專利名稱：用于減少癌癥化療引起的嘔吐并對化療增效的枇杷葉與生姜組合物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種天然藥物組合物，更具體地涉及一種由枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸組成的天然藥物組合物，該天然藥物組合物的制備方法以及該天然藥物組合物在用于制備減少癌癥化療引起的嘔吐副作用并對治療癌癥起增效作用的藥物中的用途。
背景技術：
癌癥目前已成為人類面臨的一大殺手，死亡率僅次于心血管疾病，而且呈逐年上升的趨勢。我國每年有180萬惡性腫瘤患者，其中2/3的病人接受化療，雖然有一定的療效， 但化療后大部分患者會出現不同程度的副作用，其中最常見的副作用是惡心、嘔吐等胃腸道反應。頻繁的嘔吐可導致消化液大量丟失，水、電解質、酸堿平衡紊亂，使病人痛苦不堪， 嚴重影響病人的生存質量，不僅會影響到療效，甚至使病人難以忍受而中斷治療。目前，臨床常用的止吐藥主要有組胺(H2)、乙酰膽堿(M)及多巴胺(DA)受體拮抗藥和大麻類藥物等，但這些藥物對化療后嘔吐的療效差，而且毒副作用強，應用上受到很大限制。新型止吐藥，如NK1受體拮抗劑和5-HT3受體拮抗類藥物，雖然對化療后嘔吐止吐效果好，但價格昂貴，使用范圍窄，而且毒副反應大，臨床多需聯合用藥，且未見抗癌增效作用， 因此期待著天然抗癌減毒增效藥物的研制。中醫藥對于癌癥化療減毒增效的研究，令人矚目。目前尚無對抗癌癥化療具有減輕嘔吐副作用及增效作用的中成藥。因此，研發一種高效低毒、價格低廉，易于推廣的可用于減輕癌癥化療嘔吐副作用并起增效減毒作用的天然中藥成為臨床亟待解決的問題。中藥姜(zingiber)被譽為“嘔吐圣藥”。姜辣素是從姜中提取的活性成份，本發明人觀察到姜辣素可對抗無機及有機毒物硫酸銅和順鉬所致嘔吐，并抑制腸道嗜鉻細胞釋放致吐因子5-HT和P物質，姜辣素作用于化療嘔吐最相關的NKJP5-HT3等受體，為多靶點、天然低毒止吐藥。枇杷葉為薔薇科常綠小喬木植物枇杷Eriobotrya japonica (Thunb) Lindl 的干燥葉。《本草綱目》日“和胃降氣，清熱解暑毒。”具有潤肺止咳、降逆止嘔之功效，常用于治肺熱咳嗽，胃熱逆嘔等疾病。近年來，枇杷葉和生姜抗癌作用得到證實，尤其是生姜辛辣成分及枇杷葉中的熊果酸。研究表明枇杷葉中的熊果酸對多種致癌、促癌物有抵抗作用， 且對多種惡性腫瘤細胞有明顯細胞毒作用和誘導分化作用及抗血管形成作用，其防癌抗癌作用已引起重視，有望成為低毒有效的新型抗癌藥。本發明人經過大量的各配方比例的研究和實驗以及臨床實踐，最后獲得了本發明的最佳藥物比例組合物，是與多受體靶點比例相契合的創新性的組合物，并證明了其對癌癥化療引起的嘔吐等副作用有極好的療效并能同時起到輔助抑制腫瘤的效果，由此完成了本發明。

發明內容
本發明第一個目的在于提供一種天然藥物組合物，該組合物低毒高效，療效確切、便于應用及推廣，既可以抗腫瘤，又能對抗化療后嘔吐等副作用。本發明第二個目的在于提供上述天然藥物組合物的制備方法。本發明第三個目的在于提供上述天然藥物組合物在制備減少癌癥化療副作用并對治療癌癥起增效減毒作用的藥物中的用途。本發明提供的一種天然藥物組合物，由枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸以重量計按3-8 1-5 3-9 1-3的比例組成。上述天然藥物組合物，其中枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸的用量比例是8 5 9 3。其中，枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸可通過本領域技術人員公知的常規方法進行提純獲得，姜辣素可以商業購得，采用常規方法獲得的這些成分或采用商業購得的成分組成的本發明的天然藥物均能獲得相同的療效。以下列出的方法僅僅是發明人認為更優選的方法，并不意在對該天然藥物組合物中各成分的提取方法作出特別的限制。優選地，上述天然藥物組合物中枇杷葉生姜水煎濃縮提取物的制備方法是按照配伍比例為1 1或1-10 1其他比例取枇杷葉、生姜，加10倍量蒸餾水， 浸泡lh，于加石棉網的電爐上加熱煎煮20分鐘，絹布過濾，保存濾液，藥渣再加6倍蒸餾水， 同法浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液混合，冷凍干燥得干浸膏，粉碎，過篩，即得。上述天然藥物組合物中姜辣素的制備方法是將生姜切成薄片，自然干燥，用高速萬能粉碎機打成粉末，過30目篩，再將過篩細粉放入5000mL大磨口瓶中，以6倍量丙酮常溫下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超聲波頻率下超聲提取15min，離心得到上清液，殘渣棄去；將上清液再減壓抽濾，濾液置于旋轉蒸發儀中真空濃縮得姜油狀混合物，再將該混合物進行多次濃縮干燥純化得到姜辣素。上述天然藥物組合物中枇杷葉乙醇提取物制備方法是將干燥的枇杷葉粉碎，過20-40目篩，加12倍量無水乙醇，90°C下用索氏提取器回流提取3次，每次10小時，合并溶劑并減壓回收得浸膏，干燥，粉碎，過篩，即得。上述天然藥物組合物中熊果酸制備方法是將上述所得浸膏分別用石油醚、氫氧化鈉溶液和水洗至洗出液無色，再用無水乙醇加熱溶解，加活性炭回流脫色15min，濾過.用熱乙醇反復洗滌殘渣，放冷，靜置，得白色片狀結晶，用熱甲醇重結晶，即得熊果酸。本發明還提供了該天然藥物組合物的優選的制備方法，包括(1)枇杷葉生姜水煎濃縮提取物的制備按照配伍比例為1 1或1-10 1其他比例取枇杷葉、生姜，加10倍量蒸餾水， 浸泡lh，于加石棉網的電爐上加熱煎煮20分鐘，絹布過濾，保存濾液，藥渣再加6倍蒸餾水， 同法浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液混合，冷凍干燥得干浸膏，粉碎，過篩，即得。(2)姜辣素的制備將生姜切成薄片，自然干燥，用高速萬能粉碎機打成粉末，過30目篩，再將過篩細粉放入5000mL大磨口瓶中，以6倍量丙酮常溫下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超聲波頻率下超聲提取15min ；離心得到上清液，殘渣棄去；將上清液再減壓抽濾，濾液置于旋轉蒸發儀中真空濃縮得姜油狀混合物，再將該混合物進行多次濃縮干燥純化得到姜辣素。
(3)枇杷葉乙醇提取物制備將干燥的枇杷葉粉碎，過20-40目篩，加12倍量無水乙醇，90°C下用索氏提取器回流提取3次，每次10小時，合并溶劑并減壓回收得浸膏，干燥，粉碎，過篩，即得。(4)熊果酸制備將上述所得浸膏分別用石油醚、氫氧化鈉溶液和水洗至洗出液無色，再用無水乙醇加熱溶解，加活性炭回流脫色15min，濾過.用熱乙醇反復洗滌殘渣，放冷，靜置，得白色片狀結晶，用熱甲醇重結晶，即得熊果酸。(5)按比例選取枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸，均勻混合，即得。上述天然藥物組合物的制備方法，還包括將步驟( 制得的產品進一步通過常規的制藥手段制成含有天然藥物組合物IOOmg或200mg規格的膠囊，或將按濕法制粒工藝制成含天然藥物組合物IOOmg或200mg規格的片劑。本發明還包括天然藥物組合物在制備減少癌癥化療副作用并對治療癌癥起增效作用的藥物中的用途，以及在制備減少癌癥化療引起的嘔吐反應并對治療癌癥起增效作用的藥物中的用途。本發明天然藥物組合物的服用方法治療癌癥化療后嘔吐可用膠囊劑或片劑，每人每天600mg，分三次飯后服用。本發明天然藥物組合物在抗嘔吐及抑制腫瘤方面的有益效果如下1、本發明天然藥物組合物具有良好的抗嘔吐作用，現已完成臨床前在水貂嘔吐模型的藥理學研究。采用我們首創的水貂嘔吐模型，觀察該天然藥物組合物對順鉬導致水貂嘔吐模型在一定時期內的對抗作用。研究表明該天然藥物組合物對于順鉬所致水貂的嘔吐反應有明顯的對抗作用，其作用優于單獨應用枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物。同時，其降低致嘔率方面，其作用與西藥昂丹司瓊媲美。2、本發明天然藥物組合物具有抑制腫瘤的作用，現已完成臨床前在小鼠腫瘤模型上的藥理學研究。采用了小鼠腫瘤模型，觀察天然藥物組合物對小鼠體內腫瘤的抑制作用。 研究表明該天然藥物組合物對于小鼠體內腫瘤有明顯的抑制作用。3、另外證明了本天然藥物組合物能增強化療藥物對腫瘤的抑制作用，現已完成臨床前在小鼠腫瘤細胞模型上的藥理學研究。采用了小鼠腫瘤模型，觀察該天然藥物組合物與環磷酰胺聯合對小鼠體內腫瘤的抑制作用。研究表明該天然藥物組合物能明顯增加環磷酰胺對于腫瘤的抑制作用。4、同時完成了在小鼠的急性毒理研究，研究表明該天然藥物組合物對進食及行為活動等無影響，臟器及病理學觀察也未見異常。說明該天然藥物組合物毒性很小。5、本發明人獨創地將枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸進行組合，并通過大量實驗確定這些組分之間的用量配比，使該組合物發揮了很好的協同作用，獲得意外的效果。經過我們反復實驗研究，令發明人驚訝的是本發明的天然藥物組合物各組分之間的比例在3-8 1-5 3-9 1-3時產生了出乎意料的協同作用，增效明顯，對副作用起到非常好的效果，尤其在各組分的用量比例是8 :5:9: 3時尤其明顯，這是本發明人在之前發表的論文基礎上通過繼續努力付出大量創造性勞動而獲得的， 本領域普通技術人員僅僅通過公開的內容無法簡單獲得這種配比范圍以及最佳用量比例。
6、該天然藥物組合物枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸各組分均可通過常規手段獲得，其中一些組分例如姜辣素還可通過商業購得，這樣的組合物本身具有獲得方便、成本較低的效果，這也是發明人通過大量創造性勞動方獲得的兼具極佳療效和較高工業實用性的產品。
具體實施例方式下面通過實施例和試驗例進一步闡述本發明天然藥物組合物的制備，以及其在抗嘔吐和抗腫瘤中應用的有益效果。實施方案第一步各種提取物的制備(1)枇杷葉生姜水煎濃縮提取物的制備按照配伍比例為1 1或1-10 1其他比例取枇杷葉、生姜，加10倍量蒸餾水， 浸泡lh，于加石棉網的電爐上加熱煎煮20分鐘，絹布過濾，保存濾液，藥渣再加6倍蒸餾水， 同法浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液混合，冷凍干燥得干浸膏，粉碎，過篩，即得。(2)姜辣素的制備將生姜切成薄片，自然干燥，用高速萬能粉碎機打成粉末，過30目篩，再將過篩細粉放入5000mL大磨口瓶中，以6倍量丙酮常溫下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超聲波頻率下超聲提取15min ；離心得到上清液，殘渣棄去；將上清液再減壓抽濾，濾液置于旋轉蒸發儀中真空濃縮得姜油狀混合物，再將該混合物進行多次濃縮干燥純化得到姜辣素。(3)枇杷葉乙醇提取物制備將干燥的枇杷葉粉碎，過20-40目篩，加12倍量無水乙醇，90°C下用索氏提取器回流提取3次，每次10小時，合并溶劑并減壓回收得浸膏，干燥，粉碎，過篩，即得。(4)熊果酸制備將上述所得浸膏分別用石油醚、氫氧化鈉溶液和水洗至洗出液無色，再用無水乙醇加熱溶解，加活性炭回流脫色15min，濾過.用熱乙醇反復洗滌殘渣，放冷，靜置，得白色片狀結晶，用熱甲醇重結晶，即得熊果酸。第二步制劑的制備(1)本發明天然藥物組合物膠囊制劑的制備分別稱取上述步驟制備的枇杷葉生姜水煎濃縮提取物32mg、姜辣素20mg、枇杷葉乙醇提取物36mg與熊果酸Umg，同時稱取淀粉395mg、硬脂酸鎂5mg，均勻混合，填充膠囊， 制成每個純重500mg的膠囊劑。(2)本發明天然藥物組合物片劑的制備分別稱取上述步驟制備的枇杷葉生姜水煎濃縮提取物32mg、姜辣素20mg、枇杷葉乙醇提取物36mg與熊果酸Umg，同時稱取淀粉^5mg、乳糖lOOmg，均勻混合，用濕法制粒、 干燥，整粒后與5mg硬脂酸鎂混合，壓片，制成每片純重500mg的片劑。藥效及藥理學資料在下述試驗例子中組合物為枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸的用量比例為8 5 9 3。發明人對上述各成分用量比例在 3-8 1-5 3-9 1-3之間時的多種配比組合獲得的組合物進行了與上相同的實驗，均發現在這種用量范圍內的天然藥物組合物能獲得很好的協同作用，對癌癥化療副作用能起到很好的效果并對癌癥的治療有增效作用。并且，發明人發現枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸還可以是以常規手段獲得的成分，而不僅僅是用上述的方法獲得的成分，由常規手段制得的或商業購得的上述四種成分組成的組合物具有與上述方法制得的組合物相同的效果，其實驗資料這里不再列舉，本領域技術人員對此能夠認可。 以下是優選的實施方式獲得的藥效及藥理學資料試驗例1 天然藥物組合物治療嘔吐作用的藥效學研究1、試驗材料(1)枇杷葉，由北京同仁堂大藥房購買，生姜，購于山東平度，由本學院技術室主任鑒定為為薔薇科植物枇杷干燥葉和姜科植物姜的塊莖。(2)順鉬(cisplatin)，山東齊魯制藥廠生產，批號903005CE，20mg/支。(3)鹽酸昂丹司瓊注射液，奧賽康制藥，批號090102，anl:^ig.(4)健康成年水貂，體重1. 3-1. mcg，雄性，由青島特種養殖動物飼養中心提供，每只動物單獨置于75CmX50CmX50Cm的鐵籠中，24h自然光照射，實驗前自由進食飲水。2、試驗方法將水貂隨機分為7組，每組6只，A組為姜辣素組，B組為枇杷葉乙醇提取物組，C 組為姜辣素與枇杷葉乙醇提取物配伍組(比例為5 9)，D組為枇杷葉生姜水煎濃縮提取物，E組為本發明的天然藥物組合物(枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸按8 :5:9: 3比例混合)，F組為順鉬陽性對照組，G組為昂丹司瓊組。A 組先以姜辣素10g. kg—1 (相當于含生藥量)ig預處理，30min給予順鉬7. 5mg. kg^ip ；B組給予枇杷葉乙醇提取物10g. kg_H相當于含生藥量)ig預處理，30min給予順鉬7. 5mg. kg^ip ； C組給予姜辣素與枇杷葉乙醇提取物配伍藥物10g. kg—Y相當于含生藥量)ig預處理，30min 給予順鉬7. 5mg. kg_Hp ；D組給予枇杷葉生姜水煎濃縮提取物10g. kg—1 (相當于含生藥量) ig預處理，30min給予順鉬7. 5mg. kg^ip ；E組給予本發明的天然藥物組合物10g. kg—1 (相當于含生藥量)ig預處理，30min給予順鉬7. 5mg. kg^ip ；F組給予生理鹽水，30min給予順鉬7. 5mg. kg^ip ；G組先以昂丹司瓊組7. 5g. kg—1預處理，30min給予順鉬7. 5mg. kgHp。為觀察水貂在給藥后他內的嘔吐反應，記錄其嘔吐潛伏期，干嘔及嘔吐次數。3、實驗結果與對照組比較，各治療組均能明顯減輕干嘔及嘔吐次數并有效延長嘔吐潛伏期(P <0. 01)。各治療組均能降低致嘔率，枇杷葉生姜水煎濃縮提取物組致嘔率與昂丹司瓊組相同；而本發明的天然藥物組合物組致嘔率低于昂丹司瓊組。結果見表1.表1提取物配伍對順鉬(7. 5mg/kg, ip)致嘔作用的影響 ±、η = 6)
權利要求
1.一種減少癌癥化療引起的嘔吐反應并對治療癌癥起增效作用的天然藥物組合物，其特征在于該組合物由枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸以重量計按3-8 1-5 3-9 1-3的比例組成，其中枇杷葉生姜水煎濃縮提取物的制備方法是按照配伍比例為1 1或1-10 1其他比例取枇杷葉、生姜，加10倍量蒸餾水，浸泡 Ih,于加石棉網的電爐上加熱煎煮20分鐘，絹布過濾，保存濾液，藥渣再加6倍蒸餾水，同法浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液混合，冷凍干燥得干浸膏，粉碎，過篩，即得；其中姜辣素的制備方法是將生姜切成薄片，自然干燥，用高速萬能粉碎機打成粉末，過30目篩，再將過篩細粉放入5000mL大磨口瓶中，以6倍量丙酮常溫下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超聲波頻率下超聲提取15min，離心得到上清液，殘渣棄去；將上清液再減壓抽濾，濾液置于旋轉蒸發儀中真空濃縮得姜油狀混合物，再將該混合物進行多次濃縮干燥純化得到姜辣素；其中枇杷葉乙醇提取物的制備方法是將干燥的枇杷葉粉碎，過20-40目篩，加12倍量無水乙醇，90°C下用索氏提取器回流提取3次，每次10小時，合并溶劑并減壓回收得浸膏，干燥，粉碎，過篩，即得；其中熊果酸的制備方法是將上述制得枇杷葉乙醇提取物分別用石油醚、氫氧化鈉溶液和水洗至洗出液無色， 再用無水乙醇加熱溶解，加活性炭回流脫色15min，濾過.用熱乙醇反復洗滌殘渣，放冷，靜置，得白色片狀結晶，用熱甲醇重結晶，即得熊果酸。
2.如權利要求1所述的天然藥物組合物，其中枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸的用量比例是8 5 9 3。
3.如權利要求1或2的天然藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法包括(1)枇杷葉生姜水煎濃縮提取物的制備按照配伍比例為1 1或1-10 1其他比例取枇杷葉、生姜，加10倍量蒸餾水，浸泡 Ih,于加石棉網的電爐上加熱煎煮20分鐘，絹布過濾，保存濾液，藥渣再加6倍蒸餾水，同法浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液混合，冷凍干燥得干浸膏，粉碎，過篩，即得；(2)姜辣素的制備將生姜切成薄片，自然干燥，用高速萬能粉碎機打成粉末，過30目篩，再將過篩細粉放入5000mL大磨口瓶中，以6倍量丙酮常溫下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超聲波頻率下超聲提取15min，離心得到上清液，殘渣棄去；將上清液再減壓抽濾，濾液置于旋轉蒸發儀中真空濃縮得姜油狀混合物，再將該混合物進行多次濃縮干燥純化得到姜辣素；(3)枇杷葉乙醇提取物制備將干燥的枇杷葉粉碎，過20-40目篩，加12倍量無水乙醇，90°C下用索氏提取器回流提取3次，每次10小時，合并溶劑并減壓回收得浸膏，干燥，粉碎，過篩，即得；(4)熊果酸制備將步驟C3)制得的枇杷葉乙醇提取物分別用石油醚、氫氧化鈉溶液和水洗至洗出液無色，再用無水乙醇加熱溶解，加活性炭回流脫色15min，濾過.用熱乙醇反復洗滌殘渣， 放冷，靜置，得白色片狀結晶，用熱甲醇重結晶，即得熊果酸；(5)按比例選取枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸均勻混合，即得。
4.如權利要求3所述的天然藥物組合物的制備方法，還包括將步驟(5)制得的產品進一步通過常規的制藥手段制成含有天然藥物組合物IOOmg或200mg規格的膠囊，或將按濕法制粒工藝制成含天然藥物組合物IOOmg或200mg規格的片劑。
5.如權利要求1-2任一項所述的天然藥物組合物在制備減少癌癥化療引起的嘔吐反應并對治療癌癥起增效作用的藥物中的用途。
全文摘要
本發明涉及一種天然藥物組合物、其制備方法及其在制備癌癥化療中減毒增效藥物中的用途，該天然藥物組合物由枇杷葉生姜水煎濃縮提取物、姜辣素、枇杷葉乙醇提取物與熊果酸按3-8∶1-5∶3-9∶1-3的比例組成，該組合物對由癌癥化療引起的嘔吐等副作用有極好的療效并能同時起到抑制腫瘤的作用。
文檔編號A61K31/122GK102526667SQ20121001464
公開日2012年7月4日 申請日期2012年1月10日 優先權日2011年3月31日
發明者倪貝貝, 岳旺, 王雙燕, 石振艷 申請人:青島大學