專利名稱：四連蛋白-載脂蛋白a-i、含有它的脂質(zhì)顆粒及它的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于脂蛋白和脂質(zhì)顆粒領(lǐng)域。在本文中報(bào)道了包含載脂蛋白、磷脂酰膽堿和脂質(zhì)的脂質(zhì)顆粒、以及四連蛋白-載脂蛋白A-1及其用途。
背景技術(shù)：
血漿脂蛋白是在血液中進(jìn)行脂質(zhì)運(yùn)輸和代謝的可溶性蛋白-脂質(zhì)復(fù)合物。基于它們的密度、大小、化學(xué)組成和功能，將脂蛋白分成幾大類。在它們中，高密度脂蛋白(HDL)顆粒(可替換地表示為高密度脂質(zhì)顆粒)由幾個(gè)亞類組成，所述亞類的平均分子量在ISOkDa至360kDa之間變化。它們的平均脂質(zhì)和蛋白含量各自為50重量％。磷脂酰膽堿(PC)占總脂質(zhì)的38%，其次是膽固醇酯和少量其它的極性和非極性脂質(zhì)，包括游離的膽固醇。主要蛋白組分是載脂蛋白A-1 (Apo A-1)，其占人HDL中的總蛋白重量的約60%。HDL顆粒和它的主要多肽載脂蛋白A-1參與膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)(RCT)。其中，載脂蛋白A-1增加膽固醇從細(xì)胞(例如從血管壁細(xì)胞)的流出、脂質(zhì)的結(jié)合和卵磷脂膽固醇-乙酰基-轉(zhuǎn)移酶的活化，并由此增加肝臟通過血漿流對(duì)膽固醇的消除。這是一個(gè)涉及細(xì)胞膜蛋白ATP-結(jié)合盒-轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-A-1 (ABCA-1)的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)過程。在上個(gè)世紀(jì)七十年代晚期和八十年代早期，已經(jīng)鑒別出載脂蛋白A-1和基于載脂蛋白的治療劑(例如重構(gòu)的HDL顆粒)。就含有載脂蛋白A-1-Milano的脂質(zhì)顆粒而言，可以展示出臨床證據(jù)(是指動(dòng)脈硬化患者中顯著的斑塊減少)。根據(jù)載脂蛋白A-1分子的一種天然存在的突變體，設(shè)計(jì)出載脂蛋白Α-Ι-Milano，即野生型載脂蛋白A-1的一種二聚體形式。通過用半胱氨酸替代氨基酸殘基173 (精氨酸)從而允許形成二硫鍵，實(shí)現(xiàn)二聚體形成。

在WO 2009/131704中報(bào)道了適用于螯合膽固醇和其它分子的納米結(jié)構(gòu)，所述納米結(jié)構(gòu)包含含有無機(jī)材料的核心。在WO 2006/125304中報(bào)道了用于治療或預(yù)防冠狀動(dòng)脈疾病的藥物組合物。在US 2002/0142953中報(bào)道了編碼與脂質(zhì)代謝和心血管疾病有關(guān)的載脂蛋白的組合物。在W02005/084642中報(bào)道了脫輔蛋白-共螯合物(cochelate)組合物。在W02009/036460中報(bào)道了修飾的人載脂蛋白A-1多肽及其用途。在WO 2008/017906中報(bào)道了人載脂蛋白A-1蛋白突變蛋白的二聚體和/或寡聚體形式的植物生產(chǎn)。在WO2007/137400中報(bào)道了用于治療瓣膜狹窄的方法和化合物。在WO 2006/100567中報(bào)道了帶電荷的脂蛋白復(fù)合物和它們的用途。在US 2002/0156007中報(bào)道了載脂蛋白類似物。在US 2010/0028995中報(bào)道了四連蛋白三聚化多妝。Graversen, J.H.,等人在 J.Cardiovascular Pharmacol.(51 (2008) 170-177)中報(bào)道稱，載脂蛋白A-1的三聚化會(huì)延遲血漿清除并保持抗-動(dòng)脈粥樣硬化性質(zhì)。Sirtori, C.R.,等人(Curr.Med.Chem.1mmunol.Endocrine Metabol.Agents5 (2005) 321-333)報(bào)道了高密度脂蛋白施用，即用于治療心血管疾病的一種新的治療方式。在WO 03/097696中報(bào)道了用于治療缺血性再灌注的方法和組合物。在WO2009/097587中報(bào)道了納米級(jí)結(jié)合的雙層分子、使用方法和生產(chǎn)。在WO 2007/098122中報(bào)道了用于治療黃斑變性和有關(guān)的眼病癥的方法。在WO 02/38609中報(bào)道了載脂蛋白類似物。在WO 2005/041866中報(bào)道了藥物制劑。報(bào)道了用于治療和預(yù)防冠狀動(dòng)脈綜合征的方法和給藥方案。在WO 99/16409中報(bào)道了基因療法，供給載脂蛋白A-1激動(dòng)劑的方法，和它們用于治療血脂異常(dislipidemic)障礙的用途。在WO 2008/106660中報(bào)道了分離的磷脂-蛋白顆粒。在WO 2010/083611中報(bào)道了使用載脂蛋白(APO A-1)模擬肽/磷脂復(fù)合物預(yù)防和治療舒張期功能障礙的方法。在W02008/156873中，報(bào)道了 APO A-1肽模擬物。在WO 2008/094905中報(bào)道了包囊化的HDL模擬肽。在WO 98/56906中報(bào)道了三聚化模塊。

發(fā)明內(nèi)容
作為一個(gè)方面，本文報(bào)道了一種四連蛋白-載脂蛋白A-1，其具有改善的生產(chǎn)性質(zhì)，特別是在培養(yǎng)過程中更少的副產(chǎn)物形成和改善的下游加工性質(zhì)。作為一個(gè)方面，本文還報(bào)道了一種脂質(zhì)顆粒，其包含載脂蛋白、磷脂酰膽堿和其它脂質(zhì)，諸如磷脂、溶血磷脂、半乳糖腦苷脂、神經(jīng)節(jié)苷脂、腦苷脂、甘油酯、脂肪酸、甘油三酯或類固醇脂質(zhì)、膽固醇、膽固醇酯、或其類似物或衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒包含僅一類載脂蛋白。 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒由一種載脂蛋白、磷脂酰膽堿、其它脂質(zhì)和洗滌劑組成。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述其它脂質(zhì)是磷脂酰膽堿，其中兩種磷脂酰膽堿的差別在于一個(gè)或兩個(gè)被酯化至磷脂酰膽堿的磷酸甘油主鏈上的羧酸部分或羧酸部分衍生物。
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在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述載脂蛋白是人載脂蛋白A，在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述載脂蛋白是與多聚化結(jié)構(gòu)域綴合的人載脂蛋白，在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述載脂蛋白是四連蛋白-載脂蛋白A-1。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述載脂蛋白選自具有選自SEQ ID NO:0U02、06、66和67的氨基酸序列的載脂蛋白，或是與所述選擇的序列具有至少70%序列同一性的它們的變體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒包含a)載脂蛋白，b)磷脂酰膽堿，和c)其它脂質(zhì)，其中當(dāng)所述脂質(zhì)是磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰絲氨酸、鞘氨醇1-磷酸、膽酸鹽或二肉豆蘧酰基磷脂酰甘油時(shí)，所述載脂蛋白是四連蛋白-載脂蛋白A-1，和/或其中當(dāng)所述脂質(zhì)是小烷基鏈磷脂、磷脂酰甘油、磷脂酰絲氨酸、磷脂酸、鞘磷脂、鞘脂、神經(jīng)節(jié)苷脂、腦苷脂、溶血卵磷脂、腦磷脂、心磷脂、雙十六烷基磷酸(dicetylphosphate)或膽固醇時(shí),所述載脂蛋白不是載脂蛋白A_I Milano。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒包含a)載脂蛋白，b)磷脂酰膽堿，和c)其它脂質(zhì)，
其中當(dāng)所述脂質(zhì)是磷脂酰乙醇胺、鞘氨醇1-磷酸或膽酸鹽時(shí)，所述載脂蛋白是四連蛋白-載脂蛋白A-1，和/或其中當(dāng)所述脂質(zhì)是小烷基鏈磷脂、鞘磷脂、鞘脂、神經(jīng)節(jié)苷脂、腦苷脂、溶血卵磷月旨、腦磷脂、心磷脂、雙十六烷基磷酸或膽固醇時(shí)，所述載脂蛋白不是載脂蛋白A-1 Milano。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述其它脂質(zhì)是除了磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油和磷脂酸以外的任意脂質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述其它脂質(zhì)是第二種磷脂酰膽堿。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述磷脂酰膽堿是棕櫚酰油酰磷脂酰膽堿(POPC)，且所述第二種磷脂酰膽堿是二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述磷脂酰膽堿與所述脂質(zhì)的摩爾比是在99:1至1: 99之間。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述磷脂酰膽堿與所述脂質(zhì)的摩爾比是在99:1至10: 90之間。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述磷脂酰膽堿與所述脂質(zhì)的摩爾比是在99:1至25: 75之間。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述載脂蛋白與所述磷脂酰膽堿和所述脂質(zhì)非共價(jià)地結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，POPC與DPPC的摩爾比是在99: I至1: 99之間。在另一個(gè)實(shí)施方案中，POPC與DPPC的摩爾比是在99: I至10: 90之間。在另一個(gè)實(shí)施方案中，POPC與DPPC的摩爾比是在99: I至25: 75之間。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述載脂蛋白與POPC和DPPC非共價(jià)地結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述載脂蛋白是包含3個(gè)載脂蛋白單體的多聚體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述多聚體包含3個(gè)四連蛋白-載脂蛋白A-1單體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒包含小于0.75重量％的洗滌劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述洗滌劑選自基于糖的洗滌劑、基于聚亞氧烷基的洗滌劑、基于膽汁鹽的洗滌劑、合成的洗滌劑和它們的組合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述洗滌劑是膽酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂酰膽堿分子和脂質(zhì)分子的總數(shù)目是在40-120之間，在一個(gè)實(shí)施方案中，是在50-110之間，在一個(gè)實(shí)施方案中，是在54-102之間，在一個(gè)實(shí)施方案中，是在60-90之間，在一個(gè)實(shí)施方案中，是在65-70之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂酰膽堿分子和脂質(zhì)分子的總數(shù)目是在60-90之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂酰膽堿分子和脂質(zhì)分子的總數(shù)目是在60-88之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂酰膽堿分子和脂質(zhì)分子的總數(shù)目是在62-80之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂酰膽堿分子和脂質(zhì)分子的總數(shù)目是在64-70之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂酰膽堿分子和脂質(zhì)分子的總數(shù)目是約66。在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的POPC和DPPC分子的總數(shù)目是在40-115之間，在另一個(gè)實(shí)施方案中，是在50-110之間，在另一個(gè)實(shí)施方案中，是在54-102 之間。
在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的POPC和DPPC分子的總數(shù)目是在60-90之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的POPC和DPPC分子的總數(shù)目是在60-88之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的POPC和DPPC分子的總數(shù)目是在62-80之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的POPC和DPPC分子的總數(shù)目是在64-70之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的POPC和DPPC分子的總數(shù)目是約66。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒能夠結(jié)合選自由以下組成的組的受體:cubilin, B類I型清除受體(SR-BI)、ATP-結(jié)合盒I (ABCA-1)、卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)、膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)或磷脂轉(zhuǎn)移蛋白(PLTP)。本文報(bào)道的另一個(gè)方面是一種藥物組合物，其包含:本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，用作藥物的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白用于生產(chǎn)藥物的用途。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物-用于具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征的患者的二級(jí)預(yù)防，或者-用于預(yù)防或治療動(dòng)脈粥樣硬化，其中包含的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白的量足以在受試者中誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定(pacification),或者-用于誘導(dǎo) 膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者-用于清除/溶解/穩(wěn)定受試者血管中的粥樣硬化斑塊，或者用于使膽固醇從受試者的動(dòng)脈壁重新分配至肝臟，或者-用于預(yù)防或治療受試者的瓣膜狹窄，或者-用于增加受試者的HDL顆粒的數(shù)目，或者-用于啟動(dòng)受試者中的膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，或者-用于除去內(nèi)毒素，或者-用于預(yù)防膿毒性休克-用于治療心絞痛，或者-用于治療心肌梗死，或者-用于治療不穩(wěn)定型心絞痛，或者-用于治療動(dòng)脈狹窄,諸如外周動(dòng)脈疾病(PAD)、頸動(dòng)脈狹窄、腦動(dòng)脈狹窄或冠狀動(dòng)脈狹窄，或者-用于治療血管性癡呆，或者-用于治療一過性黑朦。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白在生產(chǎn)藥物中的用途。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，用于生產(chǎn)藥物的方法，所述藥物-用于具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征的患者的二級(jí)預(yù)防，或者-用于預(yù)防或治療動(dòng)脈粥樣硬化，其中包含的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白的量足以在受試者中誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者-用于誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者-用于清除/溶解/穩(wěn)定受試者血管中的粥樣硬化斑塊，或者用于使膽固醇從受試者的動(dòng)脈壁重新分配至肝臟，或者-用于預(yù)防或治療受試者的瓣膜狹窄，或者-用于增加受試者的HDL顆粒的數(shù)目，或者-用于啟動(dòng)受試者中的膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，或者-用于除去內(nèi)毒素，或者-用于預(yù)防膿毒性休克-用于治療心絞痛，或者-用于治療心肌梗死，或者-用于治療不穩(wěn)定型心絞痛，或者-用于治療動(dòng)脈狹窄，諸如外周動(dòng)脈疾病(PAD)、頸動(dòng)脈狹窄、腦動(dòng)脈狹窄或冠狀動(dòng)脈狹窄，或者-用于治療血管性癡呆，或者`-用于治療一過性黑朦。本文報(bào)道的一個(gè)方面是一種方法，所述方法用于-具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征的患者的二級(jí)預(yù)防，或者-預(yù)防或治療動(dòng)脈粥樣硬化，其中包含的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白的量足以在受試者中誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者-用于誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者-用于清除/溶解/穩(wěn)定受試者血管中的粥樣硬化斑塊，或者用于使膽固醇從受試者的動(dòng)脈壁重新分配至肝臟，或者-用于預(yù)防或治療受試者的瓣膜狹窄，或者-用于增加受試者的HDL顆粒的數(shù)目，或者
-用于啟動(dòng)受試者中的膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，或者-用于除去內(nèi)毒素，或者-用于預(yù)防膿毒性休克-用于治療心絞痛，或者-用于治療心肌梗死，或者-用于治療不穩(wěn)定型心絞痛，或者-用于治療動(dòng)脈狹窄，諸如外周動(dòng)脈疾病(PAD)、頸動(dòng)脈狹窄、腦動(dòng)脈狹窄或冠狀動(dòng)脈狹窄，或者-用于治療血管性癡呆，或者-用于治療一過性黑朦。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，用于治療下述病癥的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白:
-急性冠狀動(dòng)脈綜合征,或者-動(dòng)脈粥樣硬化，或者-受試者血管中的粥樣硬化斑塊，或者-受試者的瓣膜狹窄，或者-膿毒性休克，或者-心絞痛，或者-心肌梗死，或者-不穩(wěn)定型心絞痛，或者-動(dòng)脈狹窄，或者-外周動(dòng)脈疾病(PAD),或者-頸動(dòng)脈狹窄，或者-腦動(dòng)脈狹窄，或者-冠狀動(dòng)脈狹窄，或者-血管性癡呆，或者-一過性黑朦。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，`用于下述用途的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白:-誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，或者-誘導(dǎo)斑塊平定，或者-清除或溶解或穩(wěn)定粥樣硬化斑塊，或者-使膽固醇從動(dòng)脈壁重新分配至肝臟，或者-增加HDL顆粒的數(shù)目，或者-除去內(nèi)毒素。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種治療個(gè)體的方法，所述個(gè)體具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征、或動(dòng)脈粥樣硬化、或在血管中的粥樣硬化斑塊、或瓣膜狹窄、或膿毒性休克、或心絞痛、或心肌梗死、或不穩(wěn)定型心絞痛、或動(dòng)脈狹窄、或外周動(dòng)脈疾病(PAD)、或頸動(dòng)脈狹窄、或腦動(dòng)脈狹窄、或冠狀動(dòng)脈狹窄、或血管性癡呆、或一過性黑朦，所述方法包括:給所述個(gè)體施用有效量的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種在個(gè)體中誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)、或誘導(dǎo)斑塊平定、或清除或溶解或穩(wěn)定粥樣硬化斑塊、或使膽固醇從動(dòng)脈壁重新分配至肝臟、或增加HDL顆粒的數(shù)目、或除去內(nèi)毒素的方法，所述方法包括:給所述個(gè)體施用有效量的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白，以誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)、或誘導(dǎo)斑塊平定、或清除或溶解或穩(wěn)定粥樣硬化斑塊、或使膽固醇從動(dòng)脈壁重新分配至肝臟、或增加HDL顆粒的數(shù)目、或除去內(nèi)毒素。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述非正常的脂質(zhì)水平是在體液中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述體液是全血或血清。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述非正常的脂質(zhì)水平是升高的膽固醇水平。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述含有脂質(zhì)的沉積物是在血管中的斑塊。
在一個(gè)實(shí)施方案中,所述疾病是心血管疾病。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種治療疾病或病癥的方法，所述疾病或病癥的特征在于身體部分內(nèi)的非正常的脂質(zhì)水平或含有脂質(zhì)的沉積物，所述方法包括i)給需要治療的受試者或人工系統(tǒng)施用治療有效量的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒，和ii)任選地監(jiān)視受試者的脂質(zhì)水平或含有脂質(zhì)的沉積物的變化。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種用于具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征的患者的二級(jí)預(yù)防的方法，所述方法包括:給有此需要的受試者施用本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種診斷組合物，其包含本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白，其中所述載脂蛋白被標(biāo)記，從而允許檢測(cè)在樣品或受試者中的標(biāo)記的載脂蛋白或脂質(zhì)顆粒。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白用于診斷的用途。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒用于預(yù)防或治療受試者的用途，所述受試者罹患特征在于存在非正常的脂質(zhì)水平或含有脂質(zhì)的沉積物的疾病或病癥。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，編碼本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白的核酸以及包含本文報(bào)道的核酸的細(xì)胞。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，具有SEQ ID N0:01或SEQ ID N0:02或SEQ ID N0:66或SEQ ID NO:67的氨基 酸序列的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或其藥學(xué)上可接受的鹽、或其前藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述四連蛋白-載脂蛋白A-1具有SEQ ID N0:01或SEQ ID NO:02或SEQ ID N0:66或SEQ ID NO:67的氨基酸序列，所述氨基酸序列具有一個(gè)或多個(gè)保守氨基酸改變。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述四連蛋白-載脂蛋白A-1具有SEQ ID NO:01或SEQDI N0:02或SEQ ID NO:66或SEQ ID NO:67的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸被置換、添加或刪除。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種四連蛋白-載脂蛋白A-1，其具有SEQ IDN0:01或SEQID N0:02或SEQ ID NO:66或SEQ ID NO:67的氨基酸序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述氨基酸序列與 SEQ ID NO:01 或 SEQ ID NO:02 或 SEQ ID NO:66 或 SEQ ID NO:67 的氨基酸序列具有至少70%序列同一性。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述四連蛋白-載脂蛋白A-1單體或所述四連蛋白-載脂蛋白A-1三聚體能夠結(jié)合選自由以下組成的組的受體:cubilin、B類I型清除受體(SR-BI)、ATP-結(jié)合盒I (ABCA-1)、卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)、膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)或磷脂轉(zhuǎn)移蛋白(PLTP)。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種包含3個(gè)四連蛋白-載脂蛋白A-1單體的多聚體，其中所述四連蛋白-載脂蛋白A-1單體彼此非共價(jià)地結(jié)合。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，包含SEQ ID NO =OUSEQ ID N0:02或SEQ ID NO:66的氨
基酸序列的融合蛋白、編碼所述融合蛋白的核酸、和包含編碼所述融合蛋白的核酸的質(zhì)粒。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述融合蛋白在N端至C端方向上包含-氨基酸甲硫氨酸(M)，
-干擾素序列片段，其具有氨基酸序列CDLPQTHSL(SEQID NO:55)，-GS 接頭，-六組氨酸標(biāo)簽，其具有氨基酸序列HHHHHH(SEQ ID NO:56)，-GS 接頭，-1gA蛋白酶切割位點(diǎn)，其具有氨基酸序列VVAPPAP (SEQ ID NO:60)，和-四連蛋白-載脂蛋白A-1，其具有SEQID NO:02的氨基酸序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述融合蛋白具有SEQ ID NO:57的氨基酸序列。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種細(xì)胞，其包含編碼本文報(bào)道的融合蛋白的核酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述細(xì)胞選自:大腸桿菌菌株，諸如CSPZ-2、K12菌株294 (ATCC31446)、B, X1776 (ATCC31537), W3110 (ATCC273325), BL2U RM_82、SCS_110、G、XL_1_F_、SE—13009、LA_5709、C600、CSH_1、TG_1、UT400 和 UT5600。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種脂質(zhì)顆粒，其包含a)四連蛋白-載脂蛋白A-1，其具有選自氨基酸序列SEQ ID NO:01、SEQ ID NO:02、SEQ ID NO:66 和 SEQ ID NO:67 的氨基酸序列，b)磷脂酰膽堿，和c)脂質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂`質(zhì)選自磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰絲氨酸、鞘氨醇1-磷酸、膽酸鹽或二肉豆蘧酰基磷脂酰甘油。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)是除了磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油和磷脂酸以外的任意脂質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒包含a)四連蛋白-載脂蛋白A-1，其具有選自氨基酸序列SEQ ID NO:01、SEQ ID NO:
02、SEQ ID NO:66 和 SEQ ID NO:67 的氨基酸序列，b)第一種磷脂酰膽堿，和c)第二種磷脂酰膽堿。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述第一種磷脂酰膽堿是P0PC，且所述第二種磷脂酰膽堿是DPPC0在一個(gè)實(shí)施方案中，用于生產(chǎn)所述脂質(zhì)顆粒的所述第一種磷脂酰膽堿與所述第二種磷脂酰膽堿的摩爾比是在99: I至1: 99之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于生產(chǎn)所述脂質(zhì)顆粒的所述第一種磷脂酰膽堿與所述第二種磷脂酰膽堿的摩爾比是在99:1至10: 90之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于生產(chǎn)所述脂質(zhì)顆粒的所述第一種磷脂酰膽堿與所述第二種磷脂酰膽堿的摩爾比是在99:1至25: 75之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于生產(chǎn)所述脂質(zhì)顆粒的所述第一種磷脂酰膽堿與所述第二種磷脂酰膽堿的摩爾比是在99:1至50: 50之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于生產(chǎn)所述脂質(zhì)顆粒的所述第一種磷脂酰膽堿與所述第二種磷脂酰膽堿的摩爾比是約75: 25。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述第一種磷脂酰膽堿是P0PC，且所述第二種磷脂酰膽堿是DPPC0在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的所述第一種磷脂酰膽堿與所述第二種磷脂酰膽堿的摩爾比是在99:1至1: 99之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的所述第一種磷脂酰膽堿與所述第二種磷脂酰膽堿的摩爾比是在99:1至10: 90之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的所述第一種磷脂酰膽堿與所述第二種磷脂酰膽堿的摩爾比是在99:1至25: 75之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的所述第一種磷脂酰膽堿與所述第二種磷脂酰膽堿的摩爾比是在99: I至50: 50之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的所述第一種磷脂酰膽堿與所述第二種磷脂酰膽堿的摩爾比是約75: 25。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述載脂蛋白與所述第一種磷脂酰膽堿和所述脂質(zhì)非共價(jià)地結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述四連蛋白-載脂蛋白A-1與所述第一種磷脂酰膽堿和所述第二種磷脂酰膽堿非共價(jià)地結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述四連蛋白-載脂蛋白A-1是包含3個(gè)四連蛋白-載脂蛋白A-1單體的多聚體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒包含小于0.75重量％的洗滌劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述洗滌劑選自基于糖的洗滌劑、基于聚亞氧烷基的洗滌劑、基于膽汁鹽的洗滌劑、合成的洗滌劑和它們的組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述洗滌劑是膽酸或兩性洗滌劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的總數(shù)目是在40-120之間，在另一個(gè)實(shí)施方案中，是在50-110之間，在另一個(gè)實(shí)施方案中，是在54-102之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述磷脂是磷脂酰膽堿。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種藥物組合物，其包含本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，用作藥物的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物 -用于預(yù)防繼發(fā)性主要不良心血管事件(MACE)，-用于具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征的患者的二級(jí)預(yù)防，或者-用于預(yù)防或治療動(dòng)脈粥樣硬化，其中包含的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白的量足以在受試者中誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者-用于誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者-用于清除/溶解/穩(wěn)定受試者血管中的粥樣硬化斑塊，或者用于使膽固醇從受試者的動(dòng)脈壁重新分配至肝臟，或者-用于預(yù)防或治療受試者的瓣膜狹窄，或者-用于增加受試者的HDL顆粒的數(shù)目，或者-用于啟動(dòng)受試者中的膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，或者-用于除去內(nèi)毒素，或者-用于預(yù)防膿毒性休克-用于治療心絞痛，或者-用于治療心肌梗死，或者-用于治療不穩(wěn)定型心絞痛，或者-用于治療動(dòng)脈狹窄，諸如外周動(dòng)脈疾病(PAD)、頸動(dòng)脈狹窄、腦動(dòng)脈狹窄或冠狀動(dòng)脈狹窄，或者
-用于治療血管性癡呆,或者-用于治療一過性黑朦。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白在藥物生產(chǎn)中的用途。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種用于生產(chǎn)藥物的方法，所述藥物-用于具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征的患者的二級(jí)預(yù)防，或者-用于預(yù)防繼發(fā)性主要不良心血管事件(MACE)，或者-用于預(yù)防或治療動(dòng)脈粥樣硬化，其中包含的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白的量足以在受試者中誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者-用于誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者-用于清除/溶解/穩(wěn)定受試者血管中的粥樣硬化斑塊，或者用于使膽固醇從受試者的動(dòng)脈壁重新分配至肝臟，或者-用于預(yù)防或治療受試者的瓣膜狹窄，或者-用于增加受試者的HDL顆粒的數(shù)目，或者-用于啟動(dòng)受試者中的膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，或者-用于除去內(nèi)毒素，或者
`
-用于預(yù)防膿毒性休克-用于治療心絞痛，或者-用于治療心肌梗死，或者-用于治療不穩(wěn)定型心絞痛，或者-用于治療動(dòng)脈狹窄，諸如外周動(dòng)脈疾病(PAD)、頸動(dòng)脈狹窄、腦動(dòng)脈狹窄或冠狀動(dòng)脈狹窄，或者-用于治療血管性癡呆，或者-用于治療一過性黑朦。本文報(bào)道的一個(gè)方面是一種方法，所述方法用于-具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征的患者的二級(jí)預(yù)防,或者-用于預(yù)防繼發(fā)性主要不良心血管事件(MACE)，或者-預(yù)防或治療動(dòng)脈粥樣硬化，其中包含的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白的量足以在受試者中誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者-用于誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者-用于清除/溶解/穩(wěn)定受試者血管中的粥樣硬化斑塊，或者用于使膽固醇從受試者的動(dòng)脈壁重新分配至肝臟，或者-用于預(yù)防或治療受試者的瓣膜狹窄，或者-用于增加受試者的HDL顆粒的數(shù)目，或者-用于啟動(dòng)受試者中的膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，或者-用于除去內(nèi)毒素,或者-用于預(yù)防膿毒性休克
-用于治療心絞痛，或者-用于治療心肌梗死，或者-用于治療不穩(wěn)定型心絞痛，或者-用于治療動(dòng)脈狹窄，諸如外周動(dòng)脈疾病(PAD)、頸動(dòng)脈狹窄、腦動(dòng)脈狹窄或冠狀動(dòng)脈狹窄，或者-用于治療血管性癡呆,或者-用于治療一過性黑朦。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，用于治療或預(yù)防下述病癥的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白:-急性冠狀動(dòng)脈綜合征,或者-繼發(fā)性主要不良心血管事件(MACE)，或者-動(dòng)脈粥樣硬化，或者-受試者血管中的粥樣硬化斑塊，或者-受試者的瓣膜狹窄，或者-膿毒性休克，或者-心絞痛，或者`-心肌梗死，或者-不穩(wěn)定型心絞痛，或者-動(dòng)脈狹窄，或者-外周動(dòng)脈疾病(PAD),或者-頸動(dòng)脈狹窄，或者-腦動(dòng)脈狹窄，或者-冠狀動(dòng)脈狹窄，或者-血管性癡呆，或者-一過性黑朦。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，用于下述用途的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的載脂蛋白A-1多聚體、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、或本文報(bào)道的融合蛋白:-誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，或者-誘導(dǎo)斑塊平定，或者-清除或溶解或穩(wěn)定粥樣硬化斑塊，或者-使膽固醇從動(dòng)脈壁重新分配至肝臟，或者-增加HDL顆粒的數(shù)目，或者-除去內(nèi)毒素。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，在干預(yù)后應(yīng)用時(shí)用于預(yù)防由于急性心血管事件被送至急診室(ER)的患者的繼發(fā)性主要不良心血管事件(MACE)的方法，或用于治療個(gè)體的方法，所述個(gè)體具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征、或具有動(dòng)脈粥樣硬化、或具有在血管中的粥樣硬化斑塊、或具有瓣膜狹窄、或具有膿毒性休克、或具有心絞痛、或具有心肌梗死、或具有不穩(wěn)定型心絞痛、或具有動(dòng)脈狹窄、或具有外周動(dòng)脈疾病(PAD)、或具有頸動(dòng)脈狹窄、或具有腦動(dòng)脈狹窄、或具有冠狀動(dòng)脈狹窄、或具有血管性癡呆、或具有一過性黑朦，所述方法包括:給所述個(gè)體施用有效量的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的多聚體、或本文報(bào)道的融合蛋白、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-1。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種在個(gè)體中誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)、或誘導(dǎo)斑塊平定、或清除或溶解或穩(wěn)定粥樣硬化斑塊、或使膽固醇從動(dòng)脈壁重新分配至肝臟、或增加HDL顆粒的數(shù)目、或除去內(nèi)毒素的方法，所述方法包括:給所述個(gè)體施用有效量的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的多聚體、或本文報(bào)道的融合蛋白、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-1，以誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)、或誘導(dǎo)斑塊平定、或清除或溶解或穩(wěn)定粥樣硬化斑塊、或使膽固醇從動(dòng)脈壁重新分配至肝臟、或增加HDL顆粒的數(shù)目、或除去內(nèi)毒素。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述非正常的脂質(zhì)水平是在體液中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述體液是全血或血清。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述非正常的脂質(zhì)水平是升高的膽固醇水平。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述含有脂質(zhì)的沉積物是在血管中的斑塊。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾病是心血管疾病。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種治療疾病或病癥的方法，所述疾病或病癥的特征在于身體部分內(nèi)的非正常的脂質(zhì)水平或含有脂質(zhì)的沉積物，所述方法包括:i)給需要治療的受試者或人工系統(tǒng)施用治療有效量的本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒，和ii)任選地監(jiān)視受試者的脂質(zhì)水平或含有脂質(zhì)的沉積物的變化。本文報(bào)道 的一個(gè)方面是，一種用于具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征的患者的二級(jí)預(yù)防的方法，所述方法包括:給有此需要的受試者施用本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的多聚體、或本文報(bào)道的融合蛋白、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-1。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種用于預(yù)防繼發(fā)性主要不良心血管事件(MACE)的方法，所述方法包括:給有此需要的受試者干預(yù)后施用本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的多聚體、或本文報(bào)道的融合蛋白、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-1，其中所述受試者由于急性心血管事件(CV)被送至急診室(ER)。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種診斷組合物，其包含本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒、或本文報(bào)道的多聚體、或本文報(bào)道的融合蛋白、或本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-1，其中所述載脂蛋白被標(biāo)記，從而允許檢測(cè)在樣品或受試者中的標(biāo)記的載脂蛋白或脂質(zhì)顆粒。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒用于診斷的用途。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，本文報(bào)道的脂質(zhì)顆粒用于預(yù)防或治療受試者的用途，所述受試者罹患特征在于存在非正常的脂質(zhì)水平或含有脂質(zhì)的沉積物的疾病或病癥。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，編碼本文報(bào)道的四連蛋白-載脂蛋白A-1或本文報(bào)道的融合蛋白的核酸，以及包含本文報(bào)道的核酸的細(xì)胞。本文報(bào)道的一個(gè)方面是一種多肽，其具有SEQ ID NO:01的氨基酸序列，或者是它的變體，所述變體與SEQ ID NO:01的氨基酸序列具有至少70%序列同一性。本文報(bào)道的一個(gè)方面是一種多肽，其具有SEQ ID NO:02的氨基酸序列，或者是它的變體，所述變體與SEQ ID NO:02的氨基酸序列具有至少70%序列同一性。本文報(bào)道的一個(gè)方面是一種多肽，其具有SEQ ID NO:06的氨基酸序列，或者是它的變體，所述變體與SEQ ID NO:06的氨基酸序列具有至少70%序列同一性。
本文報(bào)道的一個(gè)方面是一種多肽，其具有SEQ ID NO:66的氨基酸序列，或者是它的變體，所述變體與SEQ ID NO:66的氨基酸序列具有至少70%序列同一性。本文報(bào)道的一個(gè)方面是一種多肽，其具有SEQ ID NO:67的氨基酸序列，或者是它的變體，所述變體與SEQ ID NO:67的氨基酸序列具有至少70%序列同一性。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種脂質(zhì)顆粒，其包含-載脂蛋白A-1或其變體，和-1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰膽堿和I，2- 二棕櫚酰-磷脂酰膽堿，其中所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在50-90之間，且其中所述載脂蛋白A-1具有SEQ ID NO=Ol的氨基酸序列。 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在60-88之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在62-80之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在64-70之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是約66。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種脂質(zhì)顆粒，其包含-載脂蛋白A-1或其變體，和-1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰膽堿和I，2- 二棕櫚酰-磷脂酰膽堿，其中所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在60-90之間，且其中所述載脂蛋白A-1具有SEQ ID N`O:02的氨基酸序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在60-88之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在62-80之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在64-70之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是約66。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種脂質(zhì)顆粒，其包含-載脂蛋白A-1或其變體，和-1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰膽堿和I，2- 二棕櫚酰-磷脂酰膽堿，其中所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在60-90之間，且其中所述載脂蛋白A-1具有SEQ ID NO:06的氨基酸序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在60-88之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在62-80之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在64-70之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是約66。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種脂質(zhì)顆粒，其包含-載脂蛋白A-1或其變體，和-1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰膽堿和I，2- 二棕櫚酰-磷脂酰膽堿，其中所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在60-90之間，且其中所述載脂蛋白A-1具有SEQ ID NO:66的氨基酸序列。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在60-88之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在62-80之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在64-70之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是約66。本文報(bào)道的一個(gè)方面是，一種脂質(zhì)顆粒，其包含-載脂蛋白A-1或其變體，和 -1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰膽堿和I，2- 二棕櫚酰-磷脂酰膽堿，其中所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在60-90之間，且其中所述載脂蛋白A-1具有SEQ ID NO:67的氨基酸序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在60-88之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在62-80之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是在64-70之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是約66。
具體實(shí)施例方式定義術(shù)語“載脂蛋白”表示，分別被包含在脂質(zhì)或脂蛋白顆粒中的蛋白。術(shù)語“載脂蛋白A-Ι”表示`，具有蛋白-脂質(zhì)和蛋白-蛋白相互作用性質(zhì)的兩親螺旋多肽。載脂蛋白A-1作為267個(gè)氨基酸殘基的前載脂蛋白原由肝臟和小腸合成，所述前載脂蛋白原分泌為載脂蛋白原，后者被切割成具有243個(gè)氨基酸殘基的成熟多肽。載脂蛋白A-1是由6-8個(gè)不同的氨基酸重復(fù)序列組成，每個(gè)重復(fù)序列由22個(gè)氨基酸殘基組成，所述重復(fù)序列被接頭部分隔開，所述接頭部分經(jīng)常是脯氨酸，且在有些情況下由幾個(gè)殘基構(gòu)成的片段組成。在GenPept數(shù)據(jù)庫登錄項(xiàng)NM-000039或數(shù)據(jù)庫登錄項(xiàng)X00566 ；GenBankNP-000030.1(gi4557321)中，報(bào)道了一個(gè)示例性的人載脂蛋白A-1氨基酸序列。人載脂蛋白 A-1 (SEQ ID NO:06)具有天然存在的變體，諸如 P27H、P27R、P28R、R34L、G50R、L84R、D113E、A-A119D、D127N、K131 缺失、K131M、W132R、E133K、R151C (氨基酸殘基 151 從 Arg 變?yōu)?Cys，載脂蛋白 A-1-Paris)、E160K、E163G、P167R、L168R、E171V、P189R、R197C(氨基酸殘基173從Arg變?yōu)镃ys，載脂蛋白A-1-Milano)和E222K。也包括具有保守氨基酸改變的變體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述四連蛋白-載脂蛋白A-1包含免疫球蛋白A蛋白酶(IgA蛋白酶)的切割位點(diǎn)片段。從IgA蛋白酶已知的識(shí)別位點(diǎn)包含下述序列，其中“丨”表示切割的鍵的位置:Pro-Ala-Pro 丨 Ser-Pro (SEQ ID NO:61)Pro-Pro 丨 Ser-Pro (SEQ ID NO:62)Pro-Pro 丨 Ala-Pro (SEQ ID NO:63)Pro-Pro 丨 Thr-Pro (SEQ ID NO:64)Pro-Pro I Gly-Pro (SEQ ID NO:65),
其中更經(jīng)常地選擇和切割前3個(gè)。術(shù)語“載脂蛋白模擬物”表示，模擬各個(gè)載脂蛋白的功能的合成多肽。例如“載脂蛋白A-1模擬物”是這樣的合成多肽:在除去膽固醇(即逆轉(zhuǎn)膽固醇流出)方面，其表現(xiàn)出與天然的載脂蛋白A-1可比較的生物學(xué)功能。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述載脂蛋白A-1模擬物包含至少一個(gè)兩親的α-螺旋，所述α-螺旋具有簇集在疏水-親水界面處的帶正電荷的氣基酸殘基和族集在未水面中心處的帶負(fù)電荷的氣基酸殘基。為了 1吳擬載脂蛋白A-1的功能，所述載脂蛋白模擬物包含15-29個(gè)氨基酸殘基的重復(fù)多肽，在一個(gè)實(shí)施方案中，包含22個(gè)氨基酸殘基(PVLDEFREKLNEELEALKQKLK (SEQ ID NO:04) ；PVLDLFRELLNELLEALKQKLK (SEQID NO:05))的重復(fù)多肽。術(shù)語“心血管疾病”通常表示與心臟或血管有關(guān)的疾病或病癥，諸如動(dòng)脈硬化、冠心病、腦血管疾病、主-髂動(dòng)脈疾病、缺血性心臟病或外周血管病。這樣的疾病可能在由諸如心肌梗死、中風(fēng)、心絞痛、短暫腦缺血發(fā)作、充血性心力衰竭、主動(dòng)脈瘤等疾病引起的不利事件(大部分導(dǎo)致受試者死亡)之前難以發(fā)現(xiàn)。術(shù)語“膽酸鹽”是指3 α，7 α，12 α -三羥基_5 β -膽_24_酸或其鹽，特別是鈉鹽。術(shù)語“臨界膠束濃度”和它的縮寫“CMC” (它們可以可互換地使用)表示這樣的表面活性劑或洗滌劑的濃度:在該濃度以上，單個(gè)的洗滌劑分子(單體)自發(fā)地聚集成膠束(膠束、圓形桿、層狀結(jié)構(gòu)等)。術(shù)語“保守氨基酸改變”表示，沒有影響或改變根據(jù)本發(fā)明的脂質(zhì)顆粒或載脂蛋白的特征的氨基酸序列的改變。通過本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，諸如定位誘變和PCR介導(dǎo)的誘變，可以引入改變。保守氨基酸改變包括這樣的改變:其中用具有類似側(cè)鏈的氨基酸殘基替換氨基酸殘基。本領(lǐng)域已經(jīng)定義了具有類似側(cè)鏈的氨基酸殘基的家族。這些家族包括:具有堿性側(cè)鏈的氨基酸(例如賴氨酸、精氨酸、組氨酸)、具有酸性側(cè)鏈的氨基酸(例如天冬氨酸、谷氨酸)、具有 不帶電荷的極性側(cè)鏈的氨基酸(例如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、色氨酸)、具有非極性側(cè)鏈的氨基酸(例如丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸)、具有分支側(cè)鏈的氨基酸(例如蘇氨酸，纈氨酸，異亮氨酸)以及具有芳族側(cè)鏈的氨基酸(例如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、組氨酸)。因此，“變體”蛋白在本文中表示這樣的分子:其氨基酸序列與“母體”蛋白的氨基酸序列相差最多10個(gè)添加、缺失和/或置換，在一個(gè)實(shí)施方案中，與“母體”蛋白的氨基酸序列相差約2至約5個(gè)添加、缺失和/或置換。如Riechmann，L.，等人，Nature332 (1988) 323-327，和 Queen, C.，等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA86 (1989) 10029-10033 所述，通過基于分子建模的誘變，可以進(jìn)行氨基酸序列的改變。使用眾所周知的算法，諸如BL0SUM30、BL0SUM40、BL0SUM45、BL0SUM50、BL0SUM55、BL0SUM60、BL0SUM62、BL0SUM65、BL0SUM70、BL0SUM75、BL0SUM80、BL0SUM85 或 BL0SUM90，可以計(jì)算不同的氨基酸序列的同源性和同一性。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述算法是BL0SUM30。通過將載脂蛋白與洗滌劑增溶的脂質(zhì)在它們各自的轉(zhuǎn)變溫度下一起溫育，可以形成脂質(zhì)顆粒。術(shù)語“洗滌劑”表示表面活性的化學(xué)物質(zhì)。“洗滌劑”通常是具有非極性疏水部分和極性親水部分的兩性分子。術(shù)語“兩性離子型洗滌劑”表示這樣的表面活性的化學(xué)化合物:其具有總體為零的電荷，且同時(shí)包含至少一個(gè)帶正電荷的部分和至少一個(gè)帶負(fù)電荷的部分。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述洗漆劑選自基于糖的洗漆劑、基于聚亞氧燒基的洗滌劑、基于膽汁鹽的洗滌劑、合成洗滌劑或它們的組合。術(shù)語“基于糖的洗滌劑”表示選自下述的洗滌劑:正辛基-β -D-吡喃葡萄糖苷、正壬基-β -D-吡喃葡萄糖苷、正十二烷基-β -D-吡喃麥芽糖苷或5-環(huán)己基戊基-β -D-吡喃麥芽糖苷及其衍生物。術(shù)語“基于膽汁鹽的洗滌劑”表示選自下述的洗滌劑:膽酸鈉、膽酸鉀、膽酸鋰、3-[(3_氯酰氨基丙基)二甲基氨基]_基-丙磺酸鹽(CHAPS)、3-[ (3-氯酰氨基丙基)二甲基氨基]-2-輕基丙磺酸鹽(CHAPSO)及其衍生物。術(shù)語“基于聚亞氧烷基的洗滌劑”表示選自下述的洗滌劑:吐溫20、Triton X-100、Pluronic F68、及其衍生物。術(shù)語“合成洗滌劑”表示選自下述的洗滌劑:兩性洗滌劑(Zwittergent) 3-6、兩性洗滌劑3_8、兩性洗滌劑3_10、兩性洗滌劑3_12及其衍生物。例如藥物制劑等試劑的“有效量”表示，在所需的劑量和時(shí)間段，有效地實(shí)現(xiàn)期望的治療或預(yù)防結(jié)果的量。術(shù)語“高密度脂蛋白顆粒”或它的縮寫“HDL顆粒”(它們可以互換使用)表示，包含載脂蛋白A-1作為主要蛋白性化合物的脂質(zhì)-蛋白復(fù)合物。術(shù)語“宿主細(xì)胞”、“宿主細(xì)胞系”和“宿主細(xì)胞培養(yǎng)物”可互換地使用，并表示其中已經(jīng)引入外源性核酸的細(xì)胞，包括這樣的細(xì)胞的后代。宿主細(xì)胞包括“轉(zhuǎn)化體”和“轉(zhuǎn)化的細(xì)胞”，它們包括原代轉(zhuǎn)化細(xì)胞和從它們衍生出的后代，不論傳代的數(shù)目。后代的核酸含量可以不與親代細(xì)胞完全相同，而是可以含有突變。在本文中包括，具有與在最初轉(zhuǎn)化的細(xì)胞中篩選或選擇的相同的功能或生物活性的突變體后代。術(shù)語“增加脂質(zhì)流出”及其語法等效描述表示，增加從細(xì)胞或斑塊的脂質(zhì)流出水平和/或速率、加速從細(xì)胞或斑塊的脂質(zhì)流出、增強(qiáng)從細(xì)胞或斑塊的脂質(zhì)流出、促進(jìn)從細(xì)胞或斑塊的脂質(zhì)流出、上調(diào)從細(xì)胞或斑塊的脂質(zhì)流出、提高從細(xì)胞或斑塊的脂質(zhì)流出和/或增進(jìn)從細(xì)胞或斑塊的脂質(zhì)流出。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)流出包括磷脂、甘油三酯、膽固醇和/或膽固醇酯的流出。“個(gè)體”或“受試者”是`哺乳動(dòng)物。哺乳動(dòng)物包括，但不限于，家養(yǎng)的動(dòng)物(例如，牛、綿羊、貓、狗和馬)、靈長類動(dòng)物(例如，人類和非人靈長類動(dòng)物諸如猴子)、兔和嚙齒類動(dòng)物(例如，小鼠和大鼠)。在某些實(shí)施方案中，所述個(gè)體或受試者是人。術(shù)語“DPPC”表示磷脂I，2- 二棕櫚酰_sn_甘油_3_磷脂酰膽堿，也稱作I，2_ 二棕櫚酰-磷脂酰膽堿。術(shù)語“多聚體”表示，由2個(gè)或更多個(gè)單體組成的復(fù)合物。多聚體由單體之間的非共價(jià)相互作用形成。每個(gè)單體包含一個(gè)多聚化結(jié)構(gòu)域。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述多聚體包含2或3個(gè)單體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述多聚化結(jié)構(gòu)域通過在每個(gè)單體中包含的各個(gè)多聚化結(jié)構(gòu)域之間的非共價(jià)相互作用而相互作用。術(shù)語“多聚化結(jié)構(gòu)域”是指，能夠共價(jià)地或非共價(jià)地結(jié)合2個(gè)或更多個(gè)單體分子的氨基酸序列。多聚化結(jié)構(gòu)域能夠與不同的、類似的或相同的氨基酸序列的多聚化結(jié)構(gòu)域相互作用。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述多聚化結(jié)構(gòu)域是四連蛋白三聚化結(jié)構(gòu)元件或其衍生物，其氨基酸序列與SEQ ID NO:53的共有氨基酸序列具有至少68%同一性。在一個(gè)實(shí)施方案中，在SEQ ID NO:53的50位處的半胱氨酸殘基被不同的氨基酸殘基置換，在另一個(gè)實(shí)施方案中，被絲氨酸殘基或蘇氨酸殘基或甲硫氨酸殘基置換。包含多聚化結(jié)構(gòu)域的多肽可以與一個(gè)或多個(gè)也包含多聚化結(jié)構(gòu)域的其它多肽結(jié)合。簡單地通過在適當(dāng)條件下混合所述多肽，可以引發(fā)多聚體形成。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述多聚化結(jié)構(gòu)域具有SEQ ID NO:53的氨基酸序列，其中已經(jīng)在所述氨基酸序列的N端或C端刪除或添加1-10個(gè)殘基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述多聚化結(jié)構(gòu)域具有SEQ ID NO:53的氨基酸序列，其中已經(jīng)從所述氨基酸序列的N端刪除了 6個(gè)或9個(gè)氨基酸殘基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述多聚化結(jié)構(gòu)域具有SEQ ID NO:53的氨基酸序列，其中已經(jīng)刪除了 N-端氨基酸殘基L或N-端氨基酸殘基C和L。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述多聚化結(jié)構(gòu)域是四連蛋白三聚化結(jié)構(gòu)元件，且具有SEQ ID NO:54的氨基酸序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述多聚體是同聚體。所述多聚體可以是同聚體或異聚體，因?yàn)榭梢越M合包含多聚化結(jié)構(gòu)域的不同載脂蛋白，以整合成多聚體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述多聚體是三聚同聚體。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，所述多聚化結(jié)構(gòu)域從四連蛋白得到。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述多聚化結(jié)構(gòu)域包含四連蛋白三聚化結(jié)構(gòu)元件，后者具有SEQ ID NO:54的氨基酸序列。四連蛋白三聚化結(jié)構(gòu)元件的三聚化效應(yīng)由卷曲螺旋結(jié)構(gòu)造成，所述卷曲螺旋結(jié)構(gòu)與2個(gè)其它四連蛋白三聚化結(jié)構(gòu)元件的卷曲螺旋結(jié)構(gòu)相互作用，以形成三聚體。所述四連蛋白三聚化結(jié)構(gòu)元件可以從人四連蛋白、兔四連蛋白、鼠四連蛋白或鯊魚軟骨的C-型凝集素得到。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述四連蛋白三聚化結(jié)構(gòu)元件包含與SEQ ID NO:53的共有序列具有至少68%、或至少75%、或至少81 %、或至少87%、或至少92%同一性的序列。術(shù)語“非共價(jià)相互作用”表示:非共價(jià)結(jié)合力諸如離子相互作用力(例如鹽橋)、非離子相互作用力(例如氫鍵)或疏水相互作用力(例如范德華力或η-堆疊相互作用)。關(guān)于參照多肽序列的“百分比)氨基酸序列同一性”，定義為將候選序列與參照多肽序列在進(jìn)行序列比對(duì)(并在必要時(shí)導(dǎo)入間隙)以獲取最大百分比序列同一性，且不將任何保守置換視為序列同一性的一部分之后，候選序列中的氨基酸殘基與參照多肽序列中的氨基酸殘基相同的百分?jǐn)?shù)。例如，使用公眾可得到的計(jì)算機(jī)軟件如BLAST、BLAST-2、ALIGN或Megalign(DNASTAR)軟件,可使用屬于本領(lǐng)域技術(shù)的各種方法進(jìn)行序列比對(duì)以便測(cè)定氨基酸序列同 一性百分比。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以決定比對(duì)序列的適宜參數(shù)，包括對(duì)所比較的序列全長獲得最大比對(duì)所需的任何算法。然而，為此目的，氨基酸序列同一性％的值使用序列比較計(jì)算機(jī)程序ALIGN-2產(chǎn)生。ALIGN-2序列比對(duì)計(jì)算機(jī)程序的作者是Genentech, Inc.,該源代碼已經(jīng)隨用戶文檔提交至美國版權(quán)局(Washington D.C.,20559),其美國版權(quán)注冊(cè)登記號(hào)為TXU510087。公眾可從Genentech, Inc.(South San Francisco,加利福尼亞)得到ALIGN-2程序，或者可以從所述源代碼進(jìn)行編譯。ALIGN-2程序應(yīng)當(dāng)為在UNIX操作系統(tǒng)，包括在數(shù)字UNIX V4.0D上使用而進(jìn)行編譯。ALIGN-2程序設(shè)定了所有序列比對(duì)參數(shù)并且不變。在ALIGN-2應(yīng)用于氨基酸序列比較的情況中，給定氨基酸序列A相對(duì)于(to)、與(with)、或針對(duì)(against)給定氨基酸序列B的氨基酸序列同一'注％ (或者這樣說:給定氨基酸序列A具有或含有相對(duì)于、與或針對(duì)給定氨基酸序列B的某一 ％氨基酸序列同一性)如下計(jì)算:分?jǐn)?shù)X/Y 乘以 100，其中X是用序列比對(duì)程序ALIGN-2在該程序的A和B比對(duì)中評(píng)分為相同匹配的氨基酸殘基數(shù)，且其中Y是B中的氨基酸殘基總數(shù)。可以理解，當(dāng)氨基酸序列A與氨基酸序列B的長度不相等時(shí)，A相對(duì)于B的氨基酸序列同一性％將不等于B相對(duì)于A的氨基酸序列同一性％。除非另外特別指出，如在緊前面的段落中所述，使用ALIGN-2計(jì)算機(jī)程序獲得在本文中所用的所有的％氨基酸序列同一性的值。術(shù)語“藥物制劑”表示這樣的制劑:其處于允許其中含有的活性成分的生物活性為有效的形式，且其不含有對(duì)于所述制劑將要施用的受試者而言具有不可接受的毒性的其它組分。“藥學(xué)上可接受的載體”表示藥物制劑中除了活性成分以外的成分，其對(duì)受試者是無毒的。藥學(xué)上可接受的載體包括但不限于緩沖劑、賦形劑、穩(wěn)定劑或防腐劑。術(shù)語“磷脂酰膽堿”表示由一個(gè)甘油部分、兩個(gè)羧酸部分和一個(gè)磷酸膽堿部分組成的分子，其中所述甘油部分通過酯鍵(即2個(gè)羧酸酯鍵和I個(gè)磷酸酯鍵)與每個(gè)其它部分共價(jià)地連接，其中所述磷酸酯鍵是與所述甘油部分的1-羥基或3-羥基相連。術(shù)語“羧酸部分”表示包含至少一個(gè)酰基(R-C(O)O)的有機(jī)部分。所述磷脂酰膽堿可以屬于任意種類或來源。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述磷脂酰膽堿選自卵磷脂酰膽堿、大豆磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二肉豆蘧酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿、二月桂基磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、1-肉豆蘧酰-2-棕櫚酰磷脂酰膽堿、1-棕櫚酰-2-肉豆蘧酰磷脂酰膽堿、1-棕櫚酰-2-硬脂酰磷脂酰膽堿、1-硬脂酰-2-棕櫚酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰膽堿、1-棕櫚酰-2-油酰磷脂酰膽堿、1-油酰-2-棕櫚酰磷脂酰膽堿和它們的類似物和衍生物。本文使用的所有磷脂可以源自任意來源，即(在適當(dāng)時(shí))源自大豆、奶、卵或甚至除了人類以外的動(dòng)物的內(nèi)部器官，它們可以源自天然來源，或是半合成的或甚至完全合成的。術(shù)語“P0PC”表示磷脂1-棕櫚酰-2-油酰-sn-甘油_3_磷脂酰膽堿，也稱作1_棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰膽堿。本文使用的“治療(treatment)”(及其語法變體，諸如“治療(treat)”或“治療(treating) ”)指在嘗試改變待治療的個(gè)體的天然進(jìn)程中的臨床介入，并且可以為了預(yù)防或在臨床病理學(xué)的進(jìn)程中進(jìn)行。治療的理想效果包括但不限于防止疾病發(fā)生或復(fù)發(fā)，緩和癥狀，消除疾病的任何直接或間接病理學(xué)后果，預(yù)防轉(zhuǎn)移，減少疾病進(jìn)展速率，改善或減輕疾病狀態(tài)，和緩解或改善的預(yù)后。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體用于延遲疾病的發(fā)生或延緩疾病的進(jìn)展。術(shù)語“變體”也包括本文報(bào)道的載脂蛋白或載脂蛋白模擬物的變體，其中在所述變體中，各個(gè)載脂蛋白或載脂蛋白模擬物的氨基酸序列包含一個(gè)或多個(gè)氨基酸置換、添加或缺失。所述改變可以增加或降低所述載脂蛋白對(duì)載脂蛋白受體或載脂蛋白轉(zhuǎn)換酶的親和力，或可以增加所述載脂蛋白變體與各個(gè)載脂蛋白相比的穩(wěn)定性，或可以增加所述載脂蛋白變體與各個(gè)載脂蛋白相比在水溶液中的溶解度，或可以增加在宿主細(xì)胞中/由宿主細(xì)胞實(shí)現(xiàn)的所述載脂蛋白變體與各個(gè)載脂蛋白相比的重組生產(chǎn)。脂質(zhì)顆粒本文報(bào)道了一種脂質(zhì)顆粒，其包含a)四連蛋白-載脂蛋白A-1,b)磷脂酰膽堿，和c)其它脂質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒包含四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、第一種磷脂酰膽堿和第二種磷脂酰膽堿。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述第一種磷脂酰膽堿和所述第二種磷脂酰膽堿的差別在于，一個(gè)或兩個(gè)被酯化至磷脂酰膽堿的磷酸甘油主鏈上的羧酸部分或羧酸部分衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述第一種磷脂酰膽堿是POPC，且所述第二種磷脂酰膽堿是DPPC0在一個(gè)實(shí)施方案中，在所述脂質(zhì)顆粒中的所述四連蛋白-載脂蛋白A-Ι、所述磷脂酰膽堿非共價(jià)地結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述四連蛋白-載脂蛋白A-1是重組生產(chǎn)的四連蛋白-載脂蛋白A-1。脂質(zhì)組合的選擇決定了包含載脂蛋白的脂質(zhì)顆粒的效力和肝安全性。在使用兔進(jìn)行的含有二肉豆蘧酰磷脂酰膽堿(DMPC)的脂質(zhì)顆粒的體內(nèi)研究中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，用30mg/kg處理的兔表現(xiàn)出嚴(yán)重的副作用，但是存活，而用100mg/kg處理的兔死亡。體外功能試驗(yàn)證實(shí)，含有單一磷脂酰膽堿(諸如DPPC或P0PC)的脂質(zhì)顆粒會(huì)活化LCAT。還證實(shí)，當(dāng)脂質(zhì)顆粒包含不同磷脂的組合時(shí)，膽固醇流出更高。表1:為體內(nèi)兔研究制備的差別在于它們的脂質(zhì)組成的磷脂組合
權(quán)利要求
1.一種脂質(zhì)顆粒，其包含 -載脂蛋白A-1或其變體，和 -1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰膽堿和1，2- 二棕櫚酰-磷脂酰膽堿。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰膽堿與I，2-二棕櫚酰-磷脂酰膽堿的摩爾比是99:1至25: 75。
3.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述載脂蛋白A-1或其變體是包含3個(gè)單體的多聚體。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述載脂蛋白A-1是具有 SEQ ID NO:01或 SEQ ID NO:02 或 SEQ ID NO:06或 SEQ ID NO:66 或 SEQ ID NO:67 的氨基酸序列的四連蛋白-載脂蛋白A-1。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述載脂蛋白A-1的氨基酸序列具有一個(gè)或多個(gè)保守氨基酸改變。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述載脂蛋白A-1的氨基酸序列與 SEQ ID NO:01 或 SEQ ID NO:02 或 SEQ ID NO:06 或 SEQ ID NO:66 或 SEQ IDNO:67的氨基酸序列具有至少70%同源性。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于與選自由以下組成的組的受體結(jié)合:cubilin、B類I型清除受體(SR-BI)、ATP-結(jié)合盒I (ABCA-1)、卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)、膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)或磷脂轉(zhuǎn)移蛋白(PLTP)。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分 子的數(shù)目是40-120。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是50-110。
10.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是54-102。
11.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是60-90。
12.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是60-88。
13.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是62-80。
14.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是64-70。
15.根據(jù)權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是66-86。
16.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是約66。
17.藥物組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒。
18.組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其中所述脂質(zhì)顆粒包含可檢測(cè)的標(biāo)記。
19.用作藥物的根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒。
20.用作藥物的根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，所述藥物 -用于具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征的患者的二級(jí)預(yù)防，或者 -用于預(yù)防或治療動(dòng)脈粥樣硬化，或者 -用于誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者 -用于清除/溶解/穩(wěn)定受試者血管中的粥樣硬化斑塊，或者用于使膽固醇從受試者的動(dòng)脈壁重新分配至肝臟，或者 -用于預(yù)防或治療受試者的瓣膜狹窄，或者 -用于增加受試者的HDL顆粒的數(shù)目，或者 -用于啟動(dòng)受試者中的膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，或者 -用于除去內(nèi)毒素，或者 -用于預(yù)防膿毒性休克 -用于治療心絞痛，或者 -用于治療心肌梗死，或者 -用于治療不穩(wěn)定型心絞痛，或者 -用于治療動(dòng)脈狹窄，所述動(dòng)脈狹窄諸如外周動(dòng)脈疾病(PAD)、頸動(dòng)脈狹窄、腦動(dòng)脈狹窄或冠狀動(dòng)脈狹窄，或者 -用于治療血管性癡呆，或者 -用于治療一過性黑朦。
21.根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒用于生產(chǎn)藥物的用途。
22.根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物 -用于具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征的`患者的二級(jí)預(yù)防，或者 -用于預(yù)防或治療動(dòng)脈粥樣硬化，或者 -用于誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者 -用于清除/溶解/穩(wěn)定受試者血管中的粥樣硬化斑塊，或者用于使膽固醇從受試者的動(dòng)脈壁重新分配至肝臟，或者 -用于預(yù)防或治療受試者的瓣膜狹窄，或者 -用于增加受試者的HDL顆粒的數(shù)目，或者 -用于啟動(dòng)受試者中的膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，或者 -用于除去內(nèi)毒素，或者 -用于預(yù)防膿毒性休克 -用于治療心絞痛，或者 -用于治療心肌梗死，或者 -用于治療不穩(wěn)定型心絞痛，或者 -用于治療動(dòng)脈狹窄，所述動(dòng)脈狹窄諸如外周動(dòng)脈疾病(PAD)、頸動(dòng)脈狹窄、腦動(dòng)脈狹窄或冠狀動(dòng)脈狹窄，或者 -用于治療血管性癡呆，或者 -用于治療一過性黑朦。
23.一種用于生產(chǎn)藥物的方法，所述藥物-用于具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征的患者的二級(jí)預(yù)防，或者 -用于預(yù)防或治療動(dòng)脈粥樣硬化，其中包含的根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒的量足以在受試者中誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者-用于誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者 -用于清除/溶解/穩(wěn)定受試者血管中的粥樣硬化斑塊，或者用于使膽固醇從受試者的動(dòng)脈壁重新分配至肝臟，或者 -用于預(yù)防或治療受試者的瓣膜狹窄，或者 -用于增加受試者的HDL顆粒的數(shù)目，或者 -用于啟動(dòng)受試者中的膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，或者 -用于除去內(nèi)毒素，或者 -用于預(yù)防膿毒性休克 -用于治療心絞痛，或者 -用于治療心肌梗死，或者 -用于治療不穩(wěn)定型心絞痛，或者 -用于治療動(dòng)脈狹窄，所述動(dòng)脈狹窄諸如外周動(dòng)脈疾病(PAD)、頸動(dòng)脈狹窄、腦動(dòng)脈狹窄或冠狀動(dòng)脈狹窄，或者 -用于治療血管性癡呆，或者 -用于治療一過性黑朦。
24.一種方法，所述方法 -用于具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征的患者的二級(jí)預(yù)防，或者 -用于預(yù)防或治療動(dòng)脈粥樣硬化，其中包含的根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒的量足以在受試者 中誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者-用于誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和/或斑塊平定，或者 -用于清除/溶解/穩(wěn)定受試者血管中的粥樣硬化斑塊，或者用于使膽固醇從受試者的動(dòng)脈壁重新分配至肝臟，或者 -用于預(yù)防或治療受試者的瓣膜狹窄，或者 -用于增加受試者的HDL顆粒的數(shù)目，或者 -用于啟動(dòng)受試者中的膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，或者 -用于除去內(nèi)毒素，或者 -用于預(yù)防膿毒性休克 -用于治療心絞痛，或者 -用于治療心肌梗死，或者 -用于治療不穩(wěn)定型心絞痛，或者 -用于治療動(dòng)脈狹窄，所述動(dòng)脈狹窄諸如外周動(dòng)脈疾病(PAD)、頸動(dòng)脈狹窄、腦動(dòng)脈狹窄或冠狀動(dòng)脈狹窄，或者 -用于治療血管性癡呆，或者 -用于治療一過性黑朦。
25.根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，所述脂質(zhì)顆粒用于治療 -急性冠狀動(dòng)脈綜合征，或者-動(dòng)脈粥樣硬化，或者 -受試者血管中的粥樣硬化斑塊，或者 -受試者的瓣膜狹窄，或者 -膿毒性休克，或者 -心絞痛，或者 -心肌梗死，或者 -不穩(wěn)定型心絞痛，或者 -動(dòng)脈狹窄，或者 -外周動(dòng)脈疾病(PAD)，或者 -頸動(dòng)脈狹窄，或者 -腦動(dòng)脈狹窄，或者 -冠狀動(dòng)脈狹窄，或者 -血管性癡呆，或者 -一過性黑朦。
26.根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，所述脂質(zhì)顆粒用于 -誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)，或者 -誘導(dǎo)斑塊平定，或者 -清除或溶解或穩(wěn)定粥樣硬化斑塊，或者 -使膽固醇從動(dòng)脈壁重新分配至肝臟，或者 -增加HDL顆粒的數(shù)目，或者 -除去內(nèi)毒素。
27.治療疾病或病癥的方法，所述疾病或病癥的特征在于身體部分內(nèi)的非正常的脂質(zhì)水平或含有脂質(zhì)的沉積物，所述方法包括: i)給需要治療的受試者或人工系統(tǒng)施用治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，和 )任選地監(jiān)視受試者的脂質(zhì)水平或含有脂質(zhì)的沉積物的變化。
28.一種治療個(gè)體的方法，所述個(gè)體具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征、或動(dòng)脈粥樣硬化、或在血管中的粥樣硬化斑塊、或瓣膜狹窄、或膿毒性休克、或心絞痛、或心肌梗死、或不穩(wěn)定型心絞痛、或動(dòng)脈狹窄、或外周動(dòng)脈疾病(PAD)、或頸動(dòng)脈狹窄、或腦動(dòng)脈狹窄、或冠狀動(dòng)脈狹窄、或血管性癡呆、或一過性黑朦，所述方法包括:給所述個(gè)體施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒。
29.一種在個(gè)體中誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)、或誘導(dǎo)斑塊平定、或清除或溶解或穩(wěn)定粥樣硬化斑塊、或使膽固醇從動(dòng)脈壁重新分配至肝臟、或增加HDL顆粒的數(shù)目、或除去內(nèi)毒素的方法，所述方法包括:給所述個(gè)體施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，以誘導(dǎo)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)、或誘導(dǎo)斑塊平定、或清除或溶解或穩(wěn)定粥樣硬化斑塊、或使膽固醇從動(dòng)脈壁重新分配至肝臟、或增加HDL顆粒的數(shù)目、或除去內(nèi)毒素。
30.根據(jù)權(quán)利要求29所述的方法，其特征在于，所述非正常的脂質(zhì)水平是在體液中。
31.根據(jù)權(quán)利要求30所述的方法，其特征在于，所述體液是全血或血清。
32.根據(jù)權(quán)利要求29-31中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述非正常的脂質(zhì)水平是增加的膽固醇水平。
33.根據(jù)權(quán)利要求29-32中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述含有脂質(zhì)的沉積物是在血管中的斑塊。
34.—種治療疾病或病癥的方法，所述疾病或病癥的特征在于身體部分內(nèi)的非正常的脂質(zhì)水平或含有脂質(zhì)的沉積物，所述方法包括: i)給需要治療的受試者或人工系統(tǒng)施用治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒， )任選地監(jiān)視受試者的所述脂質(zhì)水平或所述含有脂質(zhì)的沉積物的變化。
35.一種用于具有急性冠狀動(dòng)脈綜合征的患者的二級(jí)預(yù)防的方法，所述方法包括:給有此需要的受試者施用根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒。
36.一種多肽，其具有SEQ ID NO:01的氨基酸序列，或者是它的變體，所述變體與SEQID NO=Ol的氨基酸序列具有至少70%序列同一性。
37.一種多肽，其具有SEQ ID NO:02的氨基酸序列，或者是它的變體，所述變體與SEQID NO:02的氨基酸序列具有至少70%序列同一性。
38.一種多肽，其具有SEQ ID NO:06的氨基酸序列，或者是它的變體，所述變體與SEQID NO:06的氨基酸序列具有至少70%序列同一性。
39.一種多肽，其具有SEQ ID NO:66的氨基酸序列，或者是它的變體，所述變體與SEQID NO:66的氨基酸序列具有至少70%序列同一性。
40.一種多肽，其具 有SEQ ID NO:67的氨基酸序列，或者是它的變體，所述變體與SEQID NO:67的氨基酸序列具有至少70%序列同一性。
41.一種脂質(zhì)顆粒，其包含 -載脂蛋白A-1或其變體，和 -1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰膽堿和1，2- 二棕櫚酰-磷脂酰膽堿， 其中所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是50-105，且 其中所述載脂蛋白A-1具有SEQ ID NO:01的氨基酸序列。
42.一種脂質(zhì)顆粒，其包含 -載脂蛋白A-1或其變體，和 -1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰膽堿和1，2- 二棕櫚酰-磷脂酰膽堿， 其中所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是50-105，且 其中所述載脂蛋白A-1具有SEQ ID NO:02的氨基酸序列。
43.一種脂質(zhì)顆粒，其包含 -載脂蛋白A-1或其變體，和 -1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰膽堿和1，2- 二棕櫚酰-磷脂酰膽堿， 其中所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是50-105，且 其中所述載脂蛋白A-1具有SEQ ID NO:06的氨基酸序列。
44.一種脂質(zhì)顆粒，其包含 -載脂蛋白A-1或其變體，和 -1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰膽堿和1，2- 二棕櫚酰-磷脂酰膽堿， 其中所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是50-105，且其中所述載脂蛋白A-1具有SEQ ID NO:66的氨基酸序列。
45.一種脂質(zhì)顆粒，其包含 -載脂蛋白A-1或其變體，和 -1-棕櫚酰-2-油酰-磷脂酰膽堿和1，2- 二棕櫚酰-磷脂酰膽堿， 其中所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是50-105，且 其中所述載脂蛋白A-1具有SEQ ID NO:67的氨基酸序列。
46.根據(jù)權(quán)利要求41-45中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是60-95。
47.根據(jù)權(quán)利要求41-46中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是60-90。
48.根據(jù)權(quán)利要求41-47中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是60-88。
49.根據(jù)權(quán)利要求41-48中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是62-80。
50.根據(jù)權(quán)利要求41-48中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分子的數(shù)目是66-86。
51.根據(jù)權(quán)利要求41-48中任一項(xiàng)所述的脂質(zhì)顆粒，其特征在于，所述脂質(zhì)顆粒中的每個(gè)載脂蛋白單體的磷脂分 子的數(shù)目是64-70。
全文摘要
本文報(bào)道了一種脂質(zhì)顆粒，其包含載脂蛋白、磷脂酰膽堿和脂質(zhì)，諸如磷脂、脂肪酸或類固醇脂質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒包含僅一種載脂蛋白。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)顆粒由載脂蛋白、磷脂、脂質(zhì)和洗滌劑組成。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述脂質(zhì)是第二種磷脂酰膽堿，其中所述第一種磷脂酰膽堿和所述第二種磷脂酰膽堿的差別在于，一個(gè)或兩個(gè)被酯化至磷脂酰膽堿的甘油主鏈上的脂肪酸殘基或脂肪酸殘基衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述載脂蛋白選自具有選自SEQ ID NO01、02、06、66和67的氨基酸序列的載脂蛋白，或者是它的變體，所述變體與選擇的序列具有至少70％序列同一性。
文檔編號(hào)A61K9/127GK103108626SQ201180041951
公開日2013年5月15日 申請(qǐng)日期2011年8月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月30日
發(fā)明者馬丁·巴德爾, 莫妮卡·貝納, 于爾根·芬格勒, 烏爾里希·科納特, 讓-呂克·瑪麗, 西爾克·莫爾 申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司