專利名稱：一種外用治療痹證的中藥物組合物及其制備方法和檢測方法
技術領域：
本發明涉及一種外用藥物組合物及其制備方法和檢測方法，特別涉及一種外用治療痹證的中藥物組合物及其制備方法和檢測方法。
背景技術：
中醫痹證是指人體氣血失調，肌表、經絡遭受風、寒、濕、熱侵襲，氣血經絡為病邪閉阻而引起的經脈、肌膚、關節、筋骨等疼痛、酸楚麻木、著重、屈伸不利或關節腫大、僵直、 畸形，肌肉萎縮，活動障礙，嚴重者影響臟腑。這類疾病是常見病、多發病，而且纏綿難愈，是醫學界重點攻關的項目之一。本病癥類似于現代醫學自身免疫病的風濕病范疇。痹證類似于西醫的風濕類疾病，目前西醫多采用手術、內服或局部注射抗炎劑或麻醉劑，均有一定的療效。其缺點是維持時間有限，患者不能自行操作，其治療也不夠方便， 或副作用較強。中藥治療此類癥患取得了可喜的療效，治療方法也多種多樣，如內服、外敷、熏洗、 穴位注射、熱熨、埋藥等方法。目前外用中成藥制劑雖然多種多樣，但都主治風濕痹證，且存在起效慢及存在毒性的問題。

發明內容
本發明的目的在于公開一種外用治療痹證的中藥物組合物，該中藥組合物具有通經活絡，祛風除濕，散寒止痛的作用。本發明的目的還在于公開一種外用治療痹證的中藥物組合物的制備方法。本發明的目的還在于公開一種外用治療痹證的中藥物組合物的檢測方法。本發明的目的在于公開一種外用治療痹證的中藥物組合物在制備用于治療骨性關節病藥物中的應用。本發明目的是通過如下技術方案實現本發明藥物組合物的原料藥組成為(按重量份計)
丹參150-250重量份蓽茇75-125重量份
胡椒75-125重量份花椒75-125重量份
伸筋草75-125重量份山柰10-30重量份
樟腦 25-50重量份冰片15-45重量份。本發明藥物組合物的原料藥組成優選為
川牛膝75-125重量份藁本75-125重量份
高良姜10-30重量份丹參180-220重量份胡椒90-110重量份伸筋草90-110重量份樟腦 30-45重量份
蓽茇90-110重量份花椒90-110重量份山柰 15-25重量份冰片20-40重量份本發明藥物組合物的原料藥組成優選為
丹參190-220重量份胡椒95-105重量份伸筋草95-105重量份
樟腦 35-43重量份本發明藥物組合物的原料藥組成優選為
丹參 200重量份蓽茇
胡椒 100重量份花椒
伸筋草100重量份山柰
樟腦 40重量份冰片
川牛膝90-110重量份藁本90-110重量份高良姜15-25重量份
蓽茇95-105重量份花椒95-105重量份山柰17-23重量份冰片25-35重量份。
100重量份 100重量份 20重量份 30重量份c
川牛膝95-105重量份藁本95-105重量份高良姜17-23重量份
川牛膝藁本尚良姜
100重量份 100重量份
20重量份本發明提供一種外用治療骨痛病的藥物組合物的制備方法，該方法包括如下步驟步驟1、取丹參、蓽茇、川牛膝、胡椒、花椒、藁本、伸筋草、山柰、高良姜九味粉碎成粗粉，用乙醇提取；步驟2、收集提取液，減壓回收乙醇至清膏；步驟3、清膏冷卻后加入樟腦、冰片，混勻；加入外用貼膏劑常規輔料，按照外用貼膏劑常規工藝，制成臨床或藥劑學上可接受的外用貼膏劑劑型，包括但不限于軟膏劑、膏藥、橡膠膏劑。所述制備方法中，步驟1優選為用乙醇滲漉提取；步驟1進一步優選為粗粉滲漉前先用乙醇浸漬；步驟1更優選為粗粉用75-95%乙醇浸漬18-36小時后滲漉；步驟1更優選為粗粉，用4-8重量倍75-95%乙醇作溶劑，浸漬18_36小時后，以每kg粗粉每分鐘1 3ml的速度滲漉；所述制備方法步驟2中清膏的相對密度60°C測定為1. 08 1. 12。上述藥物組合物橡膠膏劑的制備方法為取丹參、蓽茇、川牛膝、胡椒、花椒、藁本、 伸筋草、山柰、高良姜九味粉碎成粗粉，用75-95%乙醇作溶劑，浸漬18-36小時后，以每kg 粗粉每分鐘1 3ml的速度緩緩滲漉，收集滲漉液，減壓回收乙醇至60°C測定相對密度為 1. 08 1. 12的清膏，冷卻后加入樟腦、冰片，混勻，另加清膏總量的4. 5 5. 0重量倍量的基質，制成膏料，進行涂膏、切段、蓋襯，打孔，切片，即得本發明藥物組合物橡膠膏劑；上述基質組成為橡膠15-25重量份，松香10-20重量份，氧化鋅15_25重量份，羊毛脂1-5重量份，凡士林2-6重量份，汽油50-65重量份。
本發明藥物組合物的檢測方法包括如下鑒別方法和/或含量測定中的一種或幾種A、丹參薄層鑒別取本發明藥物組合物制劑，加甲醇靜置過夜，超聲處理，取甲醇提取液，蒸干，加甲醇使其溶解，作為供試品溶液；另取丹參酮IIA對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5μ 1，對照品溶液2μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以15-22 1的甲苯-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；B、胡椒和蓽茇薄層鑒別取本發明藥物組合物制劑，加甲醇靜置過夜，超聲處理，取甲醇提取液，水浴蒸干， 殘渣加醋酸，分次攪拌溶解，濾過，合并醋酸液，用三氯甲烷振搖提取2-3次，合并三氯甲烷液，水浴蒸干，殘渣加無水乙醇使溶解，作為供試品溶液；另取胡椒堿對照品，加無水乙醇制成每Iml含^ig的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5 μ 1， 對照品溶液2μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以5-10 1-3 1的甲苯-乙酸乙酯-丙酮為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C烘至斑點顯色清晰，置365nm 紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；C、藁本薄層鑒別取本發明藥物組合物制劑，置圓底燒瓶中，加水適量，照揮發油測定法測定。自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢出流入燒瓶為止，再加入乙酸乙酯，連接回流冷凝管， 加熱回流，冷卻，分取乙酸乙酯層，作為供試品溶液。另取藁本對照藥材2g，置圓底燒瓶中， 加水適量，照揮發油測定法測定。自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢出流入燒瓶為止，再加入乙酸乙酯anl，連接回流冷凝管，加熱回流30-50分鐘，冷卻，分取乙酸乙酯層，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10 μ 1和對照藥材溶液1 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以沸程為30°C-60°C的石油醚-丙酮90-100 1_10為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的主斑點；D、冰片、樟腦氣相色譜鑒別取本發明藥物組合物制劑，置圓底燒瓶中，加水適量，照揮發油測定法測定。自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢出流入燒瓶為止，再加入乙酸乙酯，連接回流冷凝管， 加熱回流，冷卻，分取乙酸乙酯層，作為供試品溶液；另取冰片、樟腦對照品，分別用乙酸乙酯制成每Iml含IOmg的溶液，作為對照品溶液；照氣相色譜法試驗，聚乙二醇PEG-20M為固定相的毛細管柱，毛細管柱柱長30m，內徑0. 25mm,膜厚度0. 25 μ m,柱溫為程序升溫初始 100°C，以每分鐘5°C升至150°C，保持5分鐘；分別吸取對照品溶液與供試品溶液適量，注入氣相色譜儀，供試品色譜中應呈現與對照品保留時間相同的色譜峰；E、照高效液相色譜法含量測定色譜條件與系統適應性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水為 60-90 20-40為流動相，檢測波長為400-500nm，理論板數按丹參酮II A峰計應不低于 2000 ；對照品溶液的制備取丹參酮IIA對照品，加甲醇制成每Iml含10 μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備取本發明藥物組合物制劑，加入甲醇，稱定重量，加熱回流，冷卻，稱重，用甲醇補足損失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μ 1，注入液相色譜儀，測定。本發明藥物組合物的檢測方法包括如下鑒別方法和/或含量測定中的一種或幾種Α、丹參薄層鑒別取本發明藥物組合物制劑，加甲醇100ml，靜置過夜，超聲處理30_50分鐘，取甲醇提取液，蒸干，加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；另取丹參酮II A對照品，加甲醇制成每 Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5 μ 1，對照品溶液2 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以15-22 1的甲苯-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；B、胡椒和蓽茇薄層鑒別取本發明藥物組合物制劑，加甲醇100ml，靜置過夜，超聲處理30_50分鐘，取甲醇提取液，蒸干，加甲醇Iml使溶解，水浴蒸干，殘渣加醋酸20ml，分次攪拌溶解，濾過，合并醋酸液，用三氯甲烷振搖提取2-3次，每次10-20ml，合并三氯甲烷液，水浴蒸干，殘渣加無水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取胡椒堿對照品，加無水乙醇制成每Iml含^ig的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5 μ 1，對照品溶液2 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以5-10 1-3 1的甲苯-乙酸乙酯-丙酮為展開劑，展開， 取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C烘至斑點顯色清晰，置365nm紫外光燈下檢視； 供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；C、藁本薄層鑒別取本發明藥物組合物制劑，置圓底燒瓶中，加水適量，照揮發油測定法測定，自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢出流入燒瓶為止，再加入乙酸乙酯ani，連接回流冷凝管，加熱回流30-50分鐘，冷卻，分取乙酸乙酯層，作為供試品溶液；取藁本對照藥材2g，置圓底燒瓶中，加水適量，照揮發油測定法測定；自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢出流入燒瓶為止，再加入乙酸乙酯anl，連接回流冷凝管，加熱回流30-50分鐘，冷卻，分取乙酸乙酯層，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10 μ 1和對照藥材溶液 1 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以沸程為30°c-60°c的石油醚-丙酮為90-100 1-10 為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的主斑點；D、冰片、樟腦氣相色譜鑒別取本發明藥物組合物制劑，置圓底燒瓶中，加水適量，照揮發油測定法測定；自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢出流入燒瓶為止，再加入乙酸乙酯ani，連接回流冷凝管，加熱回流30-50分鐘，冷卻，分取乙酸乙酯層，作為供試品溶液；另取冰片、樟腦對照品， 分別用乙酸乙酯制成每Iml含IOmg的溶液，作為對照品溶液；照氣相色譜法試驗，聚乙二醇 PEG-20M為固定相的毛細管柱，毛細管柱柱長30m，內徑0. 25mm,膜厚度0. 25 μ m,柱溫為程序升溫初始100°C，以每分鐘5°C升至150°C，保持5分鐘；分別吸取對照品溶液與供試品溶液適量，注入氣相色譜儀，供試品色譜中應呈現與對照品保留時間相同的色譜峰；
E、含量測定照高效液相色譜法測定色譜條件與系統適應性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水 (72 28)為流動相，檢測波長為458nm，理論板數按丹參酮II A峰計應不低于2000 ；對照品溶液的制備取丹參酮IIA對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含 IOyg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本發明藥物組合物制劑，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流0. 5-1. 5小時，冷卻，稱重，用甲醇補足損失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。本發明還進一步提供上述中藥物組合物在制備用于治療骨性關節病藥物中的應用。本發明組合物的保護范圍不應該僅僅理解為上述組方的組成及配比，根據下述組方原理的加減替換的等同改變均應落入本發明的保護范圍。本發明組合物選用丹參以“通”為君藥，是針對了痹證經脈瘀滯閉阻不通的主要病機；花椒、蓽茇、白胡椒、山柰、高良姜散寒濕之邪，破郁滯之氣，為臣藥；川牛膝散瘀血、補肝腎，主治腰膝骨痛，四肢拘攣、痿痹；藁本治風濕痹痛；樟腦通竅止痛；伸筋草舒筋活絡、祛風除濕；上述四味，均為外用治療風濕痹痛的專藥，四者共為佐藥；冰片為使藥。本發明藥物組合物對骨性關節炎患者的關節疼痛、關節壓痛、關節僵硬、關節腫脹等癥狀有明顯改善作用，其治療骨性關節炎療效確切，且本藥物組合物無刺激性，也無皮膚過敏反應；長期用藥對主要臟器的功能性及器質性方面均無明顯毒性作用。本藥物組合物具有療效確切、使用安全的特點。本發明所提供的中藥組合物的檢測方法，是通過大量具體創造性試驗篩選后得到，鑒別方法中通過對樣品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得鑒別專屬性很好，而且方法經濟適用、結果快速，并且對不同的薄層板都能應用。含量測定方法中通過對樣品、供試品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得含量測定方法可以很有效的對產品進行質量控制， 并且用該方法測定的產品相比其他方法測定的產品在藥效上表現的更為穩定。下面實驗例、實施例均用于進一步說明但不作為本發明范圍的限制。下述實驗中丹參通絡貼膏為實施例1方法制備。實驗例1 藥效學研究1. 1實驗材料藥品與試劑本發明藥物組合物制劑，原料藥組成丹參200g、蓽茇100g、川牛膝IOOg胡椒 100g、花椒100g、藁本100g、伸筋草100g、山柰20g、高良姜20g、樟腦40g、冰片30g ；上述十一味藥，取丹參、蓽茇、川牛膝、胡椒、花椒、藁本、伸筋草、山柰、高良姜九味粉碎成粗粉， 用6倍量85%乙醇作溶劑，浸漬M小時后，以每kg每分鐘2ml的速度緩緩滲漉，收集滲漉液，減壓回收乙醇至相對密度為1.08 1. 12(60°C測定)的清膏，冷卻后加入樟腦、冰片，混勻，得本發明藥物組合物制劑，每ml含生藥(原料藥材)6. 17g。地塞米松磷酸鈉注射液，5mg/ml (支)，江蘇恒瑞醫藥股份有限公司生產，批號 0006沈。Freimd's完全佐劑，中國科學院上海生物化學研究所上海西巴斯生物技術開發有限公司生產，批號020618。動物SD大鼠，雄性，清潔級，體重200_240g，由浙江省實驗動物中心提供，動物合格證浙醫動字第20012001號。1. 2實驗方法SD大鼠70只，雄性，體重200_230g，其中10只留作空白對照，余60只大鼠左側足底碘酒消毒后，足跖皮內注射Freimd’ s完全左劑50 μ 1致炎，繼續常規飼養。在致炎后第 16天用自制的測量尺測定致炎足及對側足的足踝周徑，并觀察記錄繼發病變情況，如尾部炎癥結節數、前足趾和耳部紅腫等，按5級評分法評價前足紅腫程度(0分無紅腫；1分小趾關節紅腫；2分趾關節和足趾腫脹；3分踝關節以下足腫脹；4分包括踝關節在內全部足爪腫脹)。根據大鼠體重和各種炎癥表現嚴重程度搭配，分成5組，每組12只。在致炎后第16天完成測量后開始給藥。給藥方法取上述本發明藥物組合物制劑用橡膠、氧化鋅等制成的基質稀釋到相應濃度，高、中、低劑量組分別為3. 0、1. 5和0. 75g/kg，按每IOOg體重0. Iml滴加在藥棉上， 外加紗布包敷于致炎足，保持6小時后拆去，并用濕紗布擦去殘留藥物，防止大鼠舔食。每天同法給藥1次；模型對照組以相同體積的基質代替；陽性對照組用地塞米松磷酸鈉注射液lmg/kg肌肉注射，隔天1次。每2天上法測量和觀察大鼠的炎癥反應。在致炎后第M 天(最后1次給藥后約M小時)測定各指標后脫白處死，解剖取胸腺和脾臟稱重，計算臟器系數。以致炎前所測足踝周徑為基數計算腫脹度和腫脹抑制率
(治療后足踝周徑一致炎前足踝周徑) 腫脹度=X 100%
致炎前足踝周徑
(模型組腫脹度一給藥組腫脹度) 腫脹抑制率=X 100%
模型對照組腫脹度1. 3統計方法所有計量數據均表示為X士SD，并進行組間t檢驗，和模型對照組相比ZP < 0. 05， **P < 0. 01。1. 4實驗結果1. 4. 1對佐劑性關節炎大鼠體重的影響見表1，和非致炎組大鼠相比，福氏完全佐劑致炎后大鼠體重增長速度明顯下降。
和模型組大鼠相比，皮質激素則引起大鼠體重增長明顯下降，而本發明藥物組合物外用對
體重增長則無明顯影響。大鼠足踝周徑隨體重增長相應增加，本發明藥物組合物不引起大
鼠體重下降，可以保證足踝周徑的降低能客觀反映藥物的功效。
表1本發明藥物組合物對佐劑性繼發性關節炎大鼠體重的影響(g)
權利要求
1.一種外用治療痹證的中藥物組合物，其特征在于該組合物的原料藥組成為 丹參150-250重量份蓽茇75-125重量份川牛膝75-125重量份胡椒75-125重量份花椒75-125重量份藁本75-125重量份伸筋草75-125重量份山柰10-30重量份高良姜10-30重量份樟腦 25-50重量份冰片15-45重量份。
2.如權利要求1所述的中藥物組合物，其特征在于該組合物的原料藥組成為 丹參180-220重量份蓽茇90-110重量份川牛膝90-110重量份胡椒90-110重量份花椒90-110重量份藁本90-110重量份伸筋草90-110重量份山柰15-25重量份高良姜15-25重量份樟腦 30-45重量份冰片20-40重量份。
3.如權利要求1所述的中藥物組合物，其特征在于該組合物的原料藥組成為 丹參190-220重量份蓽茇95-105重量份川牛膝95-105重量份胡椒95-105重量份花椒95-105重量份藁本95-105重量份伸筋草95-105重量份山柰 17-23重量份高良姜17-23重量份樟腦 35-43重量份冰片25-35重量份。
4.如權利要求1所述的中藥物組合物，其特征在于該組合物的原料藥組成為 丹參 200重量份蓽茇 100重量份川牛膝100重量份胡椒 100重量份花椒 100重量份藁本 100重量份伸筋草100重量份山柰 20重量份高良姜 20重量份樟腦 40重量份冰片 30重量份。
5.如權利要求1-4任一所述的中藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟步驟A、取丹參、蓽茇、川牛膝、胡椒、花椒、藁本、伸筋草、山柰、高良姜九味粉碎成粗粉， 用乙醇提取；步驟B、收集提取液，減壓回收乙醇至清膏；步驟C、清膏冷卻后加入樟腦、冰片，混勻；加入外用貼膏劑常規輔料，按照外用貼膏劑常規工藝，制成臨床或藥劑學上可接受的外用貼膏劑劑型。
6.如權利要求5所述的方法，其特征在于該方法步驟A中粗粉用乙醇滲漉提取。
7.如權利要求6所述的方法，其特征在于該方法步驟A中粗粉用75-95%乙醇作溶劑浸漬18-36小時后滲漉。
8.如權利要求7所述的方法，其特征在于所述外用貼膏劑劑型為軟膏劑、膏藥、橡膠膏劑。
9.如權利要求1-4任一所述的中藥物組合物在制備治療骨性關節病藥物中的應用。
10.如權利要求1-4任一所述的中藥物組合物的檢測方法，其特征在于檢測方法包括如下鑒別方法和/或含量測定中的一種或幾種A、丹參薄層鑒別取本發明藥物組合物制劑，加甲醇靜置過夜，超聲處理，取甲醇提取液，蒸干，加甲醇使其溶解，作為供試品溶液；另取丹參酮II A對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；吸取上述供試品溶液5 μ 1，對照品溶液2 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上， 以15-22 1的甲苯-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；B、胡椒和蓽茇薄層鑒別取本發明藥物組合物制劑，加甲醇靜置過夜，超聲處理，取甲醇提取液，水浴蒸干，殘渣加醋酸，分次攪拌溶解，濾過，合并醋酸液，用三氯甲烷振搖提取2-3次，合并三氯甲烷液， 水浴蒸干，殘渣加無水乙醇使溶解，作為供試品溶液；另取胡椒堿對照品，加無水乙醇制成每Iml含^ig的溶液，作為對照品溶液；吸取上述供試品溶液5μ 1，對照品溶液2μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以5-10 1-3 1的甲苯-乙酸乙酯-丙酮為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C烘至斑點顯色清晰，置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；C、藁本薄層鑒別取本發明藥物組合物制劑，置圓底燒瓶中，加水適量，照揮發油測定法測定；自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢出流入燒瓶為止，再加入乙酸乙酯，連接回流冷凝管，加熱回流，冷卻，分取乙酸乙酯層，制成供試品溶液；另取藁本對照藥材2g，置圓底燒瓶中，加水適量，照揮發油測定法測定；自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢出流入燒瓶為止，再加入乙酸乙酯anl，連接回流冷凝管，加熱回流30-50分鐘，冷卻，分取乙酸乙酯層，作為對照藥材溶液；吸取供試品溶液10 μ 1和對照藥材溶液1 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上， 以沸程為30°C-60°C的石油醚-丙酮90-100 1_10為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm 紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的主斑點；D、冰片、樟腦氣相色譜鑒別取本發明藥物組合物制劑，置圓底燒瓶中，加水適量，照揮發油測定法測定；自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢出流入燒瓶為止，再加入乙酸乙酯，連接回流冷凝管，加熱回流，冷卻，分取乙酸乙酯層，作為供試品溶液；另取冰片、樟腦對照品，分別用乙酸乙酯制成每Iml含IOmg的溶液，作為對照品溶液；照氣相色譜法試驗，聚乙二醇PEG-20M為固定相的毛細管柱，毛細管柱柱長30m，內徑0. 25mm,膜厚度0. 25 μ m,柱溫為程序升溫初始 IOO0C，以每分鐘5°C升至150°C，保持5分鐘；分別吸取對照品溶液與供試品溶液適量，注入氣相色譜儀，供試品色譜中應呈現與對照品保留時間相同的色譜峰；E、照高效液相色譜法含量測定色譜條件與系統適應性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水為 60-90 20-40為流動相，檢測波長為400-500nm，理論板數按丹參酮II A峰計應不低于 2000 ；對照品溶液的制備取丹參酮II A對照品，加甲醇制成每Iml含10 μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備取本發明藥物組合物制劑，加入甲醇，稱定重量，加熱回流，冷卻， 稱重，用甲醇補足損失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μ 1，注入液相色譜儀，測定。
全文摘要
本發明公開一種外用治療痹證的中藥物組合物及其制備方法和檢測方法；本發明中藥物組合物是由丹參、蓽茇、川牛膝、胡椒、花椒、藁本、伸筋草、山柰、高良姜、樟腦、冰片組成，本發明中藥物組合物對骨性關節炎患者的關節疼痛、關節壓痛、關節僵硬、關節腫脹等癥狀有明顯改善作用，療效確切，本發明還提供該組合物制劑的檢測方法，該檢測方法專屬性強，試驗穩定，經濟適用，結果快速。
文檔編號A61K9/06GK102293977SQ201110271100
公開日2011年12月28日 申請日期2011年9月14日 優先權日2011年9月14日
發明者李詠水, 陳洛怡 申請人:杭州江南世家藥業有限公司