排尿困難包括尿頻、夜尿癥和尿急，并且是由膀胱炎、前列腺炎或影響約70％老年男性的良性前列腺肥大或神經紊亂引起的。失禁綜合癥包括應力性尿失禁、緊迫性尿失禁和溢流性尿失禁。遺尿是指在夜晚或者在睡覺期間不由自主地排尿。
在本發明以前，下泌尿道神經肌肉紊亂的治療包括直接服用作用于膀胱肌的化合物，如黃酮哌酯，一種也作用于腦橋排尿中樞的解痙藥或抗膽堿能的化合物如羥丁寧。使用用于治療良性前列腺肥大的α1-腎上腺素能受體拮抗藥也是常見的。但是，包括直接抑制骨盆肌肉系統或逼尿肌的治療有不良的副作用，如不完全排尿、調節反射麻痹、心動過速和干口。因此，宜使用通過作用外周或中樞神經系統來影響例如，骶脊髓反射弧和/或腦橋排尿中樞的抑制性沖動的化合物，以恢復正常排尿機理功能的方式治療下泌尿道的神經肌肉紊亂。
可用的證據表明通過環加氧酶(COX)途徑產生的花生四烯酸代謝物與所述排尿反射的生理調節有關。在體外，已經顯示前列腺素E1(PGE1)，PGE2，PGD2，PGF2α以及血栓素(thromboxane)A2(TXA2)會引發哺乳動物和人膀胱逼尿肌的收縮活動(Andersson等，Acta Physiol.Sc and.100165-171，1977；Borda等，J.Urol.1291250-1253，1983；Maggi等，J.Pharmacol.Exp.Ther.230500-513，1984；Gotoh等，J.Urol.135431-437，1986；和Palea等，Br.J.Pharmacol.124865-872，1998)。PGE2和PGF2α在調節通過電刺激產生的膽堿能和嘌呤能收縮也起作用，如在分離的兔子泌尿膀胱中所證實的(Downie等，J.Pharmacol.Exp.Ther.230445-449，1984和Husted等，Arch.Intl.Pharmacodyn.24684-97，1980)。而且，膀胱壁的膨脹會導致局部產生內源性前列腺素類化合物，它通過降低用于引起排尿收縮的閾值來調節排尿反射的傳入分支(Ghoneim等，J.Urol.116739-743，1976)，因此，表示由于膀胱充滿而拉伸逼尿肌和辣椒素敏感傳入激活之間的聯系。
因此，吲哚美辛和氟比洛芬，著名的環加氧酶抑制劑，顯示在逼尿肌不穩定的患者的雙盲受控研究中有有利的作用，雖然它們不能完全消除逼尿肌的過度活動，并顯示對胃腸道副作用有高的影響(Andersson，Drugs35477-494，1988)。
前列腺素由游離花生四烯酸通過兩種COX酶的催化活性產生。如在幾乎所有組織中所表現的，COX-1被認為是組成的同種型，而COX-2則被認為是可誘導的，因為其表達通常可以通過發炎來觸發。但是，若干研究小組已經報道了COX-2在不同組織中的組成型表達，所述組織包括中樞神經系統(Yasojima等，Brain Res.830226-236，1999)。
在腦干中，觀察到中縫背核(dorsal raphe nucleus)、下丘臂核以及藍斑下區中含COX-2的神經元，提示在內臟感覺輸入的處理和整合中，以及在自主應答的調節中涉及COX-2(Breder等，J.Comp.Neurol.355296-315，1995)。而且，已經證實(Yamamoto等，Brain Res.739104-110，1996)COX-2在脊髓中組成性地表達，此處，它在脊髓傷害感受信號傳遞中起重要的作用。
以前的嘗試并未使得COX-2特異性拮抗劑在治療下泌尿道的非炎癥神經肌肉功能不良中發揮作用。Lecci等(Br.J.Pharm.130331-338，2000)在基于發炎和基于非發炎的大鼠模型中比較了非選擇性COX-1/COX-2抑制劑、右酮洛芬和COX-2選擇性抑制劑、NS-398對尿動力學功能的效果。使用右酮洛芬而不是NS-398來阻斷將花生四烯酸施加到泌尿膀胱的漿膜表面來引發膀胱收縮。而且，雖然在下泌尿道的外科或用實驗方法誘導發炎之后，右酮洛芬和NS-398均可以使膀胱反射，但是通過COX-2特異性抑制劑并沒有提高效果。
因此，Lecci等并沒有顯示NS-398在膀胱功能的基于非發炎模型中的效果。Lecci等也沒能證實COX-2抑制劑在尿動力學功能的基于發炎的模型中的選擇性效果。Lecci等也沒能證實選擇性COX-2抑制劑比非選擇性COX-1/COX-2抑制劑在抑制排尿反射的中心部分更加有效。假設這些結果成立，Lecci等推測在未發炎的條件下，只有COX-1和COX-2的阻塞會導致尿動力學改變。
PCT申請WO98/09948測量了COX-2特異性抑制劑尼美舒利對用40mM鉀刺激的分離大鼠膀胱帶的收縮性的體外效果。尼美舒利對抑制收縮性沒有效果，在其中，高濃度(1×10-4M)的尼美舒利僅獲得42％抑制效果。這種高濃度的要求表明所觀察的效果并不是由于排尿的神經元控制，而是由于尼美舒利對膀胱圓頂組織的局部效果產生的。
因此，在本領域中仍需要有效治療下泌尿道神經肌肉功能不良的有效COX-2特異性抑制劑。特別是，仍需要通過作用于排尿反射有效治療神經肌肉功能不良的COX-2特異抑制劑。
我們已經測試了選擇性和非選擇性(例如，吲哚美辛)COX-2抑制劑對大鼠下泌尿道的活性。使用反映支持膀胱控制的中心機理的動物模型來測試特異性和非特異性COX-2抑制劑對膀胱功能的效果，出人意料的是，我們已經發現所述選擇性COX-2抑制劑證實對抑制膀胱收縮的頻率很有效。
假設這些結果成立，選擇性COX-2抑制劑是治療尿道障礙的有效途徑。
發明概述本發明基于以下發現，即選擇性COX-2抑制劑在治療哺乳動物的下泌尿道神經肌肉功能不良中是有效的。因此，本發明提供了使用某些選擇性COX-2抑制劑用于制備治療哺乳動物的下泌尿道神經肌肉功能不良的藥物，所述功能不良包括但不限于排尿困難、失禁和遺尿。用于本發明的選擇性COX-2抑制劑優選以下具有結構式I-VI的那些化合物。所有的所述化合物的水合物、溶劑合物、多形體和藥學上可接受的鹽可替代所述化合物本身。所述化合物中有一些含有一個或多個不對稱中心，因而產生了非對映異構體和光學異構體。所述化合物可以非對映異構體及其外消旋和分解的，對映異構體純的形式用于本發明。同時，這里所述的一些化合物含有烯雙鍵。所述化合物可以這種化合物的E和Z幾何異構體的形式用于本發明化合物I具有通式
其中R1代表氫原子或甲基或乙基；R2代表甲基、乙基或正丙基；和Y代表氫，氟或氯原子或甲基或甲氧基。
在優選的實施方案中，R1和R2都代表甲基，且Y代表氫原子。這就是化合物1，1-二氧-4-羥基-2-甲基-N-(5-甲基-2-噻唑基)-2H-1，2-苯并噻嗪-3-羧酰胺(化合物A)。
化合物II具有通式 其中R3代表NHS(O)2CH3，S(O)2CH3，S(O)2NH2，S(O)(NH)NH2或S(O)2NHC(O)(CH2)1-3CH3；R4代表鹵原子或鹵代烷基、氰基、硝基、氨羰基、N-烷基氨羰基、N，N-二烷基氨羰基、環烷基氨羰基、鹵代基烷基、氨羰基鹵代烷基、烷基磺酰基或N-烷基氨基磺酰基；R5代表氫或鹵原子或烷基、硫代，烷基硫代，鹵代烷基、氰基、羥基烷基、烷基磺酰基或環烷基；和R6代表芳基、環烷基、環鏈烯基或雜環基，且被-個或多個選自鹵原子和烷基硫代，烷基、鏈烯基、烷基磺酰基，氰基、氨羰基、鹵代烷基、羥基、烷氧基、羥基烷基、鹵代烷氧基、氨磺酰，氨基、雜環基、環烷基烷基和硝基的自由基任選取代，或者R5和R6以及它們連接的吡唑環原子-起形成6-或7-元環，其中，最接近吡唑環4位的環原子是硫原子，該6-或7-元環可任選地與苯環融合，苯環自身可任選地被一個或多個鹵原子和/或C1-4烷基取代。
優選的基團中，R3代表S(O)2NH2。優選的鹵代烷基中，R4代表三氟甲基。優選的芳基中，R6代表苯基，任選地被選自鹵原子和C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C1-4鹵代烷基、羥基，C1-4烷氧基、羥基烷基、鹵代烷氧基和氨基的自由基取代。所有上述這些都獨立出優選用于所有組合中。
同時優選的是，R3是S(O)2NH2，R4是三氟甲基，R5是氫和R6代表被甲基、乙基、甲氧基或乙氧基取代的苯基。
當R5和R6如上述同時存在時，它們優選形成具有如下結構的基團， 其中R7代表C1-4低級烷氧基，R8代表鹵原子。更優選的是，R7是甲氧基、R8是氟。
結構式II的化合物的合成描述在WO 95/15316和WO 96/09304中。其它與結構式II的化合物的合成有關的化學可在Reid等(J.Amer.Chem.Soc.722948-2952，1950)中找到。
化合物III具有通式 其中當b側是雙鍵且a與c側是單鍵時，X-Y-Z代表以下基團之一-CH2CH2CH2-，-C(O)CH2CH2-，-CH2CH2C(O)-，-CR11(R’11)-O-C(O)-，-C(O)-O-CR11(R’11)-，-CR11(R’11)-NR12-C(O)-，-N＝CR13-O-，-O-CR13＝N-和-C(O)-NR12-CR11(R’11)-；或者，當a和c側是雙鍵且b側是單鍵時，X-Y-Z代表以下基團之一＝CH-O-CH＝，＝CH-CR11(R’11)-CH＝，
＝CH-NR12-CH＝，＝N-O-CR11＝，＝CH-O-N＝和＝N-O-N＝；R9代表NHS(O)2CH3，S(O)2CH3，S(O)2NH2，S(O)(NH)NH2或S(O)2NHC(O)(CH2)1-3CH3；R10代表C1-6烷基或C3-7環烷基或未取代的或單-、二-或三-取代的苯基或萘基、苯基或萘基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基；R11和R’11分別代表氫原子或C1-6烷基；R12代表氫原子或三氟甲基、C1-6烷基、羥基或C1-6烷氧基；和R13代表氫原子或三氟甲基或C1-6烷基。
以下分別是優選的優選的基團中，R9代表S(O)2CH3，S(O)2NH2或S(O)2NHC(O)(CH2)1-3CH3。
優選的基團中，R10代表單-、二-或三-取代的苯基。更加優選的是，R10是單-、二-或三氟苯基。
優選的基團中，R11和R’11可以分別代表氫或甲基。
優選的基團中，R12代表氫、三氟甲基、甲基、乙基、羥基、甲氧基或乙氧基。
優選的烷基中，R13代表甲基或乙基。
結構式III的化合物的實施例中，優選的一小類化合物具有是具有結構式IV(i)的化合物 或其藥學上可接受的鹽其中R14代表結構式S(O)2CH3或S(O)2NH2；R15代表C1-6烷基、C3-7環烷基或未取代的，單-或二-取代的苯基，其中各個取代基選自鹵原子，C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基和三氟甲基；和R16和R’16分別代表氫原子或C1-6烷基。
優選的烷基中，R15可代表甲基或乙基。優選的苯基中，R15可代表苯基，被1或2個選自鹵原子、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基和三氟甲基的取代基任選取代。更加優選的，R15可代表苯基，被1或2個鹵原子任選取代。更加優選地，R15可代表苯基，被1或2個氟原子任選取代。
優選的烷基中，R16和R’16分別代表甲基或乙基。更加優選的是，R16和R’16分別為氫原子。
結構式III的化合物的實施例中，優選的另一小類化合物是具有結構式IV(ii)的化合物 或其藥學上可接受的鹽其中R17代表NHS(O)2CH3，S(O)2CH3，S(O)2NH2，S(O)(NH)NH2或S(O)2NHC(O)(CH2)1-3CH3，R18代表C1-6烷基、C3-7環烷基或未取代的，單-或二-取代的苯基，其中各個取代基選自鹵原子，C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基和三氟甲基；和R19代表氫原子或C1-6烷基。
優選的基團中，R17代表S(O)2NH2或S(O)2NHC(O)CH2CH3。
優選的烷基中，R18可代表甲基或乙基。優選的苯基中，R18可代表苯基，被1或2個選自鹵原子，甲基、乙基、甲氧基、乙氧基和三氟甲基的取代基任選取代。更加優選的，R18可代表苯基，被1或2個鹵原子任選取代。更加優選地，R18可代表苯基、被1或2個氟原子任選取代。更加優選地，R18代表未取代的苯基。
優選的烷基中，R19代表甲基或乙基。更加優選地，R19是甲基。
一個優選的實施方案中，同時R17是S(O)2NH2，R18是未取代的苯基和R19是甲基。
另一個優選的實施方案中，同時R17是S(O)2NHC(O)CH2CH3，R18是未取代的苯基和R19是甲基。
結構式III、IV(i)和IV(ii)的化合物的合成分別描述在美國專利5,474,995和5,633,272和國際出版物WO 97/38986中。其它用于合成結構式III，IV(i)和IV(ii)的化合物的一般方法可在Weissenfels(Z.Chem.6471，1966)；Weissenfels(Z.Chem.1357，1973)；Kharash(J.Amer.Chem.Soc.733240，1951)；Weinreb(Tet.Lett.4171，1977)；Girard(J.Org.Chem.483220，1983)；Lau(J.Org.Chem.513038，1986)；Brederick等(Chem.Ber.p.88，1953)；Friedman等(J.Org.Chem.30854，1965)；Dimroth等(Ber.562602，1956)；Dimroth等(Ann.634102，1961)；Schulze等(Helv.Chimica Acta 741059，1991)；Mohammad Aslam等(J.Org.Chem.565955-5958，1991)；Aliev等(Sulfur Lett.12123-132，1991)；Rutsch等(Org.Coat.8175-195，1986)；Huang等(Tetrahedron Letts.357204，1994)和美國專利4,321,118。
化合物V具有通式 其中R20代表NHS(O)2CH3、S(O)2CH3、S(O)2NH2、S(O)(NH)NH2或S(O)2NHC(O)(CH2)1-3CH3，Q代表以下結構式Q(i)-Q(v)之一 其中R21代表C1-6烷基或C3-7環烷基或未取代的或單-、二-或三-取代的苯基或萘基、苯基或萘基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基；R22和R’22分別代表氫原子或C1-6烷基；R23代表氫原子或三氟甲基、C1-6烷基、羥基、C1-6分支或不分支的烷氧基；R24代表C1-6烷基或C3-7環烷基或未取代的或單-、二-或三-取代的苯基、苯基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基；R25代表C1-6烷基或C3-7環烷基或未取代的或單-、二-或三-取代的芳基或雜芳基、芳基或雜芳基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基；R26代表氫或鹵原子或C1-6烷基或C1-6烷氧基；R27代表C1-6烷基或C3-7環烷基或未取代的或單-、二-或三-取代的苯基、苯基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基；和R28代表未取代的或單-、二-或三-取代的雜芳基。
以下分別是優選的優選的基團中，R20可代表S(O)2CH3或S(O)2NH2。
優選的基團中，R21代表苯基，任選地被1-2個選自鹵原子、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基或三氟甲基的取代基取代。更加優選的是，R21代表苯基，任選地被1-2個鹵原子取代。更加優選地是，R21代表苯基，任選地被1-2個氟原子取代。優選的烷基中，R22和R’22分別代表甲基和乙基。在優選的實施方案中，R21代表苯基，R22和R’22都是甲基。
優選的烷基中，R23代表甲基和乙基。優選的烷氧基中，R23代表甲氧基、乙氧基、正丙氧基和2-丙氧基。優選的苯基中，R24代表未取代的，單-、二-或三-取代的苯基，其中各個取代基選自鹵原子，C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基和三氟甲基。更加優選的是，R24代表未取代的，單-或二-取代的苯基，其中取代基是鹵原子。在一個優選的方面，R23是2-丙氧基，R24是苯基。
優選的基團中，R25代表雜芳基，任選地被鹵素、C1-4烷基或C1-4烷氧基單-或二-取代。更加優選的雜芳基中，R25代表吡啶基，任選地被C1-4烷基取代。更加優選的是R25代表2-甲基-5-吡啶基。
優選的基團中，R26代表鹵素。更加優選的是，R26是氯。
優選的基團中，R27代表苯基，被1-3個選自鹵原子，C1-6烷氧基和C1-6烷基的取代基任選取代。更加優選的是，R27代表苯基。
優選的雜芳基中，R28代表3-吡啶基和4-噻唑基，被C1-4烷基任選取代。更加優選的是，R28選自3-(2-甲基吡啶基)和4-(2-甲基噻唑基)。
優選的化合物V包括3-(4-甲磺酰苯基)-2-(2-甲基-5-吡啶基)-5-氯代-吡啶，1-(4-甲磺酰苯基)-2-(3-吡啶基)-4-三氟甲基-咪唑，1-(4-氨磺酰苯基)-2-(2-甲基-3-吡啶基)-4-三氟甲基-咪唑，和1-(4-氨磺酰苯基)-2-(2-甲基-4-噻唑基)-4-三氟甲基-咪唑。
這些化合物的合成描述在WO 97/36863，WO 99/10331，Friessen等(Bioorgan.and Medic.Chem.Letts.82777-2782，1998)，美國專利5,552,422和Khanna等(J.Med.Chem.433168-3185，2000)。
化合物VI具有通式 其中R29代表NHS(O)2CH3，S(O)2CH3，S(O)2NH2，S(O)(NH)NH2或S(O)2NHC(O)(CH2)1-3CH3，和R30代表C1-6烷基或C3-7環烷基或未取代的或單-、二-或三-取代的苯基或苯基硫代基，苯基或苯基硫代基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基。
以下分別是優選的優選的基團中，R29代表NHS(O)2CH3，S(O)2CH3或S(O)2NH2.優選的基團中，R30代表單-、二-或三-取代的苯基或苯基硫代基，其中各個取代基選自鹵原子，C1-6烷氧基和C1-6烷基。更加優選的是，R30代表苯基硫代基，其中苯基部分被1-3個鹵原子任選取代。同樣優選的是，R30代表二氟苯基硫代基。在優選的實施方案中，R29代表NHS(O)2CH3，R30代表2，4-二氟苯基硫代基。
結構式VI的化合物的合成描述在國際出版物WO 94/13635中。其它有關化學描述在美國專利4,375,479中。
另一方面，本發明提供了一種化合物在制備用于治療下泌尿道神經肌肉功能不良的藥物中的應用，該化合物可顯著地抑制COX-2同工酶，且對COX-2同工酶的抑制效力至少高于該化合物對COX-1同工酶的抑制潛能10倍，優選至少100倍。
確定是否可到達這些標準的系統描述如下。
優選地，在實施例1和2所給的模型中，用于本發明的化合物應可以約0.1-100nM的IC50抑制COX-2同工酶。
選擇性COX-2抑制劑、其立體異構體、藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑合物的施用可通過有效途徑實現，這些途徑包括口服、腸、靜脈內、肌肉內、皮下、經粘膜或吸入途徑。優選的給藥方式是口服或經皮途徑。
還提供了含有與藥學上可接受的載體和/或賦形劑聯合的上述化合物的藥物制劑。
在另一方面，本發明提供了鑒定用于治療下泌尿道神經肌肉功能不良的化合物的方法。所述方法是通過以下步驟進行的(a)單獨測量測試化合物對COX-2和COX-1同工酶的抑制效果；和(b)鑒定那些具有以下功能的測試化合物(1)以濃度等于或低于10-7M的IC50抑制COX-2同工酶，和(2)以高于該化合物抑制COX-2同工酶的IC50至少約10倍的IC50抑制COX-1同工酶。
優選地，在上述步驟(b)中鑒定的化合物活性是通過在麻醉大鼠中評定對體積誘導的節律性膀胱排尿收縮的抑制確定的(見實施例3)。
發明詳述在此全文引入了所有專利和其它出版物以供參考。如果定義出現矛盾，本描述將做出處理。
本發明提供了用于治療下泌尿道神經肌肉功能不良的方法和組合物，特別涉及排尿障礙，如排尿困難、尿失禁和遺尿。所述方法包括向受侵襲的個體施用足夠時間且可有效減輕或改善至少一種排尿障礙癥狀的選擇性COX-2抑制劑。這些癥狀包括但不限于尿脹(filling symptoms)、尿急、失禁和夜尿，以及排尿問題，如弱流(weak stream)、排尿躊躇(hesitance)、尿間斷(intermittency)、膀胱排空不完全和腹部過度用力。
術語“治療”被定義為預防、減輕或改善至少一種上述下泌尿道神經肌肉功能不良癥狀。
治療的功效可通過此領域已知的任何方法確定。此類方法包括但不限于測定患有下泌尿道神經肌肉功能不良的個體的排尿體積、排尿頻率和膀胱收縮的頻率和強度；或會見這些個體以確定任何這些癥狀是否有改善。其它測定功效的方法包括可測量的癥狀減輕，更加優選臨床相關的癥狀減輕，這些癥狀有與尿急感覺有關的尿滲漏(urine leakage)、與身體活動、咳嗽或打噴嚏有關的尿滲漏、少量的尿(尿滴)滲漏、膀胱排空困難、與尿急或活動無關的一般滲漏、夜尿、遺尿、膀胱排空不完全的感覺等。
使用患者調查問卷并測定癥狀嚴重性的等級被廣泛采用，可補充客觀的臨床測量，且是有廉價和可能自我施用的優點。已制定了女性和男性的下泌尿道調查問卷，以可重現且有效的方式提供了測量癥狀嚴重性和生活質量的方法，深入的評價特定的下泌尿道癥狀。對調查問卷中這些問題收集的評分的總和與受試者的泌尿問題的程度級別高度相關，且對治療引起的變化非常敏感(Barry等，J.Urol.，1481549-1557，1992；Jackson等，Brit.J.Urol.，77805-812，1996)。
適合用于本發明的選擇性COX-2抑制劑包括但不限于那些具有一種或多種以下特性的化合物(1)顯著的COX-2抑制作用有用的化合物的抑制濃度(IC50)優選在100和0.1nM之間。不限于本發明的揭示，如下面更加詳細的敘述，可在體內或體外，包括細胞提取物或提取物的組分，測定化合物的IC50以確定效價。作為非限制性例子，還可用天然或重組的COX-2酶進行測定，這是一種以組成型方式表達或以誘導方式表達的酶以及在天然或非天然物種和/或細胞類型中表達的酶。
(2)選擇性與COX-1同工酶相比，優選的化合物抑制COX-2同工酶的效價至少大10倍左右。更加優選的是抑制COX-2同工酶的效價至少大于COX-1同工酶約100倍的化合物。
因此，屬于這種類型的化合物是適合按以下方法進行測試的候選物。
因此，選擇性抑制COX-2同工酶的化合物是進行篩選以鑒定用于治療下泌尿道神經肌肉功能不良的化合物的候選物，它們以下列物質為例，但不限于此化合物A 化合物B 化合物C 化合物D 化合物E 這些化合物可按下述方法合成美國專利4,233,299用于合成A和相關化合物；國際出版物WO 95/15316用于合成B和相關化合物；
美國專利5,474,995用于合成C和相關化合物；美國專利5,633,272用于合成D和相關化合物；和國際出版物WO 97/38986用于合成E和相關化合物。
篩選候選化合物以鑒定那些在本發明中有用的化合物的方法包括1)評價它們抑制COX-2和COX-1同工酶的效價和選擇性；和2)用一種或多種下泌尿道神經肌肉功能不良的動物模型系統確定其藥理學活性。
為比較各種化合物對COX-1和COX-2的抑制作用，發展了許多測定方法。這些測定的結果被用來計算對COX-2選擇性的測量，然后通過劃分其COX-2選擇性等級對化合物進行相互比較。
通常采用的評定對COX-1和COX-2抑制作用的體外測定法可分為兩種。第一種包括在非重組酶的測定中測量抑制劑的效果，所述重組酶純化或部分純化自動物細胞，或者存在于動物細胞或細胞系的提取物或提取物組分。這是首先發展的測試，實質上是歷史上的。第二種測定使用在人細胞系或人血細胞，通常為血小板和單核細胞中表達的人重組酶。這些是目前的標準測試(Pairet等，見《選擇性COX-2抑制劑的臨床意義和潛力》，Vane，J.R.和Butting，R.M.(編)，W.Harwey出版社，19-30頁，1998)。
用于這些測定的COX酶可以是動物源或人源的，它們可以是天然或重組的，且它們可作為純化的酶、微粒體制劑或全細胞測定使用。此外，可從內源釋放的花生四烯酸或外源添加的花生四烯酸測量前列腺素的合成。在使用重組COX-1和COX-2酶的測定中，用于基因復制和表達的表達系統也是可變的。不是所有的測定系統都需要COX-2誘導劑。例如，可用組成型表達的重組酶轉染細胞。然而，在其它細胞類型中，可能需要誘導COX-2的步驟。這種情況下，COX-2通常是用脂多糖(LPS)或細胞因子誘導的，如白細胞介素-1(IL-1)或腫瘤壞死因子(Pairet等，見《選擇性COX-2抑制劑的臨床意義和潛力》，Vane，J.R.和Butting，R.M.(編)，W.Harwey出版社，19-30頁，1998)。
在優選的實施方案中，對COX同工酶的抑制作用的測量是在穩定轉染的表達人COX-1或COX-2的中國倉鼠卵巢(CHO)細胞中進行的，如前所述(Riendeau等，Br.J.Pharmacol.121105，1997；Elrich等，Clin.Pharm.Ther.65336，1999)。同樣優選的是，對COX同工酶的抑制作用是在組成型和可誘導形式的人環加氧酶(hCOX)中用桿狀病毒表達系統測定的，該酶是在昆蟲細胞(草地夜蛾)中克隆并表達的。通過在昆蟲細胞(Sf9細胞)的勻漿中評定PG-合成能力確定了COX蛋白質的表達，所述細胞和上述COX-1或COX-2重組桿狀病毒一起培育3天((Gierse等，Biochem.J.305479，1995)。
可測量測試化合物對不同同工酶的抑制活性，并用此領域熟知的回歸分析或當量計算法(equivalent computational method)計算50％抑制酶活性的濃度(IC50)(Tallarida等，《藥理學計算手冊》Manual of Pharmacologic Calculations).Springer-Verlag，10-12頁，1981.)如上所述，在實施本發明中有用的化合物以低于100nM的IC50抑制COX-2同工酶，與COX-1同工酶相比，它對COX-2同工酶的效價至少高約10倍，最好高約100倍。應知道，根據同工酶的來源以及特定的測定條件，對特定化合物抑制效價的測量是可變的。
為控制這種類型的可變性，化合物A可包括在所有的測定中作為標準對照。也就是說，在各個測定中，將化合物A的IC50值與測試化合物的IC50值比較。這樣可直接比較抑制COX同工酶的絕對效價，并比較不同測定間抑制活性的比值，以評定該化合物是否在本發明的范圍內。
如果一種化合物的選擇性比值至少為10倍，即COx-2的IC50至少低于COX-1的IC5010倍，則此化合物被認為是“選擇性”COX-2抑制劑。
一旦鑒定一種化合物對COX-2同工酶具有選擇性，就可用一種或多種下泌尿道神經肌肉功能不良的動物模型確定其藥理學活性。
一種用于測量這種藥理學活性的有用的動物模型是，但不限于麻醉大鼠中體積誘導的節律性膀胱排尿收縮。在該方法中，通過外尿道在膀胱中插入充滿生理鹽水的聚乙烯管。然后結扎外尿道并與壓力記錄儀連接。然后在膀胱中充滿鹽水直至出現反射排尿收縮，以后測得排尿收縮頻率15分鐘。然后靜脈施用測試化合物并在60分鐘后評價效果。在實施例3中更加詳細描述了該方法，它最初被用來確定所述選擇性COX-2抑制劑對前述泌尿道疾病的預測作用。用不同參考標準驗證該模型(Guarneri等，Pharmacol.Res.27173-187，1993)。
治療應用本發明包括上述藥物制劑，以及用這些制劑治療下泌尿道神經肌肉功能不良，如排尿困難、失禁和遺尿的方法。排尿困難包括尿頻、夜尿、尿急和膀胱排空困難，即在排尿時排出了最佳體積的尿。失禁癥狀包括應力性尿失禁、緊迫性尿失禁和溢流性尿失禁。遺尿是指尿在夜晚或睡眠時不由自主覺地流排尿。不希望受到理論的約束，相信施用選擇性COX-2抑制劑可防止膀胱傳入神經元的有害作用和/或抑制控制排尿的腦橋排尿中心。因此，設想用本發明的化合物可治療各種下泌尿道神經肌肉功能不良。
治療泌尿疾病的化合物的“有效量”是指可使上述疾病的至少一種癥狀或參數得到可測改善的量。
用此領域中一般技術人員已知的經驗方法可以容易地確定治療所述疾病的有效量，這些方法如建立給藥劑量和頻率的模型，并將一組實驗單元或受試者與模型中的各個點進行比較。根據疾病的狀態和嚴重性以及患者的身體狀態，對患者用藥的準確量是可變的。任何癥狀或參數的可測改善可由精通此領域的醫生測得或由患者報告給醫師。應該知道，任何臨床上或統計學上顯著的尿道疾病癥狀或參數的減輕或改善都在本發明的范圍內。臨床上顯著的減輕或改善是指患者和/或醫師或其它專業人員可察覺到的。
例如，一個患者可同時患有多種排尿困難的癥狀，例如尿急和尿頻，這兩者之一或這兩者都可用本發明的方法來減輕。如果是尿失禁，任何不希望的排尿頻率或體積的降低都被認為是本發明治療方法的有益效果，因此是癥狀的改善。
本發明的藥物組合物包括作為活性成分的本發明的化合物或藥學上可接受的鹽，和還含有藥學上可接受的載體，以及任選的其它治療成分。術語“藥學上可接受的鹽”是指用藥學上可接受的無毒堿，包括無機堿和有機堿制備的鹽。衍生自無機堿的鹽包括鋁鹽、銨鹽、鈣鹽、銅鹽、鐵鹽、亞鐵鹽、鋰鹽、鎂鹽、錳鹽、亞錳鹽、鉀鹽、鈉鹽、鋅鹽等。特別優選的是銨鹽、鈣鹽、鎂鹽、鉀鹽和鈉鹽。衍生自藥學上可接受的有機無毒堿的鹽包括伯胺、仲胺和叔胺、取代的胺，包括天然產生的取代的胺、環胺和堿性離子交換樹脂，如精氨酸、甜菜堿、咖啡因、膽堿、N，N-二芐基乙烯基二胺，二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙烯基二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、氨基葡糖(glucamine)、葡糖胺(glucosamine)、組氨酸、哈巴胺(hydrabamine)、異丙胺、賴氨酸、甲基葡糖胺、嗎啉、哌嗪、哌啶、聚胺樹脂、普魯卡因、嘌呤、可可堿、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。
含有所述活性成分的藥物組合物可以是適合口服使用的形式，例如作為片劑、糖錠、錠劑、水性或油性懸液、可分散的粉末或顆粒、乳劑、硬或軟膠囊或糖漿劑或酏劑。供口服使用的組合物可用此領域已知的任何方法制備，以生產藥物組合物和這種可含有一種或多種試劑的組合物，所述試劑選自甜味劑、調味劑、著色劑和防腐劑，以提供外觀雅致且可口的藥物制劑。片劑中含有咐加在無毒的藥學上可接受的賦形劑中的活性成分，這種賦形劑是適合制造片劑的。例如，這些賦形劑可以是惰性稀釋劑，如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；成粒劑和分散劑，如玉米淀粉或褐藻酸；粘合劑，如淀粉、明膠或阿拉伯樹膠；以及潤滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。所述片劑可以是未經包衣的，或者用已知技術包衣以延遲在胃腸道中的崩解和吸收，因此提供在較長時間內持續的作用。例如，可使用延時物質，如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。還可用美國專利4,256,108、4,166,452和4,265,874中所述的技術進行包衣以形成滲透性的控釋治療片劑。
供口服使用的制劑還可以是硬明膠膠囊，其中活性成分與惰性固體稀釋劑混合，例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土，或者可以是軟明膠膠囊，其中活性成分與水或油性介質混合，如花生油、液體石蠟或橄欖油。
含水懸液含有與適合制造含水懸液的賦形劑混合的活性物質。這種賦形劑是懸浮劑、，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥基-丙基甲基纖維素、褐藻酸鈉、聚乙烯-吡咯酮、黃耆膠和阿拉伯樹膠；分散劑或潤濕劑可以是天然產生的磷脂如卵磷脂，或烯化氧和脂肪酸的縮合產物，如聚氧乙烯硬脂酸，或環氧乙烷和長鏈脂肪醇的縮合產物，如十七烷乙烯-氧十六醇(heptadecaethylene-oxycetanol)，或環氧乙烷和衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物，如聚氧乙烯山梨醇單油酸，或環氧乙烷和衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的偏酯的縮合產物，如聚乙烯山梨聚糖單油酸。所述含水懸液還可含有一種或多種防腐劑，如乙基或正丙基、對-羥基苯甲酸鹽，一種或多種著色劑，一種或多種調味劑和一種或多種甜味劑，如蔗糖、糖精或阿斯帕坦。
油性懸液可將活性成分懸浮在植物油，如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油，或懸浮在礦物油，如液體石蠟中制成。所述油性懸液可含有增稠劑，如蜂蠟、硬質石蠟或鯨臘醇。可加入甜味劑(如上所述)和調味劑以提供可口的口服試劑。可加入抗氧化劑如抗壞血酸來保存這些組合物。
可分散的粉末或顆粒適合通過加水制成含水懸液，以使活性成分與分散劑或潤濕劑、懸浮劑以及一種或多種防腐劑混合。合適的分散劑或潤濕劑以及懸浮劑已在上面舉例說明。還可有其它賦形劑，如甜味劑、調味劑和著色劑。
本發明的藥物組合物還可以是水包油的乳劑形式。油相可以是植物油如橄欖油或花生油，或礦物油如液體石蠟，或它們的混合物。合適的乳化劑可以是天然產生的磷脂，如大豆、卵磷脂和衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的酯類或偏酯，如山梨聚糖單油酸，以及所述偏酯和環氧乙烷的縮合產物，如聚氧乙烯山梨聚糖單油酸。所述乳劑還可含有甜味劑或調味劑。
糖漿劑和酏劑可用甜味劑制成，如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖。這種制劑還可含有緩和劑、防腐劑、調味劑和著色劑。所述藥物組合物可以是無菌可注射的水性或油脂性懸液的形式。可根據此領域已知的技術，用上述合適的分散劑或潤濕劑和懸浮劑配制這種懸液。所述無菌可注射的制劑也可以是在無毒的腸胃道可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射的溶液或懸液，如含1，3-丁二醇中的溶液。所述可接受的載體和溶劑包括水、林格溶液和等滲的氯化鈉溶液。此外，無菌的、固定油通常用作溶劑或懸浮介質。出于這一目的，任何溫和的固定油都可使用，包括合成的單-或二甘油酯。此外，脂肪酸，如油酸也可用于可注射的制劑。
本發明的化合物還可以直腸給藥的栓劑形式施用。這些組合物可通過將藥物與合適的非刺激的賦形劑混合制成，所述賦形劑在常溫下是固體，但在直腸溫度下是液體，因此會融在直腸中以釋放藥物。所述物質是可可脂和聚乙二醇。
對于局部施用，可使用含有本發明化合物的霜劑、軟膏劑、膠凍劑、溶劑或懸液等。(為進行這種應用，局部應用包括漱口劑和含漱液。)每天約0.01mg-140mg/kg體重，或每天每名患者約0.5mg-7g的劑量水平可有效治療上述癥狀。例如，通過施用每天每千克體重約0.01-50mg化合物，或每天每名患者約0.5mg-3.5g化合物，可有效治療上述癥狀。優選的是，所述藥劑的施用劑量是每天每千克體重約0.1-15mg化合物，更加優選的是每天每千克體重約0.2-6mg化合物。
可與載體物質結合以產生單一劑型的活性成分的量可根據被治療患者以及特定的給藥方式而變化。例如，供人口服施用的制劑含有0.5mg-5g與合適且易得量的強心物質(carder material)混合的活性劑，強心物質的量占總組合物的約5％-95％。單位劑型通常含有約1mg-500mg活性成分，例如5mg、12.5mg、25mg、50mg、100mg、200mg、300mg、400mg或500mg。
應該知道，本發明的藥物制劑不需要含有完整量的對治療所述疾病有效的藥劑，因為通過施用多劑量的此類藥物制劑可達到有效量。
應理解，針對任何特殊患者的具體劑量水平取決于各種因素，包括年齡、體重、一般健康水平、性別、飲食、服藥時間、服藥方式、排泄速度、藥物組合、進行治療的特殊疾病的嚴重性以及所服用化合物的活性。
以下提供的方法、圖表和實施例是想用于更加充分地說明本發明的優選實施方式，并在不限定其范圍的條件下證明其優點和應用性。
實施例1
測量COX-2和COX-1同工酶在CHO細胞中的抑制作用如上所述，在穩定轉染的表達人COX-1或COX-2的中國倉鼠卵巢(CHO)細胞中進行COX同工酶抑制作用的測量(Riendeau等，Br.J.Pharmacol.121105，1997；Elrich等，Clin.Pharm.Ther.65336，1999)。
在用花生四烯酸激發前，在37℃，在含15mM HEPES的Hank’s平衡鹽溶液(HBSS)，pH7.4，和3μl測試藥物或DMSO載體中預培養細胞(在200μl中0.3×106細胞)15分鐘。用花生四烯酸溶液(貯存液是在HBSS中的100μM(用于COX-2)或5μM(用于COX-1)花生四烯酸，10％乙醇)激發細胞15分鐘，產生在CHO[COX-2]測定中10μM花生四烯酸以及CHO[COX-1]測定中0.5μM花生四烯酸的最終濃度。在沒有外源花生四烯酸時，在來自CHO[COX-1]和CHO[COX-2]細胞的樣品中PGE2含量小于每106細胞80pgPGE2。存在0.5μM外源花生四烯酸時，在來自CHO[COX-1]細胞的樣品中PGE2含量增加至每106細胞300-2300pgPGE2，而在存在10μM外源花生四烯酸時，在來自CHO[COX-2]細胞的樣品中PGE2含量增加至每106細胞500-1400pgPGE2。
由于用花生四烯酸激發的細胞中PGE2含量和用含乙醇的緩沖液模仿激發的細胞中PGE2含量不同，測量不存在測試化合物條件下的環加氧酶活性。各實驗包括用于不存在抑制劑的條件下預培養細胞的一批8個陽性和陰性對照樣品(±花生四烯酸激發)。通常，在DMSO中具有3倍連續稀釋的復制物中以8種濃度測試化合物。計算由測試化合物合成PGE2的抑制作用，作為在藥物存在下活性的百分數與陽性對照樣品中的活性相比較。
實施例2測量Sf9細胞中COX-2和COX-1同工酶的抑制作用使用桿狀病毒表達系統，在昆蟲細胞(草地夜蛾)中克隆并表達人環加氧酶(hCOX)的組成和誘導形式。如上所述，通過評定在來自昆蟲細胞(Sf9細胞)的勻漿中PG-合成能力來確定COX蛋白質的表達，所述細胞用COX-1或COX-2重組桿狀病毒培育3天(Gierse等，Biochem.J.305479，1995)。
使表達hCOX-1或hCOX-2的細胞均漿化，并用花生四烯酸(10μM)培育。通過監測PG的產生來確定COX活性。在模擬感染的Sf9細胞中沒有檢測到COX活性。在加入花生四烯酸前，用粗制1％CHAPS勻漿(2-10μg蛋白質)預培養測試化合物(O.001-100μM)10分鐘。在培育10分鐘之后，用ELISA檢測所形成的PGE2。
如下表1所示，化合物A-C是COX-2同工酶有效和選擇性的抑制劑，但是顯示出不可檢測或者顯著降低的COX-1同工酶的抑制作用。吲哚美辛被確定為非選擇性COX抑制劑。
表1在不同細胞中通過測試的化合物轉染的COX-2和COX-1同工酶的抑制作用數據表示IC50(濃度抑制酶活性為50％)值(μM)來自所引用的文獻.
A)＝Riendeau等，Br.J.Pharmacol.121105，1997B)＝Penning等，J.Med.Chem.401347，1997C)＝Elrich等，Clin.Pharm.Ther.65336，1999。
實施例3在麻醉的大鼠中測試化合物對體積誘發的節律性膀胱排尿收縮的影響使用重225-275g的雌性Sprague Dawley大鼠(CrlCD°BR，CharlesRiverItalia)。該動物關在能自由獲得水和食物的房子中，并在22-24℃以12小時的明暗交替周期飼養至少一周，除在實驗期間之外。根據Dray方法評價節律性膀胱排尿收縮的作用(J.Pharmacol.Methods，13157，1985)，所述方法如Guarneri(Pharmacol.Res.，27173，1993)中所述有一些改動。簡言之，大鼠皮下注射1.25g/kg(5ml/kg)氨基甲酸乙酯進行麻醉，之后使用充滿生理鹽水的PE50聚乙烯管通過尿道將導管插入膀胱中。然后，在外尿道口周圍用結扎線將導尿管固定在位，并和常規壓力傳感器(Statham P23ID/P23XL)連接。在圖表記錄器(具有DC1/TI放大器的Battaglia Rangoni KV135)中連續顯示膀胱內壓力。然后，通過記錄導尿管用遞增體積的溫鹽水(37℃)充滿膀胱，直到出現反射膀胱排尿收縮(通常加入0.8-1.5ml鹽水后)。15分鐘之后，所述測試化合物通過靜脈內(i.v.)途徑注入。為了靜脈注射生物活性化合物，將充滿生理鹽水的PE 50聚乙烯管插入頸靜脈中。
通過測量在60分鐘周期內膀胱靜止的持續時間(即，沒有出現收縮的持續時間)，來評價個體動物(每劑量使用6-10大鼠)中的生物活性。為了比較所述測試化合物抑制膀胱排尿收縮的效力，通過線型回歸分析評價防止膀胱收縮10分鐘(ED10min)的有效劑量。
氨基甲酸乙酯麻醉的大鼠中膀胱的膨脹產生一系列節律性膀胱排尿收縮，其特征已描述(Guarneri等，Pharmacol.Res.，27173，1993)。化合物A-C抑制排尿收縮，在所測試的最高劑量下誘發依賴劑量的膀胱收縮的阻滯持續達34分鐘。一些選擇性COX-2抑制劑在抑制膀胱排尿收縮中的效力(表示為計算誘發10分鐘膀胱靜止即，ED10min的劑量)和嗎啡(一種主要在中樞神經系統水平起作用的藥物)的效力類似(例如，化合物B)或者稍低于嗎啡的效力(例如，化合物C)。
證實吲哚美辛的效力低于所述選擇性COX-2抑制劑。
結果列于下表中。
表2COX抑制劑在靜脈內注射后對節律性膀胱排尿收縮的影響數據表示膀胱靜止持續時間的平均值±S.E.
(以分鐘表示不存在收縮的時間)。所述ED10min值表示誘發10分鐘無膀胱收縮的劑量，通過線型回歸分析來評價。
表1和表2中列出的結果證實化合物A-C是無效的COX-1同工酶的抑制劑，但是很有效的COX-2同工酶和膀胱排尿收縮的抑制劑。因此，抑制排尿收縮的效力和抑制COX-2同工酶的效力有高度的相關性，但是和COX-1抑制的效力無相關性。
總之，發現化合物A-C是COX-2同工酶的選擇性抑制劑，表現出幾乎等于吲哚美辛(非選擇性COX抑制劑)對環加氧酶同種型的抑制效力，而且是無效的COX-1同工酶的抑制劑。還發現化合物A-C在抑制麻醉的大鼠中膀胱排尿收縮方面比吲哚美辛更加有效。麻醉的大鼠中膀胱排尿收縮的頻率與反射排尿的感覺傳入臂有關，并且和排尿中樞的完整性有關(Maggi等，Brain Res.，4151，1987；Maggi等，J.Urol.，136696，1986)。考慮到缺乏這些化合物對COX-1同工酶的影響以及在中樞神經系統中存在COX-2的組成型表達，這些化合物可能在排尿中樞的水平上防止膀胱收縮。
實施例4測試化合物對下泌尿道癥狀患者的影響在患者中，測試了化合物A，B和C在治療下泌尿道癥狀中的效果。以5，12.5，25和100mg的劑量每天口服化合物A，B和C1-2次，持續40天。每天劑量合計為5，10，12.5，25，50，100和200mg。
通過患者調查表測定化合物A，B和C的治療效果，所述調查表用于測定例如尿頻、夜尿癥、尿急、排尿困難，以及在下腹部或生殖器區域疼痛或不適。測定化合物A，B和C在改善和LUTS有關的任何癥狀方面的有效性，和按照相同攝入法服用安慰劑的對照患者比較。
實施例5測試化合物對有下泌尿道癥狀患者的影響使用實施例4所述的方案，在患者中測試化合物D和E在治療下泌尿道癥狀中的效果。
權利要求
1.通式I的COX-2選擇性化合物或其藥學上可接受的鹽在制備用于治療下泌尿道神經肌肉功能不良的藥物中的應用， 其特征在于，其中R1代表氫原子或甲基或乙基，R2代表甲基、乙基或正丙基，和Y代表氫、氟或氯原子或甲基或甲氧基。
2.如權利要求1所述的1，1-二氧-4-羥基-2-甲基-N-(5-甲基-2-噻唑基)-2H-1，2-苯并噻嗪-3-羧酰胺(化合物A)的應用。
3.通式II的COX-2選擇性化合物或其藥學上可接受的鹽在制備用于治療下泌尿道神經肌肉功能不良的藥物中的應用， 其特征在于，其中R3代表NHS(O)2CH3，S(O)2CH3，S(O)2NH2，S(O)(NH)NH2或S(O)2NHC(O)(CH2)1-3CH3；R4代表鹵原子或鹵代烷基、氰基、硝基、氨羰基、N-烷基氨羰基、N，N-二烷基氨羰基、環烷基氨羰基、鹵代基烷基、氨羰基鹵代烷基、烷基磺酰基或N-烷基氨基磺酰基；R5代表氫或鹵原子或烷基、硫代，烷基硫代，鹵代烷基、氰基、羥基烷基、烷基磺酰基或環烷基；和R6代表芳基、環烷基、環鏈烯基或雜環基，且被一個或多個選自鹵原子和烷基硫代，烷基、鏈烯基、烷基磺酰基，氰基、氨羰基、鹵代烷基、羥基、烷氧基、羥基烷基、鹵代烷氧基、氨磺酰，氨基、雜環基、環烷基烷基和硝基的自由基任選取代，或者R5和R6以及它們連接的吡唑環原子一起形成6-或7-元環，其中，最接近吡唑環4位的環原子是硫原子，該6-或7-元環可任選地與苯環融合，苯環自身可任選地被一個或多個鹵原子和/或C1-4烷基取代。
4.如權利要求3所述的化合物II的應用，其特征在于，其中，R3代表S(O)2NH2。
5.如權利要求3或4所述的化合物II的應用，其特征在于，其中，R4代表氟原子或三氟甲基。
6.如權利要求3-5中任一項所述的化合物II的應用，其特征在于，其中，R5代表氫或鹵原子。
7.如權利要求3-6中任一項所述的化合物II的應用，其特征在于，其中，R6代表苯基，被一個或多個鹵原子和/或C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C1-4鹵代烷基、羥基，C1-4烷氧基、羥基烷基、鹵代烷氧基或氨基任選取代。
8.如權利要求3-6中任一項所述的化合物II的應用，其特征在于，其中，R6代表對-甲苯基。
9.如權利要求3或4所述的化合物II的應用，其特征在于，其中，R4代表三氟甲基，R5代表氫原子，R6代表對位取代的苯基。
10.如權利要求3所述的1-(4-氨磺酰苯基)-3-三氟甲基-5-(對-甲苯基)-吡唑(化合物B)的應用。
11.如權利要求3-5中任一項所述的化合物II的應用，其特征在于，其中，R5和R6以及它們連接的吡唑環的碳原子一起形成6元含硫雜環環，該環進一步與以下結構所示的取代的苯環融合，其特征在于， 其中R7代表C1-4低級烷氧基，R8代表鹵原子。
12.如權利要求11所述的具有下式的化合物II的應用，其特征在于， 其中R7代表C1-4低級烷氧基，R8代表鹵原子。
13.如權利要求12所述的化合物的應用，其特征在于，其中，R7代表甲氧基。
14.如權利要求12或13所述的化合物的應用，其特征在于，其中，R8代表氟原子。
15.通式III的COX-2選擇性化合物或其藥學上可接受的鹽在制備用于治療下泌尿道神經肌肉功能不良的藥物中的應用，其特征在于， 其中當b側是雙鍵且a與c側是單鍵時，X-Y-Z代表以下基團之一-CH2CH2CH2-，-C(O)CH2CH2-，-CH2CH2C(O)-，-CR11(R’11)O-C(O)-，-C(O)-O-CR11(R’11)-，-CR11(R’11)-NR12-C(O)-，-N＝CR13-O-，-O-CR13＝N-和-C(O)-NR12-CR11(R’11)-；或者，當a和c側是雙鍵且b側是單鍵時，X-Y-Z代表以下基團之一＝CH-O-CH＝，＝CH-CR11(R’11)-CH＝，＝CH-NR12-CH＝，＝N-O-CR11＝，＝CH-O-N＝和＝N-O-N＝；R9代表NHS(O)2CH3，S(O)2CH3，S(O)2NH2，S(O)(NH)NH2或S(O)2NHC(O)(CH2)1-3CH3；R10代表C1-6烷基或C3-7環烷基或未取代的或單-、二-或三-取代的苯基或萘基、苯基或萘基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基；R11和R’11分別代表氫原子或C1-6烷基；R12代表氫原子或三氟甲基、C1-6烷基、羥基或C1-6烷氧基；和R13代表氫原子或三氟甲基或C1-6烷基。
16.如權利要求15所述的化合物III的應用，其特征在于，其中，R9代表S(O)2CH3，S(O)2NH2或S(O)2NHC(O)CH2CH3。
17.如權利要求15或16所述的化合物III的應用，其特征在于，其中，R10代表甲基、乙基或任選地單-或二-取代的苯基，苯基的各個取代基為鹵原子和/或甲基、乙基、甲氧基、乙氧基或三氟甲基。
18.如權利要求15或16所述的化合物III的應用，其特征在于，其中，R10代表苯基。
19.如權利要求15-18中任一項所述的化合物III的應用，其特征在于，其中，X-Y-Z代表-C(O)-O-CR11(R’11)-。
20.如權利要求19所述的化合物III的應用，其特征在于，其中，R11和R’11都代表氫原子。
21.如權利要求15-18中任一項所述的化合物III的應用，其特征在于，其中，X-Y-Z代表結構式＝N-O-CR11＝。
22.如權利要求21所述的化合物III的應用，其特征在于，其中，R11代表甲基。
23.如權利要求15所述的以下任一化合物的應用4-(4-甲磺酰苯基)-3-苯基-2，5-二氫呋喃-2-酮(化合物C)，4-(4-氨磺酰苯基)-5-甲基-3-苯基-異噁唑(化合物D)，和4-[4-(N-丙酰氨磺酰)-苯基]-5-甲基-3-苯基-異噁唑(化合物E)。
24.通式V的COX-2選擇性化合物或其藥學上可接受的鹽在制備用于治療下泌尿道神經肌肉功能不良的藥物中的應用，其特征在于， 其中R20代表NHS(O)2CH3、S(O)2CH3、S(O)2NH2、S(O)(NH)NH2或S(O)2NHC(O)(CH2)1-3CH3；和Q代表以下結構式Q(i)-Q(v)之一，其特征在于， 其中R21代表C1-6烷基或C3-7環烷基或未取代的或單-、二-或三-取代的苯基或萘基、苯基或萘基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基；R22和R’22分別代表氫原子或C1-6烷基；R23代表氫原子或三氟甲基、C1-6烷基、羥基、C1-6分支或不分支的烷氧基；R24代表C1-6烷基或C3-7環烷基或未取代的或單-、二-或三-取代的苯基、苯基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基；R25代表C1-6烷基或C3-7環烷基或未取代的或單-、二-或三-取代的芳基或雜芳基、芳基或雜芳基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基；R26代表氫或鹵原子或C1-6烷基或C1-6烷氧基；R27代表C1-6烷基或C3-7環烷基或未取代的或單-、二-或三-取代的苯基、苯基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基；和R28代表未取代的或單-、二-或三-取代的雜芳基。
25.如權利要求24所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，R20代表S(O)2CH3或S(O)2NH2。
26.如權利要求24或25所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(i)基團，其中R21代表未取代的或單-或二-取代的苯基，苯基的各個取代基為鹵原子和/或甲基、乙基、甲氧基、乙氧基或三氟甲基。
27.如權利要求24-26中任一項所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(i)基團，其中R22和R’22都代表甲基。
28.如權利要求24或25所述的化合物V的應用，其中，Q代表Q(ii)基團，其特征在于，其中R23代表甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基或2-丙氧基。
29.如權利要求24、25或28中任一項所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(ii)基團，其中R24代表未取代的或單-或二-取代的苯基，苯基的各個取代基為鹵原子和/或甲基、乙基、甲氧基、乙氧基或三氟甲基。
30.如權利要求24、25或28中任一項所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(ii)基團，其中R24代表未取代的或單-或二-取代的苯基，苯基的各個取代基為鹵原子。
31.如權利要求24或25所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(ii)基團，其中R23代表2-丙氧基，R24代表苯基。
32.如權利要求24或25所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(iii)基團，其中R25代表雜芳基，任選地被鹵素，C1-4烷基或C1-4烷氧基取代。
33.如權利要求24或25所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(iii)基團，其中R25代表未取代的或單-或二-取代的吡啶基，吡啶基的各個取代基為鹵原子和/或C1-4烷基或C1-4烷氧基。
34.如權利要求24或25所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(iii)基團，其中R25代表單-或二-取代的吡啶基，吡啶基的各個取代基為鹵原子和/或甲基、乙基、甲氧基或乙氧基。
35.如權利要求24或25所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(iii)基團，其中R25代表2-甲基-5-吡啶基。
36.如權利要求24、25或32-35中任一項所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(iii)基團，其中R26代表氯或氟原子。
37.如權利要求24或25所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(iv)基團，其中R27代表未取代的或單-、二-或三-取代的苯基，苯基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基或C1-6烷氧基。
38.如權利要求24或25所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(iv)基團，其中R27代表苯基。
39.如權利要求24或25所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(v)基團，其中R28代表3-吡啶基和4-噻唑基、任選地被C1-4烷基取代。
40.如權利要求24或25所述的化合物V的應用，其特征在于，其中，Q代表Q(v)基團，其中R28代表2-甲基-3-吡啶基或2-甲基-4-噻唑基。
41.如權利要求24所述的以下任一化合物的應用3-(4-甲磺酰苯基)-2-(2-甲基-5-吡啶基)-5-氯代-吡啶，1-(4-甲磺酰苯基)-2-(3-吡啶基)-4-三氟甲基-咪唑，1-(4-氨磺酰苯基)-2-(2-甲基-3-吡啶基)-4-三氟甲基-咪唑，和1-(4-氨磺酰苯基)-2-(2-甲基-4-噻唑基)-4-三氟甲基-咪唑。
42.通式VI的COX-2選擇性化合物或其藥學上可接受的鹽在制備用于治療下泌尿道神經肌肉功能不良的藥物中的應用，其特征在于， 其中R29代表NHS(O)2CH3，S(O)2CH3，S(O)2NH2，S(O)(NH)NH2或S(O)2NHC(O)(CH2)1-3CH3，和R30代表C1-6烷基或C3-7環烷基或未取代的或單-、二-或三-取代的苯基或苯基硫代基，苯基或苯基硫代基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基。
43.如權利要求42所述的化合物VI的應用，其特征在于，其中，R29代表NHS(O)2CH3，S(O)2CH3或S(O)2NH2。
44.如權利要求42或43所述的化合物VI的應用，其特征在于，其中，R30代表單-、二-或三-取代的苯基或苯基硫代基，苯基或苯基硫代基的各個取代基為鹵原子和/或C1-6烷基或C1-6烷氧基。
45.如權利要求42或43所述的化合物VI的應用，其特征在于，其中，R30代表未取代的或單-、二-或三-取代的苯基硫代基，苯基硫代基的各個取代基為鹵原子。
46.如權利要求42或43所述的化合物VI的應用，其特征在于，其中，R30代表二氟苯基硫代基。
47.如權利要求42所述的6-(2，4-二氟苯基硫代)-5-甲磺酰氨基-1-氧代-2，3-二氫-茚的應用。
48.顯著抑制COX-2同工酶的化合物在制備用于治療下泌尿道神經肌肉功能不良的藥物中的應用，其特征在于，所述化合物對COX-2同工酶的抑制效力比對COX-1同工酶的抑制效力至少大10倍。
49.如權利要求48所述的化合物的應用，其特征在于，所述化合物對COX-2同工酶的抑制效力比對COX-1同工酶的抑制效力至少大100倍。
50.如權利要求48或49所述的化合物的應用，其特征在于，所述化合物的IC50為0.1-100nM。
51.如權利要求48-50中任一項所述的化合物在制備藥物中的應用，其特征在于，所述藥物為適合口服、經皮、腸、靜脈內、肌肉內、皮下、經粘膜或吸入給藥的形式。
52.如權利要求48-51中任一項所述的化合物在制備藥物中的應用，其特征在于，所述藥物還含有藥學上可接受的稀釋劑或載體。
53.如權利要求48-52中任一項所述的化合物在制備藥物中的應用，其特征在于，所述藥物為適合以0.05-50mg/kg/天的劑量給藥的形式。
全文摘要
顯著也抑制COX－2同工酶的化合物，所述化合物對COX－2同工酶的抑制效力比對COX－1同工酶的抑制效力至少大10倍，所述化合物可用于制備治療下泌尿道神經肌肉功能不良的藥物。
文檔編號A61K31/365GK1688315SQ02807810
公開日2005年10月26日 申請日期2002年4月5日 優先權日2001年4月5日
發明者A·萊奧納蒂, R·泰斯塔, L·瓜爾內里 申請人:瑞蔻達蒂股份有限公司