專利名稱：用于輔助b型肝炎藥物治療效果的組合物的制作方法
技術領域：
本發明提供一種用于輔助B型肝炎藥物治療效果的組合物，其包含有微量元素含 量高的螺旋藻，特別是含有高含量的鋅、硒及鉻元素。本發明的組合物可用于輔助B型肝炎 藥物的治療效果，以達到抗發炎、抗病毒及抗氧化的功效。
背景技術：
B型肝炎是由B型肝炎病毒感染所引起，無法完全清除病毒、血液中仍含有B型肝 炎表面抗原的患者即為B型肝炎帶原者。B型肝炎帶原者不僅自身有罹患肝癌、慢性肝炎、 肝硬化等風險，也有經由血液、生產等方式散播病原的危險。臺灣為B型肝炎流行地區之 一，根據統計，B型肝炎帶原者約有400萬人。因此，增進B型肝炎的治愈率為刻不容緩的課題。人體中包含的維生素C、鐵、鋅、鉻及硒等微營養素，經研究證實，具有免疫調節的 功能，亦扮演抗氧化物的角色，參與調節免疫的恒定(homeostasis)及改變病毒基因。B型 肝炎及帶原患者的微營養素狀態與健康者明顯不同。臨床顯示，伴隨著微量元素的缺乏，病 毒性B型肝炎患者或帶原者的氧化壓力及血液中金屬含量較高，進而降低其免疫、抗氧化 及抗病毒能力，影響其治愈率。因此，通過補充微營養素可有效調整患者體內的微營養素狀 態，同時提升B型肝炎治愈率。目前市面上雖有單一或復合的微營養素補充營養品，但仍無針對輔助B型肝炎藥 物治療效果含有特定比例微量元素的營養品。天然成分如螺旋藻雖含有抗氧化所需的維生 素和礦物質，例如β胡蘿卜素、維生素A、B群及鐵，但其中所含有的免疫調節所需的微量 元素例如鋅、鉻及硒仍不足(螺旋藻通常含有約50ppm的鋅、0. 5ppm的硒及3. 2ppm的鉻)。 因此，目前市面上販賣的營養補充品均有輔助B型肝炎治療效果不佳的問題，結合輔助B型 肝炎治療所需的微量元素的組成物是有其開發的必要性。

發明內容
雖然現有技術已披露了螺旋藻作為營養補充品的應用性，然而其如上所述，缺乏 輔助B型肝炎治療所需的足夠含量的微量元素，例如鋅、硒及鉻。本發明的目的在于提供用 于輔助B型肝炎藥物治療效果的組合物，以達到抗發炎、抗病毒及抗氧化的功效。為達上述目的，本發明提供一種用于輔助B型肝炎藥物治療效果的組合物， 包含螺旋藻，其中該螺旋藻中所包含的鋅元素含量為1000ppm-1500ppm，硒元素含量為 34ppm-42ppm，及鉻元素含量為 30ppm-40ppm。在優選實施例中，該組合物中的螺旋藻包含的鋅元素含量優選為 1200ppm-1300ppm ；該組合物中的螺旋藻包含的硒元素含量優選為36ppm-40ppm ；及組合物 中的螺旋藻包含的鉻元素含量優選為34ppm-36ppm。本發明中的所述的螺旋藻是通過以下培養方式培養而成取得藻種，接種至培 養液，及進行擴大培養；其中該培養液是由高氮有機物料發酵后經過曝氣，使該培養液的
3PH值大于或等于8，且于該培養液中加入含量為8g-12g的硫酸鋅(ZnSO4. 7H20)；含量為 0. lg-o. 2g的亞硒酸鈉(Na2SeO4)及含量為0. 2g-0. 4g的硫酸鉻(Cr(SO4)3. H2O)；以該培養 液1噸為基準。于優選實施例中，所述的硫酸鋅(ZnSO4. 7H20)的含量優選為9. lg-11. 2g ；所述的 亞硒酸鈉(Na2SeO4)的含量優選為0. 12g_0. 18g ；所述的硫酸鉻(Cr(SO4)3. H2O)的含量優選 為0. 24g-0. 37g，以該培養液1噸為基準。由于一般的螺旋藻通常僅含有約50ppm的鋅、0. 5ppm的硒及3. 2ppm的鉻，通過 本發明的培養方法培養可大幅提高螺旋藻中的微量元素含量，將其提升至鋅元素含量為 1000ppm-1500ppm，硒元素含量為34ppm-42ppm，及鉻元素含量為30ppm-40ppm的水平。上述ppm是濃度單位，是用溶質質量占全部溶液質量的百萬分比來表示的濃度， 也稱百萬分比濃度。本發明是通過特殊的螺旋藻培養方法培養出高含量的微量元素(硒、鋅、鉻)，并 制備出一種用于輔助B型肝炎藥物治療效果的組合物，其包含本發明培養的螺旋藻，該組 合物可使接受B型肝炎藥物治療的病人具有抗發炎、抗病毒及抗氧化的功效，進而提升治愈率。
具體實施例方式以下結合實施例詳細說明本發明，但不限定本發明的實施范圍。本發明提供一種用于輔助B型肝炎藥物治療效果的組合物，其包含螺旋藻，其中 所述的螺旋藻包含的鋅元素含量為1000ppm-1500ppm，硒元素含量為34ppm-42ppm，及鉻 元素含量為30ppm-40ppm。其中所述的螺旋藻優選為包含1200ppm-1300ppm的鋅元素；所 述的螺旋藻包含的硒元素含量優選為36ppm-40ppm ；及螺旋藻包含的鉻元素含量優選為 34ppm_36ppm0本發明中的所述的螺旋藻是通過以下培養方式培養而成取得螺旋藻的藻種， 接種至培養液，進行擴大培養，及持續培養至一個月后收成；其中該培養液是由高氮有 機物料發酵后經過曝氣，使該培養液的PH值大于或等于8，且于1噸該培養液中加入含 量為8g-12g的硫酸鋅(ZnSO4. 7H20)，優選為9. lg-11. 2g ；含量為0. lg-0. 2g的亞硒酸 鈉(Na2SeO4)，優選為0. 12g_0. 18g及含量為0. 2g-0. 4g的硫酸鉻(Cr(SO4)3. H2O)，優選為 0. 24g-0. 37g。因此，螺旋藻將自行吸收儲存該等微量元素于藻體中，使目標量的微量元素 得以穩定保存，減少如一般營養品中因后續加工所造成的微量元素流失。本發明高氮有機物料中的“高氮”是與中國人民共和國農業部農業行業標準比較 而得的，即與標準號是NY525-2002中規定N為5% wt的標準比較而得的。再者，由于本發 明的螺旋藻最終是供予人類食用，因此培養其培養液也必須為人類可食用的，基于上述兩 點說明，本領域技術人員應不難得知本發明中的高氮有機物料是指以可食用豆類為原料經 發酵、腐熟后，所得N含量超過5 % wt的有機物料，不包含化學物質尿素、或不可食用的動物 糞便等。本發明組成物的輔助B型肝炎藥物治療效果通過測試患者肝指數變化、病毒抗原 變化及氧化壓力變化獲得。此外亦檢測患者體內的微量元素的含量，以比較使用本發明的 組合物前后的差異。
一般稱為“肝指數”的“GOT”及“GPT”值各代表麩氨基酸草醋酸轉氨基酵素 (Glutamic Oxaloacetic Transaminase, GOT)及麩氨基酸焦葡萄轉氨基酵素(Glutamic Pyruvic Transaminase，GPT)，其為肝細胞中的重要酵素。一旦肝細胞受到破壞，該等酵素 將大量流失至血清，導致血清中GOT及GPT值的上升，藉此可得知肝細胞壞死的程度，而GOT 及GPT正常值均為0-35mU/mL。“e抗原”一般為病毒活性的指針，e抗原測試為陽性時表示病毒的復制相當活躍， 因此B型肝炎病毒e抗原(HbeAg)的“轉陰率”為治療肝炎療效的重要指標之一。“e抗原轉 陰”的定義為B型病毒DNA自血清中清除及出現e抗體(HbeAb呈陽性)。而病毒定量是通 過萃取純化患者血清中的HBV DNA，接著使用FastStart DNA Master SYBR Green I套組、 10 uM B63S 訊息股引子(sense primer)及 10M B301AS 反義股引子(antisense primer) 進行擴增，搭配Roche LightCycler Machine進行定量PCR而完成。B型肝炎患者體內的氧化壓力較健康者為高，其是影響病毒清除率及組織復原能 力的因素之一。氧化壓力是通過測試體內脂質過氧化產物丙二醛(malondialdehyd^MDA) 的含量得知。MDA指數的降低為體內脂質的過氧化降低的結果，其代表體內氧化壓力的降 低。而麩胱甘肽過氧化酶(glutathione peroxidase,GPx)及麩胱甘肽還原酶(glutathione reductase, GR)均為抗氧化酵素，因此GPx及GR活性的提升代表體內氧化壓力的降低。B型肝炎患者體內一般含有較高含量的鐵、銅、鋁及較低含量的鋅及硒。較高含量 的鐵或銅是與氧化壓力上升有關，而高鋁含量則與肝功能受損無法正常代謝鋁有關。此外， 由于B型肝炎患者體內有較高的氧化壓力，因而耗損過多的含鋅或硒的相關抗氧化酵素， 導致體內鋅或硒的含量明顯降低。因此，補充鋅及鉻可供體內因氧化壓力升高所耗損的抗 氧化酵素制造所需，進而提升免疫功能，降低對細菌的易感性。以下是通過實施例檢測使B型肝炎患者服用本發明的用于輔助B型肝炎藥物治療 效果的組合物所造成的各項指標性數值的影響，以證明本發明組合物確實具有抗發炎、抗 病毒及抗氧化的功效，進而提升B型肝炎患者服藥的治愈率。
實施例本發明的最優選實施例中是以符合下列5項條件的慢性B型肝炎患者為測試對 象1.B型肝炎表面抗原(HBsAg)為陽性、2. B型肝炎e抗原(HBeAg)為陽性、3.抗B型肝 炎e抗原(anti-HBe)為陰性、4. GPT值大于200mU/mL (約為正常值五倍)、及5. B型肝炎病 毒DNA(HBV-DNA)大于lOOcopies/ml。符合上述條件的患者共20人分為“實驗組”及“對 照組”。本發明的最優選實施例中所提供的每一單位(500mg)的輔助B型肝炎藥物治療效 果的組合物由100wt%螺旋藻組成，其中該螺旋藻含有1250ppm的鋅、38ppm的硒及35ppm 的鉻。本發明最優選實施例中的螺旋藻培養液(其量為1噸)由加入含量為10. 16g 的硫酸鋅(ZnS04. 7H20)、含量為0. 15g的亞硒酸鈉(Na2Se04)及含量為0. 3lg的硫酸鉻 (Cr (S04) 3. H20)組成。實驗方式在本發明的最優選實施例中，給予實驗組患者市售藥品肝安能(lamivudine，每日口服一錠IOOmg)及長效型干擾素(interferon-alpha，羅氏藥廠，1周1支，每周注射1次)， 并用上述本發明最優選實施例的組合物(口服一次兩錠500mg*2，一天三次)。對照組患者 則給予同樣的肝安能及長效型干擾素治療，不并用上述本發明最優選實施例的組合物。于 治療期第0、第3及第6個月分別對實驗組及對照組患者抽血，以檢測病毒數及e抗原轉陰 率、肝功能指數、MDA指數及血液中鐵、銅、鋁、鋅、硒及鉻的含量。患者于抽血前是隔夜禁食 8至12小時。實驗結果1.肝功能指數使用本發明組合物的實驗組于治療第3個月及第6個月的平均GOT及GPT值如表 1所示，均明顯較治療前低，且在第3個月即恢復至正常范圍。此外，實驗組患者在服藥過程中，血液中血紅素(Hb)、離心后紅血球比例(Hct)、 紅血球(RBC)及白血球(WBC)的測試結果均在正常范圍中，顯示本發明的組合物對于患者 的白血球總數及血紅素值等，并無顯著副作用。表1 2. B型肝炎病毒量及e抗原轉陰率實驗組于治療第3月及第6月的病毒量如表2所示，均明顯較治療前下降。e抗原 轉陰率的定義如所述的，為B型病毒DNA自血清中清除及出現e抗體(HbeAb呈陽性)，治療 前HBeAb呈陰性的患者有10位，在第3個月有3位轉為陽性，第6個月又增加3位呈現陽 性，總計實驗組中e抗原轉陰率為50%。與一般僅使用干擾素治療達到e抗原轉陰率(約 為30-40% )相比明顯提高。
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表 2 注*代表 ρ < 0. 05，** 代表 ρ < 0. 013.氧化壓力如表3所示，實驗組患者血液中的MDA指數于治療3個月及治療6個月時均較治 療前低，而對照組患者血液中的MDA指數則略微上升，且如表4及表5所示，抗氧化酵素GPx 及GR的活性于治療3個月及治療6個月時均較治療前高，顯示實驗組患者體內的氧化壓力 較對照組患者低。表3 注*代表 ρ < 0. 05，** 代表 ρ < 0. 01表 4 注*代表 ρ < 0. 05，** 代表 ρ < 0. 01表 5 注*代表 p < 0. 05，** 代表 p < 0. 014.血液中微量元素的含量如表6所示，實驗組患者血液中的含鐵量于治療3個月及治療6個月時均較治療 前低，代表治療后的實驗組患者體內的氧化壓力較對照組低。表 6 注*代表 p < 0. 05，** 代表 p < 0. 01如表7所示，實驗組患者血液中的含銅量于治療3個月及治療6個月時均較治療 前低，而對照組則略微上升，代表治療后的實驗組患者體內的氧化壓力較對照組低。表7 注*代表 p < 0. 05，** 代表 p < 0. 01如表8所示，實驗組患者血液中的含鋁量于治療3個月及治療6個月時均較治療 前低，而對照組則略微上升，代表治療后的實驗組患者的肝臟具有優選的鋁代謝能力。表8: 注*代表 ρ < 0. 05，** 代表 ρ < 0. 01如表9所示，實驗組患者血液中的含鋅量于治療3個月及治療6個月時均明顯較 治療前高，而對照組則無明顯變化，代表治療后的實驗組患者得以藉由本發明的組成物有 效補充體內鋅的含量。表 9 注*代表 ρ < 0. 05，** 代表 ρ < 0. 01如表10所示，實驗組患者血液中的含硒量于治療3個月及治療6個月時均明顯較 治療前高，而對照組則持續下降，代表治療后的實驗組患者得以藉由本發明的組成物有效 補充體內硒的含量。表10 注*代表 ρ < 0. 05，** 代表 ρ < 0. 01如表11所示，實驗組患者血液中的含鉻量于治療3個月及治療6個月時均明顯較 治療前高，而對照組則代表治療后的實驗組患者得以藉由本發明的組成物有效補充體內鉻 的含量。表11: 注*代表 ρ < 0. 05，** 代表 ρ < 0. 01由上述實驗結果可知，本發明的用于輔助B型肝炎藥物治療效果的組合物可有效 降低B型肝炎患者的肝功能指數、病毒量、氧化壓力，且有效降低B型肝炎患者血液中的鐵、 銅及鋁含量，另外藉由本發明的組合物中所含的鋅、硒及鉻補足B型肝炎患者所缺乏的該 等微量元素，充分達到輔助B型肝炎藥物治療的效果。其它實施態樣本發明的實施方法已詳述于所述的實施例，任何熟悉本技術領域的人士皆可依本 發明的說明，在不背離本發明的精神與范圍內視需要進行更動或修飾。
權利要求
一種用于輔助B型肝炎藥物治療效果的組合物，包含螺旋藻，其中所述的螺旋藻包含鋅元素含量為1000ppm-1500ppm，硒元素含量為34ppm-42ppm，及鉻元素含量為30ppm-40ppm。
2.如權利要求1所述的組合物，其中所述的螺旋藻含量為80wt%-100wt%。
3.如權利要求2所述的組合物，其中所述的螺旋藻含量為100wt%。
4.如權利要求1所述的組合物，其中所述的螺旋藻包含的鋅元素含量為 1200ppm-1300ppmo
5.如權利要求1所述的組合物，其中所述的螺旋藻包含的硒元素含量為36ppm-40ppm。
6.如權利要求1所述的組合物，其中所述的螺旋藻包含的鉻元素含量為34ppm-36ppm。
7.如權利要求1所述的組合物，其中還包含藻藍蛋白40mg/g-80mg/g。
8.如權利要求1所述的組合物，其中所述的螺旋藻通過以下方法培養而成取得藻種；接種至培養液；進行擴大培養；及持續培養至一個月后收成；其中該培養液是由高氮有機物料發酵后經過曝氣，使該培養液的PH值大于或等于 8，且以1噸該培養液為基準，其中加入重量為8g-12g的硫酸鋅(ZnS04. 7H20)、重量為 0. lg-o. 2g 的亞硒酸鈉(Na2Se03)及重量為 0. 2g_0. 4g 的硫酸鉻(Cr(S04)3. H20)。
9.如權利要求1所述的組合物，其中于所述的螺旋藻的培養液中加入9.lg-11.2g的硫 酸鋅，以該培養液1噸為基準。
10.如權利要求1所述的組合物，其中于所述的螺旋藻的培養液中加入0.12g-0. 18g的 亞硒酸鈉，以該培養液1噸為基準。
11.如權利要求1所述的組合物，其中于所述的螺旋藻的培養液中加入0.24g-0. 37g的 硫酸鉻，以該培養液1噸為基準。
全文摘要
本發明提供了一種用于輔助B型肝炎藥物治療效果的組合物，其包含螺旋藻，其中所述的螺旋藻包含的鋅元素含量為1000ppm-1500ppm，硒元素含量為34ppm-42ppm及鉻元素含量為30ppm-40ppm，其是通過補充微量元素以達到輔助B型肝炎藥物治療的目的。
文檔編號A61K33/30GK101869585SQ200910134129
公開日2010年10月27日 申請日期2009年4月24日 優先權日2009年4月24日
發明者柯萬盛, 郭志宏, 闕壯群, 陳伯中 申請人:遠東生物科技股份有限公司