專利名稱：4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯固體分散體及其制備方法
技術領域：
本發明涉及藥物組合物領域，具體涉及4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯的固 體分散體及其制備方法。
背景技術：
惡性腫瘤嚴重威脅著人類的生命，“第六屆中國腫瘤學術大會"最新資料顯 示，中國每年新發現癌癥患者有220多萬人，死亡160多萬人，近20年來腫瘤死亡率上 升了 29.42%。傳統化療藥物和放療等殺傷性治療手段，會導致骨髓抑制、消化道反應、 脫發、肝腎損害等嚴重的不良反應，而腫瘤細胞的誘導分化治療不殺傷正常細胞，患者 副反應小，日益受到廣泛關注。目前誘導分化劑全反式維甲酸(all-trans retinoic acid, ATRA)已成為治療白血病等惡性腫瘤的首選藥物之一。但是，ATRA引起的皮膚、粘膜 損害、惡心、嘔吐、維甲酸綜合征等不良反應以及耐藥性與高復發率，極大限制了其應 用。因此國內外對維甲酸類藥物的結構展開大量的修飾工作，其中，美國強生公司開發 的化合物芬維A胺毒性遠較其它維甲酸類化合物低，且耐藥性發生率低，對多種實體瘤 均有直接的抑制作用，目前國外已進入了臨床試驗，但該藥水溶性差，生物利用度低。本課題組以芬維A胺為出發點優化設計并合成了一系列含有吸電子基團-三 氟甲基或三氟甲氧基的維甲酸衍生物25個，隨后考察其對白血病細胞株NB4細胞的抑 制增殖和誘導分化活性，篩選出了抑制增殖誘導分化活性最強的4-氨基-2-三氟甲基 苯基維甲酸酯(4-amino-2-trifluoromethy卜phenyl retinate，ATPR)。該化合物在生命體 內酯酶的催化下緩慢釋放出維甲酸，可以大大降低維甲酸的新陳代謝速度，因此可減少 由于代謝速度過快所引起的副作用且具有較好的穩定性，經過進一步研究和開發將成為 治療惡性腫瘤和白血病的創新性藥物。目前我們已經申請了中國專利1項(申請號 CN200810110794.1)和國際專利申請1項(申請號PCT/CN2009/000605)。但本發明前 期研究發現，此藥物水中溶解度較低，疏水性強，將其制成分散片等劑型亦不能明顯提 高其溶出速度，口服生物利用度低，勢必直接影響到其制劑開發和臨床應用。

發明內容
本發明的目的是針對上述4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯的水溶性低、溶出 度差等問題，提供以一種水溶性好、溶出速度快的固體分散體。本發明的另一個目的是提供上述固體分散體的制備方法。本發明在前期研究曾采用聚乙二醇6000(PEG6000)作為載體制備固體分散體， 發現只有將載體和藥物的比例高于9 1時，才有明顯的促進溶出作用，但是考慮到固體 分散體將被制成膠囊或片劑等劑型，屆時再添加一定比例的輔料將會導致偏重過大的現 象，不利于患者吞咽。在后續的試驗中，發明人發現在眾多的固體分散體載體中，最適合用來制備4_氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯固體分散體的是聚氧乙烯和聚氧丙烯的嵌段共聚物泊 洛沙姆188 (Poloxamer 188，Lutrol F68)，在較低的比例情況下就能夠起到較好的增溶效果。本發明采用固體分散技術，利用聚氧乙烯和聚氧丙烯的嵌段共聚物泊洛沙姆 188 (Lutrol F68)作為載體，制備4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯的固體分散體，包 括4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯和聚氧乙烯和聚氧丙烯的嵌段共聚物，質量比為 1 2-1 12 ；先將載體60°C水浴加熱熔融，將4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯用適 量無水乙醇溶解，待載體完全熔融時加入4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯溶液，攪拌 均勻，加熱揮發除去無水乙醇，待混合物呈粘稠狀態時，加入適量比例的填充劑，攪拌 均勻，迅速冰浴冷卻使其固化，-20°C冰箱冷凍過夜，置真空干燥箱中干燥24h，取出， 粉碎。上述填充劑為乳糖或微晶纖維素。傳統的固體分散體制備方法的干燥程序均采用直接加熱揮干有機溶劑的方法， 干燥后期混合物較為粘稠，干燥效率低；干燥所得的產物粉碎時較粘，很大一部分產物 黏在粉碎容器上，導致實驗收率較低；且產物粉末流動性差，不能滿足后續制劑要求。 本發明采用的制備方法，因為加入填充劑可以加快干燥步驟，產物脆性增強，易于粉 碎，且粉末流動性增加，利于后續制劑工藝的完成。所得的固體分散體進行差示掃描量熱分析，結果顯示，4-氨基-2-三氟甲基苯 基維甲酸酯在55.52°C有一吸熱峰，Lutrol F68在50.22°C有一吸熱峰，固體分散體4-氨 基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯吸熱峰消失，在48.52°C有一吸收峰，較Lutrol F68的吸熱 峰前移，說明固體分散體中4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯與Lutrol F68形成低共熔 物。物理混合物DSC曲線4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯吸熱峰消失，與固體分散 體的DSC曲線相似，48.89°C有一吸熱峰，其原因是，在升溫過程中，Lutrol F68逐漸熔 融，4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯熔于其中，在Lutrol F68熔點附近已經形成共熔 物。固體分散體中4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯以分子的形式存在，而不是結晶的 形式。對不同比例的固體分散體進行溶出實驗，結果顯示，ATPR-Lutrol F68固體分散 體中載體載體比例越大，藥物溶出越快。其中，1 2比例的固體分散體雖然溶出速率高 于物理混合物和原料藥，但是增加溶出的效果不明顯；1 4比例以上的溶出效果較好， 其中1 12固體分散體10分鐘累計溶出率接近90%，1 8與1 12固體分散體60min 累計溶出率均在95%以上，但是過高的載體比例可能會產生過飽和的現象，即為過飽和 溶液，極易重新聚集成大顆粒，導致溶出實驗過程中會產生累計溶出速率稍有下降的現 象，因此優選比例范圍為1 4-1 8，最優比例為1 8制備固體分散體，進行進一步 制劑研究。制得的固體分散體可與普通的藥劑填充劑配合，制成適當的劑型，如針劑、輸 液、片劑、粉針、顆粒劑、膠囊劑、片劑等。通常以口服制劑為主，當然也可以采用 其他給藥方式。本發明制備的固體分散體在制備誘導分化抗腫瘤藥物的制備中起重要作 用，為患者提供新一代的、副作用小、療效好的抗腫瘤新藥。本發明的有益效果本發明以Lutrol F68為載體，制備了 4_氨基_2_三氟甲基苯基維甲酸酯的固體分散體，顯著提高了其溶出速度以及溶解度；當藥物與載體的比例 達到1 8與1 12時，固體分散體60min累計溶出率均在95%以上，為提高其生物利 用度提供了新的手段。本發明采用溶劑熔融加填充劑的方法制備固體分散體，加快了干 燥步驟，使產物脆性增強，易于粉碎，且粉末流動性增加，解決了傳統干燥方法存在的 產物粘性大、難粉碎、流動性差的缺點，利于后續制劑工藝的完成。


圖1原料藥、物理混合物、固體分散體的體外溶出曲線圖；圖2原料藥、物理混合物、固體分散體的差示掃描量熱圖譜；其中圖1中a為1 12固體分散體；b為1 8固體分散體；C為1 4固體 分散體；d為1 2固體分散體固體分散體；e為1 4物理混合物；f為ATPR原料 藥。圖2中a為ATPR原料藥；b為Lutrol F68 ； c為ATPR-Lutrol F68物理混合物；d為 ATPR-Lutrol F68 固體分散體(1 4)
具體實施例方式實施例1固體分散體、物理混合物的制備及溶出速度實驗1儀器與試藥1.1 儀器ZRS-8G智能溶出儀(天津大學無線電廠)，高效液相色譜儀(CTO-IOAS柱溫 箱，LC-20AT泵，SPD-20AV紫外檢測器，日本島津公司)，DZF-6050真空干燥箱(上 海新苗醫療器械制造有限公司)，RVlO旋轉蒸發儀及HBlO水浴鍋(IKA實驗室技術有限 公司)，DSCQ2000差示掃描量熱儀(美國TA儀器公司)。1.2 試藥ATPR(本實驗室提供，純度98%以上)，Lutrol F68 (BASF)，十二烷基硫酸鈉
(分析純，天津博迪化工有限公司)，無水乙醇(分析純，國藥集團化學試劑有限公司)， 異丙醇(分析純，天津博迪化工有限公司)，甲醇(色譜純，天津四友精細化學品有限公 司)。2方法與結果2.1 ATPR固體分散體的制備按照1 2、1 4、1 8、1 12稱取4_氨基_2_三氟甲基苯基維甲酸酯與 Lutrol F68,先將載體60°C水浴加熱熔融，將4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯用適量 無水乙醇溶解，待載體完全熔融時加入4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯溶液，攪拌均 勻，加熱揮發除去無水乙醇，待混合物呈粘稠狀態時，加入與固體分散體重量比0.5 1 的微晶纖維素，攪拌均勻，迅速冰浴冷卻使其固化，-20°C冰箱冷凍過夜，置真空干燥箱 中干燥24h，取出，粉碎。2.2檢測方法的建立與確證2.2.1檢測波長的確定以甲醇為溶劑，配置10 μ g/ml濃度的ATPR溶液，進行紫外掃描，結果藥物在 367nm有最大吸收。
2.2.2 HPLC 色譜條件色譜柱大連伊利特Hypersil ODS柱(250mmX 4.6mm，5 μ m)；流動相甲 醇-水(92 8)；流速1.000mL/min ；檢測波長367nm ；柱溫30°C ；進樣量 20 μ L。2.2.3標準曲線的制備精密稱取ATPR5.00mg于50mL量瓶中，甲醇釋至刻度，得濃度為O.lOOmg/ ml的母液。精密量取ATPR母液適量，用蒸餾水稀釋配成0.100、0.300、0.500、1.00、 3.00、5.00、10.00和20.00 μ g/mL的系列濃度標準液。分別進樣測定，以峰面積A對濃 度C進行線性回歸，得標準曲線方程為A= 112773C+2576.3，R= 1。2.2.4回收率試驗用分別于載體材料的甲醇溶液中，按照藥物與載體1 4比例，精密加入不同量 的ATPR，配制低、中、高3種濃度(1、5和lOmg/L)的供試品溶液，每種濃度平行配制 5份，各取20 μ L進行HPLC測定，考察回收率，分別為98.42%，100.20%, 101.86%。2.2.5精密度試驗取低、中、高濃度(1、5和lOmg/L)的溶液各1份，進行HPLC測定，連續測 定 5 次，RSD 分別為 0.28%，0.093%, 0.071%。2.3溶出速率試驗將相當于ATPR 5mg的固體分散體裝入膠囊，按照《中國藥典》2010年版二部 附錄X C溶出度測定第二法(槳法)進行試驗，溶出介質為25%異丙醇制成的0.5%十二 烷基硫酸鈉溶液1000ml，轉速為100r/min，溫度(37士0.5) °C。分別在5、10、20、 30、45、60min取樣5mL，0.45 μ m微孔濾膜濾過，同時補加5mL同溫同體積溶出介質， 取續濾液，用HPLC儀器測定ATPR的含量。測定結果代入標準曲線計算濃度，并換算 成累計溶出百分率。將ATPR原料藥5mg、比例為1 4的ATPR-Lutrol F68物理混合物(相當于 ATPR 5mg)分別裝入膠囊，按照上述方法測定，與固體分散體的累計溶出百分率進行比 較。結果見圖1。結果顯示，ATPR-Lutrol F68固體分散體中載體載體比例越大，藥物溶出越快。 其中，1 2比例的固體分散體雖然溶出速率高于物理混合物和原料藥，但是增加溶出的 效果不明顯；1 4比例以上的溶出效果較好，其中1 12固體分散體10分鐘累計溶出 率接近90%，1 8與1 12固體分散體60min累計溶出率均在95%以上，但是過高的 載體比例可能會產生過飽和的現象，即為過飽和溶液，極易重新聚集成大顆粒，導致溶 出實驗過程中會產生累計溶出速率稍有下降的現象，因此優選比例范圍為1:4-1: 8， 最優比例為1 8制備固體分散體，進行進一步制劑研究。2.4差示掃描量熱分析稱取ATPR、Lutrol F68、ATPR-Lutrol F68 物理混合物、ATPR-Lutrol F68 固體
分散體(1 4)各2-3mg進行差示熱掃描(DSC)，測試條件以空鋁坩堝為參比，N2氣 氛，升溫速度10°C · mm1,掃描范圍O 90°C，結果見圖2。結果顯示，ATPR在55.52°C有一吸熱峰，Lutrol F68在50.22°C有一吸熱峰，固體 分散體ATPR吸熱峰消失，在48.52°C有一吸收峰，較Lutrol F68的吸熱峰前移，說明固體分散體中ATPR與Lutrol F68形成低共熔物。物理混合物DSC曲線ATPR吸熱峰消失， 與固體分散體的DSC曲線相似，48.89°C有一吸熱峰，其原因是，在升溫過程中，Lutrol F68逐漸熔融，ATPR熔于其中，在Lutrol F68熔點附近已經形成共熔物。實施例2不同方法制備固體分散體粉末流動性考察1.傳統方法制備固體分散體處方 1-1(1 2)處方 2-1(1 4)處方 3-1 (1 8)處方 4-1 (1 12)ATPR5g 4g 2g IgLutrol F68 IOg16g 16g 12g_制成產物15g20g 1 8g 13g按照處方比例稱取4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯與Lutrol F68，先將載體 60°C水浴加熱熔融，將4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯用無水乙醇溶解，待載體完全 熔融時加入4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯溶液，攪拌均勻，加熱揮發除去無水乙 醇，-20°C冰箱冷凍過夜，置真空干燥箱中干燥24h，取出，粉碎。2.本發明所述制備方法制備含不同比例及種類填充劑的固體分散體2.1藥物與載體材料重量比為1 2的處方處方1-2處方1-3處方1-4處方1_5處方1_6處方1_7處方1_8ATPR 5g 5g 5g 5g 5g 5g 5gLutrol F68 IOg IOg IOg IOg IOg IOg IOg微晶纖維素15g 7.5g 1.5g - - - 7.5g乳糖- - - 15g 7.5g 1.5g 7.5g_制得產物30g 22.5g 16.5g 30g 22.5g 16.5g 30g2.2藥物與載體材料重量比為1 4的處方處方2-2處方2-3處方2_4處方2_5處方2_6處方2_7處方2_8ATPR 4g 4g 4g 4g 4g 4g 4gLutrol F68 16g 16g 16g 16g 16g 16g 16g微晶纖維素20g IOg 2g - - - IOg乳糖- - - 20g IOg 2g IOg_制得產物40g 30g 22g 40g 30g 22g 40g2.3藥物與載體材料重量比為1 8的處方處方3-2處方3-3處方3-4處方3_5處方3_6處方3_7處方3_8ATPR 2g 2g 2g 2g 2g 2g 2gLutrol F68 16g 16g 16g 16g 16g 16g 16g微晶纖維素18g 9g 1.8g9g乳糖- - - 18g 9g 1.8g 9g_制得產物36g 27g 19.8g 36g 27g 19.8g 36g
2.4藥物與載體材料重量比為1 12的處方處方4-2處方4-3處方4_4處方4_5處方4_6處方4_7處方4_8ATPR Ig Ig Ig Ig Ig Ig IgLutrol F68 12g 12g 12g 12g 12g 12g 12g微晶纖維素13g 6.5g 1.3gIOg乳糖-- - 13g 6.5g 1.3g 3g_制得產物26g 19.5g 14.3g 26g 19.5g 14.3g 26g按照處方稱取4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯與Lutrol F68，先將載體60°C 水浴加熱熔融，將4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯用無水乙醇溶解，待載體完全熔融 時加入4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯溶液，攪拌均勻，加熱揮發除去無水乙醇，待 混合物呈粘稠狀態時，加入處方比例的微晶纖維素或乳糖，攪拌均勻，迅速冰浴冷卻使 其固化，-20°C冰箱冷凍過夜，置真空干燥箱中干燥24h，取出，粉碎。3.粉末流動性考察3.1休止角測定采用固定圓錐底法。底盤為直徑5cm的圓臺，將兩只玻璃漏斗上下交錯重疊， 固定在鐵架臺上，下漏斗出口與底盤距離為3.5-6.0cm之間。分別取各處方粉末若干，從 上部漏斗慢慢加入，使粉末經過兩只漏斗的緩沖逐漸堆積在底盤上，形成錐體，直至得 到最高的錐體為止。測定錐體的高H，每種樣品各測定三次，取平均值，按下式計算休 止角α =arctg(H/R)其中，α為休止角，R為底盤半徑。測定后將樣品回收。3.2 結果3.2.1藥物與載體材料重量比為1 2時各處方休止角測量結果見下表1。表1藥物與載體材料重量比為1 2時各處方休止角測量結果
權利要求
1.一種4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯的固體分散體，其特征在于含有4-氨 基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯和固體分散體載體材料，其重量比為1 2-1 12。
2.如權利要求1所述的固體分散體，其特征在于所述的固體分散體載體材料為泊洛沙 姆 188。
3.如權利要求1所述的固體分散體，其特征在于其中4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲 酸酯和固體分散體載體材料的重量比為1:4-1: 8。
4.如權利要求1所述的固體分散體，其特征在于其中4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲 酸酯及固體分散體載體材料的重量比為1 8。
5.如權利要求1、2、3或4所述的固體分散體的制備方法，其特征在于先將載體60°C 水浴加熱熔融，將4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯用無水乙醇溶解，待載體完全熔融 時加入4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯溶液，攪拌均勻，加熱揮發除去無水乙醇，待 混合物呈粘稠狀態時，加入填充劑，攪拌均勻，迅速冰浴冷卻使其固化，-20°C冰箱冷凍 過夜，置真空干燥箱中干燥24h，取出，粉碎。
6.如權利要求5所述的固體分散體的制備方法，其特征在于所述填充劑為乳糖、微晶 纖維素或其混合物。
7.如權利要求5所述的固體分散體的制備方法，其特征在于所述填充劑重量與固體分 散體重量的比例為1-0.1 1。
8.如權利要求7所述的固體分散體的制備方法，其特征在于所述填充劑重量與固體分 散體重量的比例為0.5 1。
全文摘要
本發明涉及藥物組合物領域，具體涉及含有4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯的固體分散體及其制備方法。本發明利用泊洛沙姆188作為載體，制備4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯的固體分散體，顯著提高了其溶出速度以及溶解度。當藥物與載體的比例達到1∶8以上時，固體分散體60min累計溶出率均在95％以上。本發明采用溶劑熔融加填充劑的方法制備固體分散體，加快了干燥步驟，使產物脆性增強，易于粉碎，且粉末流動性增加，解決了傳統干燥方法存在的產物粘性大、難粉碎、流動性差的缺點，利于后續制劑工藝的完成。本發明的固體分散體可用于制備誘導分化抗腫瘤的藥物。
文檔編號A61K31/232GK102008443SQ20101054789
公開日2011年4月13日 申請日期2010年11月17日 優先權日2010年11月17日
發明者湯繼輝, 王祺, 石靜波, 臧洪梅, 鄧倩, 陳飛虎 申請人:安徽醫科大學