專利名稱：米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑及其制備方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，更具體的是涉及米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑及其制備方法。
背景技術：
自上世紀70年代以來，我國癌癥死亡率一直呈持續增長趨勢，70年代、90年代和 21世紀初每年死于癌癥的人數分別為70萬、117萬和150萬，癌癥已經成為嚴重威脅我國人民健康的頭號殺手。因此預防及治療癌癥是我國乃至全球所要面臨的一個重大問題。治療癌癥常用的化療藥物很多，其中米托蒽醌便是那一種有效地抗腫瘤藥物，尤其對乳腺癌及惡性淋巴癌的治療具有很好的療效。然而化療藥物在殺傷腫瘤細胞的同時也會對人體的正常細胞造成極大的損害，從而引起其他的副作用，對人體造成傷害。MA為一種蒽醌抗腫瘤新藥，其結構及抗癌作用與阿霉素相近，因其無氨基糖結構， 不產生自由基，且有抑制脂質過氧化作用，故對心臟毒性較低。其作用機制表明，可視MA為細胞周期非特異性藥物，因它可殺滅任何細胞周期的癌細胞，增殖與非增殖細胞均受到抑制。分裂細胞比休止細胞對本品更敏感，S后期對米托蒽醌最敏感。它對惡性腫瘤細胞的作用是通過以下兩種機制(I)嵌入作為嵌入劑，它能嵌入到DNA堿基之間從而阻斷DNA合成與轉錄 (transcription),導致DNA鏈的膠連和鏈結構的破壞。(2)酶抑制可抑制II型拓撲異構酶(topoisomerase)的活性,從而導致基因組 DNA的崩解。納米藥劑的研制制有望解決化療毒副作用這個長期困擾人們的問題。納米藥劑指利用三維空間中至少有一維處于納米尺度范圍(I-IOOnm)或由它們作為基本單元構成的納米材料為基材，來承載藥物而制備的新型藥物制劑。這種新型的藥物制劑能夠利用實體瘤的高通透性和滯留效應(enhanced permeability and retention effect,EPR),有選擇的滲透并滯留在腫瘤組織部位，從而可以增加藥效并減少系統副作用。因而我們希望通過對米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑的研究，來以此能改善現有的納米治療技術。

發明內容
本發明的目的是設計并制備一種新型的米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑。本技術與現有的制備方法相比，制得的磷酸氫鈣納米粒子更加均勻，粒徑也更小(100納米以下)，因而可以在藥物載體方面有更好的應用研究。米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑的制備方法，步驟如下I)分別配置100 900毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取一定量的氯化鈣加入相應的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為5 : I I I)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到相應的有機相(氯化鈣水溶液與有機相體積比為I : 50 I : 200)中，超聲均勻，組成A乳液，備用。
3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到相應的有機相中，有機相的量與步驟2)取的有機相相同，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌O. 5 2小時。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。注其中有機相由己醇，表面活性劑triton X-100和環己烷按照體積比I : I : 2 組成。整個制備過程簡單快捷，制備周期最長為三個小時，產率高。所制備的米托蒽醌納米磷酸氫鈣粒徑在40到100納米之間，粒徑分布均勻。本發明同傳統的乳化法制備納米粒子的優勢在于I、采用本工藝制備米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑，制備過程極其簡單。通過將氯化鈣和磷酸氫二鈉分別同有機相形成乳液，然后將兩種乳液混合均勻的方法，可以大大提高乳液中乳滴的穩定性，制備的粒子粒徑較傳統的乳化法更均勻，因而使用更為安全有效。2、所制備的磷酸氫鈣具有優良的生物相容性和生物可降解性。磷酸氫鈣可作補鈣劑被人們服用，具有安全可靠的性能，并且在腫瘤組織的酸性條件下，磷酸氫鈣能夠迅速降解來釋放出包埋的藥物，從而提高治療效果。因此，與現有的米托蒽醌藥物制劑相比，本發明涉及的米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑具有制備工藝簡單，載藥率高等特點，制劑粒徑在40到150納米之間，載藥率在20%到 40%。有望有效降低米托蒽醌的毒副作用，故對癌癥的治療具有極其重要的研究價值。


圖I :按照以前方法制備的米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑的掃描電鏡照片。圖2 :按照實施例3制備的米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑的掃描電鏡照片。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明做進一步的說明。實施例I :I)分別配置100毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. I毫升的氯化鈣加入相應的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 5 I)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到5毫升有機相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到5毫升有機相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌2小時。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。實施例2 I)分別配置200毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. 2毫升的氯化鈣加入相應的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 5 I)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到5毫升有機相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。
3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到5毫升有機相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌2小時。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。實施例3 I)分別配置300毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. 3毫升的氯化鈣加入相應的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 3 1)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到10毫升有機相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到10毫升有機相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌I小時。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。制備的樣品如圖2所示，與現有技術生產的圖I相比，粒徑更加均勻可控，均在100 納米以下。實施例4 I)分別配置450毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. 3毫升的氯化鈣加入相應的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 3 1)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到10毫升有機相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到10毫升有機相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌I小時。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。實施例5 I)分別配置600毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. 5毫升的氯化鈣加入相應的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 3 1)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到10毫升有機相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到10毫升有機相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌O. 5小時。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。實施例6 I)分別配置750毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. 5毫升的氯化鈣加入相應的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 3 1)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到20毫升有機相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到20毫升有機相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌O. 5小時。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。實施例7:I)分別配置900毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. 5毫升的氯化鈣加入相應的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 5 1)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到20毫升有機相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到20毫升有機相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌O. 5小時。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。實施例8 形態觀察、粒徑及其分布測定。取樣品溶液經超速離心分離后，取出沉淀物，加蒸餾水少量使分散，滴于碳支持膜上制樣，在透射電鏡下觀察其形貌狀態并拍照，結果如圖2所述取制備的微乳樣品適量，稀釋，然后用粒徑測定儀測定微乳粒徑及分布。透射電鏡下觀察到米托蒽醌納米磷酸鈣微乳液呈均勻規則的球形粒子。實驗測得的米托蒽醌納米磷酸鈣微乳粒徑在40_100nm范圍內均勻分布。實施例9 載藥量的測定取上清液，加入一定量的Hcl，使藥物釋放出來，測定阿霉素的吸光度A，由藥物濃
度和吸光度的關系的出來藥物的濃度從而求出鹽酸米諾環素的含量，則
#7 里· ,。/、微乳種藥物含量ιΛΛ()/
■里(%)= 題 Xl_本實驗的載藥量計算如下所示所取得納米碳酸鈣粒子的量0. 8-lmg,吸光值X為O. 272-0. 288，藥物濃度計算公式為y = O. 2192X+0. 004 計算的藥物濃度為 O. 06362-0. 06713mg/ml藥物總質量0·1909-0. 2014。
權利要求
1.一種米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑的制備方法，步驟如下1)分別配置100 900毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用；2)取氯化鈣水溶液加入米托蒽醌，氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為5: I I : 1，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌的氯化鈣水溶液加入到有機相中，氯化鈣水溶液與有機相體積比為I : 50 I : 200，超聲均勻，組成A乳液，備用；3)取與含有米托蒽醌的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到有機相中，有機相的量與步驟2)取的有機相相同，超聲均勻，組成B乳液，備用；4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌O.5 2小時；5)將步驟四中的混合溶液加入到乙醇中破乳，然后離心并用乙醇洗滌，最后將樣品自然烘干；上述有機相由己醇，表面活性劑triton X-100和環己烷按照體積比I : I : 2。
2.權利要求I的米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑，其特征是制劑粒徑在40到150納米之間，載藥率在20%到40%。
全文摘要
本發明涉及米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑及其制備方法。取氯化鈣水溶液加入米托蒽醌，氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為5∶1～1∶1，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌的氯化鈣水溶液加入到有機相中，氯化鈣水溶液與有機相體積比為1∶50～1∶200，超聲均勻，組成A乳液；取與含有米托蒽醌的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到有機相中、超聲均勻，組成B乳液；在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌0.5～2小時；混合溶液加入到乙醇中破乳，然后離心并用乙醇洗滌，最后將樣品自然烘干；采用本發明制備米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑，制備工藝簡單，制劑粒徑在40到150納米之間，載藥率在20％到40％。
文檔編號A61K9/14GK102579355SQ20121007379
公開日2012年7月18日 申請日期2012年3月19日 優先權日2012年3月19日
發明者常津, 王小敏, 王漢杰, 王生 申請人:天津大學