專(zhuān)利名稱(chēng)：熱淋清顆粒藥材醇提有效部位及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，用于制備中藥熱淋清顆粒的藥材頭花寥的提取物。具體地，本發(fā)明涉及由熱淋清的原料即藥材頭花寥的醇提取物所獲得的有效部位，以及該有效部位的制備方法，還涉及所述有效部位的用途。
背景技術(shù)：
頭花寥(Polygonum capitatum Buch-Ham ex D. Don)為寥科寥屬多年生草本植物。具有清熱利濕、利尿通淋之功效，在臨床上治療泌尿系統(tǒng)感染有著顯著的效果。以其為原料制成的中成藥制劑“熱淋清顆粒” 2004年進(jìn)入國(guó)家基本醫(yī)療保險(xiǎn)目錄，2012年進(jìn)入貴州省基本藥物目錄。頭花寥是少數(shù)民族地區(qū)的常用藥，主要用于腎盂腎炎、尿道感染、利尿通淋等癥。相關(guān)的藥理學(xué)研究少見(jiàn)，目前僅有任光友等幾篇報(bào)道。任光友采用大鼠細(xì)菌性腎盂腎炎模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果頭花寥水提取物組大鼠尿液中的WBC和BLD與對(duì)照組比較明顯減少，顯示頭花寥水提物對(duì)腎盂腎炎具有一定的抗炎作用。任光友等以小鼠腹腔注射大腸桿菌菌液觀察5天內(nèi)小鼠死亡情況，結(jié)果對(duì)照組死亡率為100%，頭花寥組死亡率分別為20%和50%，顯示頭花寥水提物能夠?qū)勾竽c桿菌引起的感染。任光友等以頭花寥水提物灌胃給藥予家兔，結(jié)果，頭花寥水提物組與對(duì)照組比較，體溫?zé)o顯著性差異，但能降低靜脈注射傷寒副傷寒菌苗引起的家兔的發(fā)熱體溫。任光友等，以頭花寥水提物分別灌胃給藥家兔、大鼠，與空白組和速尿?qū)φ战M比較尿量。結(jié)果顯示頭花寥水提物對(duì)家兔和大鼠無(wú)明顯利尿作用。徐英春等人采用瓊脂稀釋法檢測(cè)了頭花寥對(duì)10株淋病奈瑟球菌(淋球菌)的體外抑菌活性，結(jié)果頭花寥對(duì)淋球菌有抑菌活性。其對(duì)10株淋球菌的最小抑菌濃度范圍為8 32g/L，平均值為 11.2g/L。中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)說(shuō)明書(shū)CN1054899A (中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?0107810. 7，
公開(kāi)日1991 年10月2日)中公開(kāi)了一種泌感靈沖劑、糖漿生產(chǎn)工藝。該生產(chǎn)工藝是以四季草為原料用水煎煮30-60分鐘，提取液過(guò)濾濃縮，將其上清液減壓濃縮成膏，再用60-70%乙醇提取，將乙醇提取液真空干燥，得四季紅浸膏，進(jìn)一步配制成沖劑或糖漿劑，據(jù)信其具有解毒、散瘀、利尿、通淋的功效。中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì)1998年編的中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部《藥品標(biāo)準(zhǔn)一中藥成方制劑》(第十七冊(cè))中收載了名為“熱淋清顆粒”的中成藥制劑，其是通過(guò)將頭花寥加水煎煮兩次后過(guò)濾濃縮制成的。CN 1481832A(中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?2129686. 3，
公開(kāi)日2004年3月17日)和CN1483466A(中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?3146381. 9，
公開(kāi)日2004年3月24日)公開(kāi)了頭花寥提取物，其基本上是由以下步驟制備的a.由頭花寥全草的鮮品或干品用水分兩次煎煮或者用醇水混合物分二至三次回流提取，每次1-2小時(shí)，合并煎煮液，過(guò)濾濃縮至20° C時(shí)的相對(duì)密度為I. 2，噴霧干燥或減壓干燥得到；或者，b.由頭花寥全草及其水提藥渣經(jīng)二氧化碳超臨界萃取得到。據(jù)信此提取物可用于抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、利尿、治療泌尿系統(tǒng)結(jié)石、治療腎盂腎炎以及前列腺炎。盡管目前有諸多關(guān)于制備頭花寥提取物的報(bào)道，然而本領(lǐng)域技術(shù)人員仍然期待從頭花寥獲得有效的產(chǎn)品。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是期待從頭花寥獲得一種有效的產(chǎn)品。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，使用醇提取頭花寥，得到的提取物經(jīng)特定的大孔樹(shù)脂洗脫所獲得的洗脫物，其在生物活性方面具有令人期待的效果。本發(fā)明基于此發(fā)現(xiàn)而得以完成。為此，本發(fā)明第一方面提供了一種頭花寥提取物，其基本上由包括以下步驟的方法制備得到(I)將頭花寥地上部分鮮品或干品加5-15倍量(例如5-12倍量，例如6-10倍量) 的50 90%(例如60 80%，例如65 75%，例如約70%)乙醇回流提取1-3次(例如2次)，每次1-3小時(shí)(例如約I. 5小時(shí))，過(guò)濾，使濾液濃縮、干燥，得醇浸膏；(2)使醇浸膏混懸于甲醇中，超聲處理0. 5飛小時(shí)(例如0. 5^3小時(shí)，例如f 2小時(shí)，例如約I. 5小時(shí))，離心，將上清液加載到MCI大孔樹(shù)脂柱(例如，每IOOg浸膏使用樹(shù)脂的量為0. 5-4升，例如1-3升，例如I. 5-2. 5升，例如2升)上；(3)用水，10%、20%、30%、35%、40%、45%、50%、60%、70%、80%、100% 甲醇依次進(jìn)行梯度洗脫(例如每種溶劑用量為0. 5^5倍柱體積，例如0. 5^2. 5倍柱體積，例如0. 5^2倍柱體積，例如I倍柱體積)，收集各部分洗脫液，回收溶劑，由不同溶劑洗脫獲得的部位干燥，得到50%-80%之間任意濃度間隔或濃度點(diǎn)的甲醇洗脫物，或者它們的混合物，即得。根據(jù)本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其中步驟(3)所得甲醇洗脫物是50%甲醇洗脫物(在本發(fā)明中可簡(jiǎn)稱(chēng)為部位E)。根據(jù)本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其中步驟(3)所得甲醇洗脫物是50%_60%甲醇洗脫物(在本發(fā)明中可簡(jiǎn)稱(chēng)為部位F)。根據(jù)本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其中步驟(3)所得甲醇洗脫物是60%_80%甲醇洗脫物(在本發(fā)明中可簡(jiǎn)稱(chēng)為部位G)。根據(jù)本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其中步驟(3)所得甲醇洗脫物是50%_80%之間甲醇洗脫物的混合物(在本發(fā)明中可簡(jiǎn)稱(chēng)為部位Y)。在本發(fā)明中，該部位Y可以是部位E至部位G干燥品的混合物，亦可以是50%-80%甲醇洗脫所得混合液經(jīng)除溶劑干燥后的干燥品。根據(jù)本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其中部位E中含有木脂素和/或黃酮苷類(lèi)，例如含有木脂素和黃酮苷混合物。根據(jù)本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其中部位F中含有黃酮苷類(lèi)。根據(jù)本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其中部位G中含有黃酮苷元類(lèi)。根據(jù)本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其中部位Y中含有木脂素和/或黃酮苷類(lèi)和/或黃酮苷元類(lèi)，例如槲皮素-3-0- ^ -D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-吡喃葡萄糖苷、石榴皮素B/carpinusin、槲皮苷、山奈酹3-(2-沒(méi)食子酰基葡萄糖苷)。根據(jù)本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其照超高效液相色譜-飛行時(shí)間-質(zhì)譜聯(lián)用法(在本發(fā)明中可簡(jiǎn)稱(chēng)為UPLC-T0F-MS)測(cè)定，結(jié)果
(e)在保留時(shí)間12. 8-13. 8min之間(例如約13. 3min處)和保留時(shí)間14. 8-15. 8min之間(例如約15. 3min處)顯示黃酮苷類(lèi)(例如槲皮素-3-0-0 -D-吡喃葡萄糖苷、石槽皮素B/carpinusin)的色譜峰,和/或在保留時(shí)間14. 4-15. 4min之間(例如約14. 9min處)顯示木脂素(例如nudiposide)的色譜峰；(f)在保留時(shí)間12. 8-13. 8min之間(例如約13. 3min處)、保留時(shí)間13. 8-14. 8min之間(例如約14. 3min處)和保留時(shí)間14. 8-15. 8min之間(例如約15. 3min處)顯示黃酮苷類(lèi)(例如槲皮素-3-0-0 -D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-吡喃葡萄糖苷、石榴皮素B/carpinusin)的色譜峰；(g)在保留時(shí)間16. 6-17. 6min之間(例如約17. Imin處)和保留時(shí)間21. 4-22. 4min之間(例如約21. 9min處)顯示黃酮苷元(例如槲皮苷、山奈酚3-(2-沒(méi)食子酰基葡萄糖苷))的色譜峰；和/或(y)顯示以上(e)至(g)中所示任一或全部色譜峰； 其中，UPLC-T0F-MS的測(cè)定方法如下(i)供試液配制稱(chēng)取適量頭花寥提取物粉末，加入70%甲醇制成濃度約5mg/ml的混懸液，超聲使盡量溶解，混懸液稀釋10倍，過(guò)濾，進(jìn)樣2 Ul作質(zhì)譜檢測(cè)；(ii)色譜及質(zhì)譜分析條件色譜柱AcquityBEH C18 柱(2. IXlOOmm, I. 7iim)，柱溫40°C ;流速0. 35ml/min;進(jìn)樣量2iU ;質(zhì)譜條件離子源ESI源；干燥氣體溫度180°C ;毛細(xì)管電壓4500eV ;檢測(cè)模式負(fù)離子模式；噴霧壓力2. 5bar ;干燥氣(N2)流速8L/min ;掃描范圍100-2000amu ;碰撞能量IOev ;以0. 1%甲酸水溶液為流動(dòng)相A，0. 1%甲酸乙腈溶液為流動(dòng)相B，按下表規(guī)定的程序進(jìn)行梯度洗脫
時(shí)間(min) A(%)B(%)
~0955
0. 5955
~2081751875
~28 0 100 ~300100
30. I955
""32955根據(jù)本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其照所述超高效液相色譜-飛行時(shí)間-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定，結(jié)果(e)在保留時(shí)間12. 8-13. 8min之間(例如約13. 3min處)和保留時(shí)間14. 8-15. 8min之間(例如約15. 3min處)顯示黃酮苷類(lèi)(例如槲皮素-3-0- ^ -D-吡喃葡萄糖苷、石槽皮素B/carpinusin)的色譜峰,和/或在保留時(shí)間14. 4-15. 4min之間(例如約14. 9min處)顯示木脂素(例如nudiposide)的色譜峰。根據(jù) 本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其照所述超高效液相色譜-飛行時(shí)間-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定，結(jié)果(f)在保留時(shí)間12. 8-13. 8min之間(例如約13. 3min處)、保留時(shí)間
13.8-14. 8min之間(例如約14. 3min處)和保留時(shí)間14. 8-15. 8min之間(例如約15. 3min處)顯示黃酮苷類(lèi)(例如槲皮素-3-0-0 -D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-吡喃葡萄糖苷、石榴皮素B/carpinusin)的色譜峰。根據(jù)本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其照所述超高效液相色譜-飛行時(shí)間-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定，結(jié)果(g)在保留時(shí)間16. 6-17. 6min之間(例如約17. Imin處)和保留時(shí)間21. 4-22. 4min之間(例如約21. 9min處)顯示黃酮苷元(例如槲皮苷、山奈酚3-(2-沒(méi)食子酰基葡萄糖苷))的色譜峰。根據(jù)本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其照所述超高效液相色譜-飛行時(shí)間-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定，結(jié)果(e)在保留時(shí)間12. 8-13. 8min之間(例如約13. 3min處)和保留時(shí)間
14.8-15. 8min之間(例如約15. 3min處)顯示黃酮苷類(lèi)(例如槲皮素-3-0-0 -D-吡喃葡萄糖苷、石槽皮素B/carpinusin)的色譜峰,和/或在保留時(shí)間14. 4-15. 4min之間(例如約14. 9min處)顯示木脂素(例如nudiposide)的色譜峰；(f)在保留時(shí)間12. 8-13. 8min之間(例如約13. 3min處)、保留時(shí)間13. 8-14. 8min之間(例如約14. 3min處)和保留時(shí)間14. 8-15. 8min之間(例如約15. 3min處)顯示黃酮苷類(lèi)(例如槲皮素-3-0-0 -D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-吡喃葡萄糖苷、石榴皮素B/carpinusin)的色譜峰；和/或(g)在保留時(shí)間16. 6-17. 6min之間(例如約17. Imin處)和保留時(shí)間21. 4-22. 4min之間(例如約21. 9min處)顯示黃酮苷元(例如槲皮苷、山奈酚3-(2-沒(méi)食子酰基葡萄糖苷))的色譜峰。根據(jù)本發(fā)明第一方面的頭花寥提取物，其具有本發(fā)明第二方面任一實(shí)施方案所述特征。本發(fā)明第二方面提供了一種頭花寥提取物，其照超高效液相色譜-飛行時(shí)間-質(zhì)譜聯(lián)用法(在本發(fā)明中可簡(jiǎn)稱(chēng)為UPLC-T0F-MS)測(cè)定，結(jié)果(e)在保留時(shí)間12. 8-13. 8min之間(例如約13. 3min處)和保留時(shí)間14. 8-15. 8min之間(例如約15. 3min處)顯示黃酮苷類(lèi)(例如槲皮素-3-0-0 -D-吡喃葡萄糖苷、石槽皮素B/carpinusin)的色譜峰,和/或在保留時(shí)間14. 4-15. 4min之間(例如約14. 9min處)顯示木脂素(例如nudiposide)的色譜峰；(f)在保留時(shí)間12. 8-13. 8min之間(例如約13. 3min處)、保留時(shí)間13. 8-14. 8min之間(例如約14. 3min處)和保留時(shí)間14. 8-15. 8min之間(例如約15. 3min處)顯示黃酮苷類(lèi)(例如槲皮素-3-0-0 -D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-吡喃葡萄糖苷、石榴皮素B/carpinusin)的色譜峰；(g)在保留時(shí)間16. 6-17. 6min之間(例如約17. Imin處)和保留時(shí)間21. 4-22. 4min之間(例如約21. 9min處)顯示黃酮苷元(例如槲皮苷、山奈酚3-(2-沒(méi)食子酰基葡萄糖苷))的色譜峰；和/或
(y)顯示以上(e)至(g)中所示任一或全部色譜峰；其中，UPLC-T0F-MS的測(cè)定方法如下(i)供試液配制稱(chēng)取適量頭花寥提取物粉末，加入70%甲醇制成濃度約5mg/ml的混懸液，超聲使盡量溶解，混懸液稀釋10倍，過(guò)濾，進(jìn)樣2 Ul作質(zhì)譜檢測(cè)；(ii)色譜及質(zhì)譜分析條件色譜柱AcquityBEH C18 柱(2. IXlOOmm, I. 7iim)，柱溫40°C ;流速0. 35ml/min;進(jìn)樣量2iU ;質(zhì)譜條件離子源ESI源；干燥氣體溫度180°C ;毛細(xì)管電壓4500eV ;檢測(cè)模式負(fù)離子模式；噴霧壓力2. 5bar ;干燥氣(N2)流速8L/min ;掃描范圍100-2000amu ;碰撞能量IOev ;以0. 1%甲酸水溶液為流動(dòng)相A，0. 1%甲酸乙腈溶液為流動(dòng)相B，按下表規(guī)定的程序進(jìn)行梯度洗脫
權(quán)利要求
1.一種頭花寥提取物，其基本上由包括以下步驟的方法制備得到 (1)將頭花寥地上部分鮮品或干品加5-15倍量(例如5-12倍量，例如6-10倍量)的50 90%(例如60 80%，例如65 75%，例如約70%)乙醇回流提取1-3次(例如2次)，每次1-3小時(shí)(例如約I. 5小時(shí))，過(guò)濾，使濾液濃縮、干燥，得醇浸膏； (2)使醇浸膏混懸于甲醇中，超聲處理0.5飛小時(shí)(例如0. 5 3小時(shí)，例如廣2小時(shí)，例如約I. 5小時(shí))，離心，將上清液加載到MCI大孔樹(shù)脂柱(例如，每IOOg浸膏使用樹(shù)脂的量為0. 5-4升，例如1-3升，例如I. 5-2. 5升，例如2升)上； (3)用水，10%、20%、30%、35%、40%、45%、50%、60%、70%、80%、100%甲醇依次進(jìn)行梯度洗脫(例如每種溶劑用量為0. 5^5倍柱體積，例如0. 5^2. 5倍柱體積，例如0. 5^2倍柱體積，例如I倍柱體積)，收集各部分洗脫液，回收溶劑，由不同溶劑洗脫獲得的部位干燥，得到50%-80%之間任意濃度間隔或濃度點(diǎn)的甲醇洗脫物，或者它們的混合物，即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求I的頭花寥提取物，其特征在于， 步驟(3)所得甲醇洗脫物是50%甲醇洗脫物(部位E)； 步驟(3)所得甲醇洗脫物是50%-60%甲醇洗脫物(部位F)； 步驟(3)所得甲醇洗脫物是60%-80%甲醇洗脫物(部位G);和/或 步驟(3)所得甲醇洗脫物是50%-80%之間甲醇洗脫物的混合物(部位Y)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的頭花寥提取物，其特征在于， 部位E中含有木脂素和/或黃酮苷類(lèi)，例如含有木脂素和黃酮苷混合物； 部位F中含有黃酮苷類(lèi)； 部位G中含有黃酮苷元類(lèi)；和/或 部位Y中含有木脂素和/或黃酮苷類(lèi)和/或黃酮苷元類(lèi)，例如槲皮素-3-0- ^ -D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-吡喃葡萄糖苷、石榴皮素B/carpinusin、槲皮苷、山奈酚3-(2-沒(méi)食子酰基葡萄糖苷)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的頭花寥提取物，其照超高效液相色譜-飛行時(shí)間-質(zhì)譜聯(lián)用法(UPLC-T0F-MS)測(cè)定，結(jié)果 (e)在保留時(shí)間12.8-13. 8min之間(例如約13. 3min處)和保留時(shí)間14. 8-15. 8min之間(例如約15. 3min處)顯示黃酮苷類(lèi)(例如槲皮素_3_0-P-D-吡喃葡萄糖苷、石榴皮素B/carpinusin)的色譜峰,和/或在保留時(shí)間14. 4-15. 4min之間(例如約14. 9min處)顯示木脂素(例如nudiposide)的色譜峰； (f)在保留時(shí)間12.8-13.8min之間(例如約13.3min處)、保留時(shí)間13. 8_14. 8min之間(例如約14. 3min處)和保留時(shí)間14. 8-15. 8min之間(例如約15. 3min處)顯示黃酮苷類(lèi)(例如槲皮素-3-0-0 -D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-吡喃葡萄糖苷、石榴皮素B/carpinusin)的色譜峰； (g)在保留時(shí)間16.6-17. 6min之間(例如約17. Imin處)和保留時(shí)間21. 4-22. 4min之間(例如約21.9min處)顯示黃酮苷元(例如槲皮苷、山奈酚3-(2-沒(méi)食子酰基葡萄糖苷))的色譜峰；和/或 (y)顯示以上(e)至(g)中所示任一或全部色譜峰； 其中，UPLC-T0F-MS的測(cè)定方法如下 (i)供試液配制稱(chēng)取適量頭花寥提取物粉末，加入70%甲醇制成濃度約5mg/ml的混懸液，超聲使盡量溶解，混懸液稀釋10倍，過(guò)濾，進(jìn)樣2 Ul作質(zhì)譜檢測(cè)； (ii)色譜及質(zhì)譜分析條件色譜柱:Acquity BEH C18 柱(2. I X 100mm，I. 7 u m),柱溫40°C ;流速0. 35ml/min ;進(jìn)樣量2iil ;質(zhì)譜條件離子源ESI源；干燥氣體溫度180°C ;毛細(xì)管電壓4500eV ;檢測(cè)模式負(fù)離子模式；噴霧壓力2. 5bar ;干燥氣(N2)流速8L/min ;掃描范圍100-2000amu ；碰撞能量IOev ;以0. 1%甲酸水溶液為流動(dòng)相A，0. 1%甲酸乙腈溶液為流動(dòng)相B，按下表規(guī)定的程序進(jìn)行梯度洗脫
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)的頭花寥提取物，其特征在于如說(shuō)明書(shū)第一方面任一實(shí)施方案所述。
6.一種頭花寥提取物，其照超高效液相色譜-飛行時(shí)間-質(zhì)譜聯(lián)用法(UPLC-T0F-MS)測(cè)定，結(jié)果 (e)在保留時(shí)間12.8-13. 8min之間(例如約13. 3min處)和保留時(shí)間14. 8-15. 8min之間(例如約15. 3min處)顯示黃酮苷類(lèi)(例如槲皮素_3_0-P-D-吡喃葡萄糖苷、石榴皮素B/carpinusin)的色譜峰,和/或在保留時(shí)間14. 4-15. 4min之間(例如約14. 9min處)顯示木脂素(例如nudiposide)的色譜峰； (f)在保留時(shí)間12.8-13. 8min之間(例如約13. 3min處)、保留時(shí)間13. 8-14. 8min之間(例如約14. 3min處)和保留時(shí)間14. 8-15. 8min之間(例如約15. 3min處)顯示黃酮苷類(lèi)(例如槲皮素-3-0-0 -D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-吡喃葡萄糖苷、石榴皮素B/carpinusin)的色譜峰； (g)在保留時(shí)間16.6-17. 6min之間(例如約17. Imin處)和保留時(shí)間21. 4-22. 4min之間(例如約21. 9min處)顯示黃酮苷元(例如槲皮苷、山奈酚3-(2-沒(méi)食子酰基葡萄糖苷))的色譜峰；和/或 (y)顯示以上(e)至(g)中所示任一或全部色譜峰； 其中，UPLC-T0F-MS的測(cè)定方法如下 (i)供試液配制稱(chēng)取適量頭花寥提取物粉末，加入70%甲醇制成濃度約5mg/ml的混懸液，超聲使盡量溶解，混懸液稀釋10倍，過(guò)濾，進(jìn)樣2 Ul作質(zhì)譜檢測(cè)；(ii)色譜及質(zhì)譜分析條件色譜柱:Acquity BEH C18 柱(2. I X 100mm，I. 7 u m),柱溫40°C ;流速0. 35ml/min ;進(jìn)樣量2iil ;質(zhì)譜條件離子源ESI源；干燥氣體溫度180°C ;毛細(xì)管電壓4500eV ;檢測(cè)模式負(fù)離子模式；噴霧壓力2. 5bar ;干燥氣(N2)流速8L/min ;掃描范圍100-2000amu ；碰撞能量IOev ;以0. 1%甲酸水溶液為流動(dòng)相A，0. 1%甲酸乙腈溶液為流動(dòng)相B，按下表規(guī)定的程序進(jìn)行梯度洗脫
7.根據(jù)權(quán)利要求6的頭花寥提取物，其基本上由包括以下步驟的方法制備得到 (1)將頭花寥地上部分鮮品或干品加5-15倍量(例如5-12倍量，例如6-10倍量)的50 90%(例如60 80%，例如65 75%，例如約70%)乙醇回流提取1-3次(例如2次)，每次1-3小時(shí)(例如約I. 5小時(shí))，過(guò)濾，使濾液濃縮、干燥，得醇浸膏； (2)使醇浸膏混懸于甲醇中，超聲處理0.5飛小時(shí)(例如0. 5 3小時(shí)，例如廣2小時(shí)，例如約I. 5小時(shí))，離心，將上清液加載到MCI大孔樹(shù)脂柱(例如，每IOOg浸膏使用樹(shù)脂的量為0. 5-4升，例如1-3升，例如I. 5-2. 5升，例如2升)上； (3)用水，10%、20%、30%、35%、40%、45%、50%、60%、70%、80%、100%甲醇依次進(jìn)行梯度洗脫(例如每種溶劑用量為0. 5^5倍柱體積，例如0. 5^2. 5倍柱體積，例如0. 5^2倍柱體積，例如I倍柱體積)，收集各部分洗脫液，回收溶劑，由不同溶劑洗脫獲得的部位干燥，得到50%-80%之間任意濃度間隔或濃度點(diǎn)的甲醇洗脫物，或者它們的混合物，即得。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的頭花寥提取物，其特征在于 步驟⑶所得甲醇洗脫物是50%甲醇洗脫物(部位E)； 步驟(3)所得甲醇洗脫物是50%-60%甲醇洗脫物(部位F)； 步驟(3)所得甲醇洗脫物是60%-80%甲醇洗脫物(部位G)； 步驟(3)所得甲醇洗脫物是50%-80%之間甲醇洗脫物的混合物(部位Y)； 部位E中含有木脂素和/或黃酮苷類(lèi)，例如含有木脂素和黃酮苷混合物； 部位F中含有黃酮苷類(lèi)； 部位G中含有黃酮苷元類(lèi)；和/或 部位Y中含有木脂素和/或黃酮苷類(lèi)和/或黃酮苷元類(lèi)，例如槲皮素-3-0- ^ -D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-吡喃葡萄糖苷、石榴皮素B/carpinusin、槲皮苷、山奈酚3-(2-沒(méi)食子酰基葡萄糖苷)。
9.根據(jù)權(quán)利要求6-8任一項(xiàng)的頭花寥提取物，其特征在于如說(shuō)明書(shū)第二方面任一實(shí)施方案所述。
10.制備權(quán)利要求1-5或權(quán)利要求6-9任一項(xiàng)所述頭花寥提取物的方法，其基本上包括 下步驟 (1)將頭花寥地上部分鮮品或干品加5-15倍量(例如5-12倍量，例如6-10倍量)的50 90%(例如60 80%，例如65 75%，例如約70%)乙醇回流提取1-3次(例如2次)，每次1-3小時(shí)(例如約I. 5小時(shí))，過(guò)濾，使濾液濃縮、干燥，得醇浸膏； (2)使醇浸膏混懸于甲醇中，超聲處理0.5飛小時(shí)(例如0. 5 3小時(shí)，例如廣2小時(shí)，例如約I. 5小時(shí))，離心，將上清液加載到MCI大孔樹(shù)脂柱(例如，每IOOg浸膏使用樹(shù)脂的量為0. 5-4升，例如1-3升，例如I. 5-2. 5升，例如2升)上； (3)用水，10%、20%、30%、35%、40%、45%、50%、60%、70%、80%、100%甲醇依次進(jìn)行梯度洗脫(例如每種溶劑用量為0. 5^5倍柱體積，例如0. 5^2. 5倍柱體積，例如0. 5^2倍柱體積，例如I倍柱體積)，收集各部分洗脫液，回收溶劑，由不同溶劑洗脫獲得的部位干燥，得到50%-80%之間任意濃度間隔或濃度點(diǎn)的甲醇洗脫物，或者它們的混合物，即得。
11.權(quán)利要求1-5或權(quán)利要求6-9任一項(xiàng)所述頭花寥提取物在制備清熱利濕用藥，利尿通淋用藥，泌尿系統(tǒng)感染或結(jié)石用藥，腎盂腎炎用藥，解毒、散瘀用藥，抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛用藥，前列腺炎用藥的藥物中的用途。
12.—種藥物組合物,其中包含權(quán)利要求1-5或權(quán)利要求6-9任一項(xiàng)所述頭花寥提取物，以及任選的藥學(xué)可接受的載體。
全文摘要
本發(fā)明涉及熱淋清顆粒藥材醇提有效部位及其制備方法。具體地，本發(fā)明涉及一種頭花蓼提取物，其制法包括(1)將頭花蓼地上部分鮮品或干品加5-15倍量的50~90%乙醇回流提取1-3次，過(guò)濾，使濾液濃縮、干燥，得醇浸膏；(2)使醇浸膏混懸于甲醇中，超聲處理0.5~5小時(shí)，離心，將上清液加載到MCI大孔樹(shù)脂柱上；(3)用水，10%~100%甲醇依次進(jìn)行梯度洗脫，收集各部分洗脫液，回收溶劑，由不同溶劑洗脫獲得的部位干燥，得到50%-80%之間任意濃度間隔或濃度點(diǎn)的甲醇洗脫物，或者它們的混合物，即得。本發(fā)明頭花蓼提取物具有如說(shuō)明書(shū)所述的有益效果。
文檔編號(hào)A61P29/00GK102772497SQ20121029987
公開(kāi)日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2012年8月22日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月22日
發(fā)明者唐靖雯, 姜志宏, 張麗艷, 李孟林, 梁斌, 潘梅, 謝宇 申請(qǐng)人:貴州威門(mén)藥業(yè)股份有限公司