專利名稱：一種具有止咳平喘作用的噴霧劑及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種川貝母總生物堿的制備方法，以及用川貝母總生物堿制成的具有止咳平喘作用的噴霧劑。
背景技術：
川貝母為百合科植物川貝母Fritillaria. cirrhosa D. Don、暗紫貝母 F. unibracteata Hsiao et K. C. Hsia、甘肅貝母 F. przewalskiiMaxim.或梭砂貝母 F. delavayi Franch.的干燥鱗莖，具有清熱潤肺止咳的功效，用于肺熱燥咳、干咳少痰、陰虛勞嗽、咯痰帶血。生物堿類是其主要成分，具有顯著的鎮咳效果?！吨袊鴮嶒灧絼W雜志》2003年第3期公布了“均勻設計法優選川貝母滲漉提取工藝”，《中醫學院學報》第2005年第1期公布了“川貝母提取工藝研究”二者均采用乙醇滲漉發提取，該方法提取時間長，耗時耗能；《中國中藥雜志》第2005年第8期公開了“中藥川貝母定量分析方法研究”，優選用氨水堿化藥材lh，然后采用氯仿-甲醇回流提取，該方法提取率低且氯仿為有毒溶劑，易對環境造成污染。

發明內容
本發明的目的在于提供一種川貝母總生物堿的制備方法；本發明的另一個目的在于提供一種川貝母噴霧劑；本發明的另一個目的在于提供一種川貝母噴霧劑的制備方法。本發明的目的是通過如下技術方案實現的本發明川貝母總生物堿的制備方法包括如下步驟步驟1 取川貝母采用酸醇溶液進行提??；步驟2 取步驟1得到的提取物經大孔吸附樹脂純化。
優選地，所述步驟1的酸醇溶液為HCl-乙醇水溶液；優選地，所述步驟1的酸醇溶液為HCl-乙醇水溶液，其中HCl濃度為0. 3-0. 8%, 乙醇濃度為60-90% ；優選地，所述步驟1的酸醇溶液為HCl-乙醇水溶液；其中HCl濃度為0. 5%，乙醇濃度為60-90% ；溶劑用量為6-8倍量(質量體積比)；提取次數為2-4次，每次1-2小時。優選地，步驟2中提取物制成相當生藥濃度為0. 5-1. 5g藥材/mL的川貝母上樣液，調節上樣液PH至堿性。所述相當生藥濃度為0. 5-1. 5g藥材/mL的川貝母上樣液，是指每ml川貝母上樣液的量由0. 5-1. 5g川貝母提取。優選地，步驟2中，大孔吸附樹脂純化時，先用低濃度乙醇解吸附，再用高濃度醇進行洗脫；低濃度乙醇為10-50% ；優選地，所述步驟2中的大孔吸附樹脂為非極性大孔樹脂；優選地，所述步驟2中上樣液pH為8-11 ；解吸附乙醇濃度為40-60%，用量為3_5 倍柱體積。
本發明所述川貝母總生物堿的制備方法，優選包括如下步驟步驟1 取川貝母，采用HCl-乙醇水溶液進行提取，提取液濃縮，干燥，得浸膏；步驟2 取步驟1得到的浸膏，制成生藥濃度為0. 5-1. 5g藥材/mL的川貝母上樣液，調節上樣液PH至堿性，過大孔吸附樹脂純化，用低濃度乙醇除雜，再用高濃度醇進行洗脫，收集高濃度乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得川貝母總生物堿。本發明川貝母總生物堿的制備方法進一步優選為步驟1:取川貝母，加6-9倍量(0.3-0.8%)HCl-(60_80%)乙醇水溶液，于 70-90°C水浴加熱回流提取2-5次，每次l_3h，合并提取液，減壓濃縮，真空干燥，得浸膏；步驟2 取步驟1得到的浸膏，用1-5% HCl研溶，加入硅藻土，過濾，濾液用1-5% HCl稀釋，得生藥濃度為Ig藥材/mL的川貝母樣品液；用NaOH溶液調節樣品液pH為8-10，以UBV/h 的流速動態吸附，再用6-9BV的蒸餾水以相同流速沖洗樹脂至流出液為無色；然后用3-6BV 的20-50 %濃度乙醇以l_:3BV/h的流速進行解吸附，洗脫完成后，再用75-95 %乙醇進行洗脫；收集75-95%乙醇洗脫液，減壓濃縮后，真空干燥得川貝母總生物堿。本發明川貝母總生物堿的制備方法進一步優選為步驟1 取川貝母，加7倍量0. 5% HCl-75%乙醇水溶液，于80°C水浴加熱回流提取3次，每次1.證，合并3次提取液，減壓濃縮，60°C真空干燥池，得浸膏；步驟2 取步驟1 得到的浸膏，用2% HCl研溶，加入硅藻土，過濾，濾液用2% HCl稀釋，得生藥濃度為Ig藥材 /mL的川貝母樣品液；用5% NaOH溶液調節樣品液pH為9，以2BV/h的流速動態吸附，再用 8BV的蒸餾水以相同流速沖洗樹脂至流出液為無色；然后用4BV的50%濃度乙醇以2BV/h 的流速進行解吸附，洗脫完成后，再用95%乙醇進行洗脫，以改良碘化鉍鉀試劑檢測終點； 收集95%乙醇洗脫液，減壓濃縮后，于60°C條件下真空干燥至恒重得川貝母總生物堿；本發明川貝母總生物堿的制備方法進一步優選為步驟1 取川貝母，加6倍量0. 5% HCl-60%乙醇水溶液，于80°C水浴加熱回流提取2次，每次池，合并提取液，減壓濃縮，60°C真空干燥池，得浸膏；步驟2 取步驟1得到的浸膏，用2% HCl研溶，加入硅藻土，過濾。濾液用2% HCl稀釋，得生藥濃度為1. Og藥材/ mL的川貝母樣品液；用5% NaOH溶液調節上樣溶液pH為7，以2BV/h的流速動態吸附，再用 8BV的蒸餾水以相同流速沖洗樹脂至流出液為無色；然后用2BV的30%濃度乙醇以2BV/h 的流速進行解吸附，洗脫完成后，再用95%乙醇進行洗脫，以改良碘化鉍鉀試劑檢測終點； 收集95%乙醇洗脫液，減壓濃縮后，于60°C條件下真空干燥至恒重得川貝母總生物堿；本發明川貝母總生物堿的制備方法進一步優選為步驟1 取川貝母，加8倍量0. 5% HCl-90%乙醇水溶液，于80°C水浴加熱回流提取4次，每次lh，合并提取液，減壓濃縮，60°C真空干燥池，得浸膏；步驟2:取步驟1得到的浸膏，用2% HCl研溶，加入硅藻土，過濾。濾液用2% HCl稀釋，得生藥濃度為1. Og藥材/ mL的川貝母樣品液；用5% NaOH溶液調節樣品液pH為11，以2BV/h的流速動態吸附，再用 8BV的蒸餾水以相同流速沖洗樹脂至流出液為無色；然后用6BV的70%濃度乙醇以2BV/h 的流速進行解吸附，洗脫完成后，再用95%乙醇進行洗脫，以改良碘化鉍鉀試劑檢測終點； 收集95%乙醇洗脫液，減壓濃縮后，于60°C條件下真空干燥至恒重得)11貝母總生物堿；上述川貝母總生物堿可按常規工藝加入常規輔料制成片劑、膠囊、噴霧劑、顆粒劑等臨床可接受的劑型。
本發明提供一種川貝母噴霧劑，該噴霧劑的原料組主要成為川貝母總生物堿、增溶劑、拋射劑；所述川貝母總生物堿的量以其制成噴霧劑來計，每mL噴霧劑中含川貝母總生物堿的量相當于1-4. Og川貝母，具體是指每mL噴霧劑中含川貝母總生物堿的量相當于由 1-4. Og川貝母提取的量。所述增溶劑加入量為總體積的5-20% ；所述增溶劑為吐溫-80、吐溫_20、1，2_丙二醇、丙三醇中的任意一種，優選為丙二醇，加入量為總體積的5-15% ；所述川貝母總生物堿的量每mL噴霧劑中含川貝母總生物堿的量相當于1. 2-3. Og 生藥材；拋射劑的量為噴霧劑每IOOml加入5_15g拋射劑；所述噴霧劑的原料中還可以加入噴霧劑的常規輔料，選自甜味劑、矯味劑、防腐劑中的任一一種或幾種；所述川貝母總生物堿的制備方法包括如下步驟步驟1 取川貝母采用酸醇溶液進行提取；步驟2 取步驟1得到的提取物經大孔吸附樹脂純化。優選地，所述步驟1的酸醇溶液為HCl-乙醇水溶液；優選地，所述步驟1的酸醇溶液為HCl-乙醇水溶液，其中HCl濃度為0. 3-0. 8%, 乙醇濃度為60-90% ；優選地，所述步驟1的酸醇溶液為HCl-乙醇水溶液；其中HCl濃度為0. 5%，乙醇濃度為60-90% ；溶劑用量為6-8倍量(質量體積比)；提取次數為2-4次，每次1-2小時。優選地，步驟2中提取物制成生藥濃度為0. 5-1. 5g藥材/mL的川貝母上樣液，調節上樣液PH至堿性。優選地，步驟2中，大孔吸附樹脂純化時，先用低濃度乙醇解吸附，再用高濃度醇進行洗脫；優選地，所述步驟2中的大孔吸附樹脂為非極性大孔樹脂；優選地，所述步驟2中上樣液pH為7-11 ；除雜乙醇濃度為40-60%，用量為3_5倍柱體積。所述川貝母噴霧劑的制備方法包括如下步驟取處方的川貝母總生物堿與甜味劑、矯味劑、防腐劑中的任意一種或幾種共同溶解于增溶劑中，加入注射用水，充分搖勻，靜置，裝入氣霧瓶中，向瓶內壓入拋射劑，灌裝，滅菌，即得；所述川貝母總生物堿由如下方法制備而成步驟1 取川貝母，采用酸醇溶液進行提取，提取液濃縮，干燥，得浸膏；步驟2 取步驟1得到的浸膏，制成生藥濃度為0. 5-1. 5g 藥材/mL的川貝母上樣液，調節上樣液pH至堿性，過大孔吸附樹脂純化，用低濃度乙醇除雜，再用高濃度醇進行洗脫，收集高濃度乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得川貝母總生物堿。優選為，所述步驟1的酸醇溶液為HCl-乙醇水溶液；其中HCl濃度為0. 5%,乙醇濃度為60-90% ；溶劑用量為6-8倍量(質量體積比)；提取次數為2-4次，每次1-2小時。所述步驟2中的大孔吸附樹脂為非極性大孔樹脂；上樣液pH為7-11 ；除雜乙醇濃度為 40-60%，用量為3-5倍柱體積。
進一步優選為，步驟1 取川貝母，加7倍量0. 5%HCl-75%乙醇，于80°C水浴加熱回流提取3次，每次1. 5h,合并3次提取液，減壓濃縮，60°C真空干燥池，得浸膏；步驟2 取步驟1得到的浸膏，用2% HCl研溶，加入硅藻土，過濾，濾液用2% HCl稀釋，得生藥濃度為 Ig藥材/mL的川貝母樣品液；用5% NaOH溶液調節樣品液pH為9，以2BV/h的流速動態吸附，再用8BV的蒸餾水以相同流速沖洗樹脂至流出液為無色；然后用4BV的50%濃度乙醇以2BV/h的流速進行解吸附，洗脫完成后，再用95%乙醇進行洗脫，以改良碘化鉍鉀試劑檢測終點；收集95%乙醇洗脫液，減壓濃縮后，于60°C條件下真空干燥至恒重得川貝母總生物堿；或，步驟1 取川貝母，加6倍量0. 5% HCl-60%乙醇水溶液，于80°C水浴加熱回流提取2次，每次池，合并提取液，減壓濃縮，60°C真空干燥池，得浸膏；步驟2 取步驟1得到的浸膏，用2% HCl研溶，加入硅藻土，過濾。濾液用2% HCl稀釋，得生藥濃度為1. Og 藥材/mL的川貝母樣品液；用5% NaOH溶液調節上樣溶液pH為7，以2BV/h的流速動態吸附，再用8BV的蒸餾水以相同流速沖洗樹脂至流出液為無色；然后用2BV的30%濃度乙醇以2BV/h的流速進行解吸附，洗脫完成后，再用95%乙醇進行洗脫，以改良碘化鉍鉀試劑檢測終點；收集95%乙醇洗脫液，減壓濃縮后，于60°C條件下真空干燥至恒重得川貝母總生物堿；或，步驟1 取川貝母，加8倍量0. 5% HCl-90%乙醇水溶液，于80°C水浴加熱回流提取4次，每次lh，合并提取液，減壓濃縮，60°C真空干燥池，得浸膏；步驟2 取步驟1得到的浸膏，用2% HCl研溶，加入硅藻土，過濾。濾液用2% HCl稀釋，得生藥濃度為1. Og藥材 /mL的川貝母樣品液；用5% NaOH溶液調節樣品液pH為11，以2BV/h的流速動態吸附，再用 8BV的蒸餾水以相同流速沖洗樹脂至流出液為無色；然后用6BV的70%濃度乙醇以2BV/h 的流速進行解吸附，洗脫完成后，再用95%乙醇進行洗脫，以改良碘化鉍鉀試劑檢測終點； 收集95%乙醇洗脫液，減壓濃縮后，于60°C條件下真空干燥至恒重得)11貝母總生物堿。本發明進一步提供川貝母提取物或其噴霧劑在制備拮抗磷酸組胺、氯化乙酰膽堿或卵蛋白致氣管平滑肌收縮藥物中的應用。本發明采用先提取川貝母總生物堿部位再將其制為噴霧劑的工藝，克服了將川貝母粉碎成超微粉直接制成氣霧劑時，工藝收率低(僅為65%)以及藥粉易粘結，難以持續定量噴出的缺點。具體是實施方式實驗例1川貝母總生物堿提取工藝研究(一 )川貝母總生物堿提取方法的優選方法1 :0. 5% HCl乙醇提取取干燥的川貝母(瓦布貝母)鱗莖巧40g各5份，粉碎成粗粉，用0.5% HCl乙醇 800ml，于95°C水浴加熱回流提取3次，每次池，合并3次提取液，減壓濃縮，60°C真空干燥 2h，浸膏得率為23. 72%，按總生物堿含量測定法，測得總生物堿含量為0. 360%。方法2 氯仿甲醇G 1)有機溶劑直接進行提取取干燥的川貝母(瓦布貝母)鱗莖巧40g各5份，粉碎成粗粉，用氯仿甲醇 (4 l)800ml，于80°C水浴加熱回流提取3次，每次池，合并3次提取液，減壓濃縮，60°C 真空干燥池，平均提取物得率為4. 65%，按總生物堿含量測定法，測得總生物堿含量為0. 364%。方法3 :0. 5 % HCl酸水滲漏取干燥的川貝母(瓦布貝母)鱗莖巧40g各5份，粉碎成粗粉，0. 5% HCl酸水 800ml,以1 2ml/min速率進行滲漏，減壓濃縮，60°C真空干燥池，平均提取物得率為 23. 95%，按總生物堿含量測定法，測得總生物堿平均含量為0. 360%。三種方法比較見表
Io表1三種提取方法的比較
權利要求
1.川貝母總生物堿的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟步驟1 取川貝母采用HCl-乙醇水溶液進行提??；步驟2 取步驟1得到的提取物經大孔吸附樹脂純化。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟1中HCl-乙醇水溶液，其中HCl濃度為 0. 3-0. 8 %，乙醇濃度為 60-90 %。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟2中提取物制成相當生藥濃度為 0. 5-1. 5g藥材/mL的川貝母提取物上樣液，調節上樣液pH至堿性。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于步驟2中大孔吸附樹脂純化時，先用低濃度乙醇解吸附，再用高濃度乙醇進行洗脫；所述大孔吸附樹脂為非極性。
5.如權利要求4所述的方法，其特征在所述步驟2中上樣液pH為8-11；解吸附乙醇濃度為40-60%，用量為3-5倍柱體積。
6.如權利要求1所述的方法，其特征在于該方法包括如下步驟步驟1 取川貝母，加6-9倍量0. 3-0. 8% HCl-60-80%乙醇水溶液，于70-90°C水浴加熱回流提取2-5次，每次l_3h，合并提取液，減壓濃縮，真空干燥，得浸膏；步驟2 取步驟1 得到的浸膏，用1-5% HCl研溶，加入硅藻土，過濾，濾液用1-5% HCl稀釋，得生藥濃度為 Ig藥材/mL的川貝母樣品液；用NaOH溶液調節樣品液pH為8_10，以l_3BV/h的流速動態吸附，再用6-9BV的蒸餾水以相同流速沖洗樹脂至流出液為無色；然后用3-6BV的20-50% 濃度乙醇以l_3BV/h的流速進行解吸附，洗脫完成后，再用75-95%乙醇進行洗脫；收集 75-95%乙醇洗脫液，減壓濃縮后，真空干燥得川貝母總生物堿。
7.如權利要求1-6任一所述方法制備的川貝母總生物堿。
8.川貝母噴霧劑的制備方法，其特征在于將權利要求1-6任一所述方法制備的川貝母總生物堿與甜味劑、矯味劑、防腐劑中的任一一種或幾種共同溶解于增溶劑中，加入注射用水，充分搖勻，靜置，裝入氣霧瓶中，向瓶內壓入拋射劑，灌裝，滅菌，制成噴霧劑。
9.如權利要求8所述的方法，其特征在于川貝母總生物堿的量以其制成噴霧劑來計，每mL噴霧劑中含川貝母總生物堿的量相當于由1-4. Og川貝母提取而得的川貝母總生物堿；所述增溶劑加入量為總體積的5-20% ；所述增溶劑為吐溫-80、吐溫-20、1，2-丙二醇、 丙三醇中的任意一種。
10.如權利要求1-6任一方法制備的川貝母總生物堿在制備拮抗磷酸組胺、氯化乙酰膽堿或卵蛋白致氣管平滑肌收縮藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了川貝母總生物堿及其噴霧劑的制備方法。川貝母總生物堿的制備方法川貝母采用HCl-乙醇水溶液進行提取，提取物經大孔吸附樹脂純化。本發明提取工藝收率高、藥效高，且制備的噴霧劑可以持續定量噴出。
文檔編號A61K125/00GK102451362SQ20111036495
公開日2012年5月16日 申請日期2011年11月17日 優先權日2011年11月17日
發明者代勇, 徐世軍, 王曉蓉, 薛剛 申請人:成都恩威投資(集團)有限公司