專利名稱：抑制鳥氨酸脫羧酶的環狀氨基氧基化合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及新的具有藥物活性的環狀氨基氧基化合物、這些化合物的制備方法、包含這些化合物的藥物組合物、用于治療人或動物體的預防性、治療性或診斷性方法的這些化合物、這些化合物在對于人或動物體的預防性或治療性治療方面的應用，以及藥物組合物的制備。
根據現有知識狀態，可以假設多胺亞精胺和精胺及二胺腐胺參與調節生長過程。
通過抑制多胺生物合成可以有利地影響許多細胞功能。
所述鳥氨酸脫羧酶(ODC)是多胺生物合成的關鍵酶之一。ODC活性的降低導致多胺生物合成的減少，并且因而導致細胞中多胺含量的下降。若通過ODC抑制劑實現該酶的活性抑制，那么借助于所述ODC抑制劑就可以影響(即降低)哺乳動物細胞(包括人細胞)中的多胺濃度。
在哺乳動物細胞中，ODC催化腐胺的合成，所謂腐胺即是一種二胺，同時它也是多胺生物合成中的中間體。
令人驚奇的是，現已發現具有環狀中心成分的本發明化合物具有有利的藥理學性質。
本發明化合物是式Ⅰ化合物及其鹽
其中基團A是C3-C6亞環烷基;
n為0或1;和m為0或1;
條件是a)氨基氧基基團H2N-O-與氨基基團-NH2之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2兩個基團不鍵合到A的同一環碳原子上。
本發明化合物可以作為順式和反式異構體的混合物存在，或優選作為純的順式或純的反式異構體存在;若存在不對稱碳原子(即若A不為1，4-亞環己基或1，3-亞環丁基)，則這些碳原子可彼此獨立地為(R)、(S)或(R，S)構型。在順式和反式異構體混合物中，在每種情況下，可以存在兩種或只存在一種順式和反式異構體的旋光對映體。優選純的順式或反式異構體，它們可以以純對映體或對映體混合物(例如以外消旋混合物)存在，特別是以純的對映體存在。
用于描述本發明的術語和一般表達形式優選定義如下其中H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2兩個基團不鍵合到同一環碳原子上的C3-C6亞環烷基A是環烴的二價基團，并選自1，2-亞環丙基;1，2-或1，3-亞環丁基;1，2-或1，3-亞環戊基;和1，2-、1，3-或1，4-亞環己基;優選1，2-亞環丙基、1，3-亞環丁基、1，3-亞環戊基或1，3-或1，4-亞環己基。
氨基氧基團H2N-O-和氨基基團-NH2之間的距離至少為3個并且不大于4個碳原子是這樣定義的即在計數環A中的碳原子時包括基團H2N-(CH2)n-和基團-(CH2)m-O-NH2之間的最短連接。根據條件a)中的內容選擇n和m的數值;優選，n為0，且m為0或1。
本發明化合物的鹽是酸加成鹽，特別是可藥用酸加成鹽，即在所用具體劑量中不具有令人煩惱的毒性的那些酸加成鹽，例如與無機酸形成的鹽，所述無機酸可為例如鹽酸、硫酸或磷酸;或與適宜的有機羧酸或磺酸形成的鹽，所述有機羧酸或磺酸可為乙酸、辛酸、琥珀酸、己二酸、富馬酸、馬來酸、羥基馬來酸、丙酸、乳酸、蘋果酸、檸檬酸、水楊酸、對氨基水楊酸、抗壞血酸、草酸、苯磺酸、1，5-萘二磺酸、甲磺酸或1，2-乙二磺酸;與N-環己基氨基磺酸或與氨基酸例如谷氨酸或天冬氨酸形成的鹽。依據所存在的堿性基團的堿性的不同，可以形成單鹽或二鹽。
不可藥用的鹽，例如苦味酸鹽或高氯酸鹽也可用于分離或純化。只有可藥用鹽可用于治療，因而是優選的。
本發明化合物具有有用的，特別是藥理學上可用的性質。令人驚奇的是，已發現式Ⅰ化合物對鳥氨酸脫羧酶(ODC)具有特別有效的、特異性抑制作用，這對于二胺氧化酶(DAO)來講是有選擇性的。它們是新的一類ODC抑制劑。
ODC作為多胺生物合成中的關鍵性酶起著重要作用，所述生物合成特別在哺乳動物(包括人)的所有細胞中進行。細胞中多胺濃度用ODC來調節。酶ODC的抑制導致了多胺濃度的降低。由于多胺濃度的降低引起細胞生長的抑制，因此可能通過施用抑制ODC的物質來抑制真核生物細胞以及原核生物細胞的生長，特別是抑制迅速或不可控制地生長的細胞的生長，并且甚至于破壞細胞或者抑制細胞分化作用的發生。
對酶ODC的抑制作用可以例如通過J.E.Seely和A.E.Pegg的方法來證明鳥氨酸脫羧酶(小鼠腎)，第158-161頁，H.Tabor和C.White-Tabor(編輯)Methods in Enzymology，Volume 94Polyamines，Academic Press，New York 1983。在該試驗中若使用小鼠肝臟中的ODC(isolationHayashi，S.-I.和Kameji，T.，同卷，第154-158頁)，用式Ⅰ化合物所得IC50值在微摩爾濃度區，最小至約0.01μM，優選約0.01～10μM，例如約0.02至約7.2μM。IC50是ODC活性是不加抑制劑的對照組的ODC活性的50%時抑制劑的濃度。
作為ODC抑制劑，式Ⅰ化合物具有抗增殖性質，這可例如通過證實對人T24膀胱癌細胞的生長的抑制作用來加以證實。可如下進行證明使這些細胞在已向其中加入了5%(V/V)胎牛血清的“伊格爾氏最低必需培養基”中，在空氣中在加濕的保溫箱中于37℃和5%(體積)CO2中保溫。所述癌細胞(1000-1500)經接種進入96-孔微滴度板中，并在上述條件下保溫過夜。在第一天通過連續稀釋法加入試驗物質。將微滴度板在所述條件下保溫5天。在此期間，對照培養物經歷至少4次細胞分裂。保溫后，細胞用3.3%(重量/體積＝W/V)戊二醛水溶液固定，用水洗滌，并用0.05%(W/V)亞甲藍水溶液染色。洗滌后，染料用3%(w/v)鹽酸水溶液洗脫。之后，用光度計(Titertek multiskan)在665nm處測定每孔的光密度(OD)，該光密度與細胞數成正比例。用計算機系統運用下式計算諸IC50值IC50(OD665(試驗)－OD665(起始))/(OD665(對照)－OD665(起始)) ×100
IC50值被定義為在保溫時間終點時每孔的細胞數僅為對照培養物中細胞數的50%時活性成分的濃度。式Ⅰ化合物的IC50值例如在10-6～2.5×10-4M范圍內。
因此式Ⅰ化合物特別適用于治療對鳥氨酸脫羧酶的抑制產生應答的疾病狀態，例如良性和惡性腫瘤。它們可引起腫瘤消退，并因此預防腫瘤細胞的擴散和微轉移瘤的生長。而且它們可以例如用于治療原生動物感染，例如錐蟲病、癥疾或由卡氏肺囊蟲引起的肺炎。
在此式Ⅰ化合物可顯示良好的耐受性。這可通過對大鼠進行試驗來證明對于最初為130～250g的健康雄性患白化病的大鼠[TifRAIf(SPF)，CIBAAnimalProduction，Stein，Switzerland]給予壓成丸的標準食物(NAFAGNo.890;NAFAG，Gossau，Switzerland)和任意給予水。通過單獨人工喂養對大鼠再施用14天的每天20、60或200mg/kg式Ⅰ化合物在10ml水溶液中的溶液(濃度為0.20.6;和2.0%)。在給藥期間可測定例如下列數據死亡率、臨床癥狀、體重、食物消耗、水消耗、聽覺、臨床生物化學、血液學、尿分析、尸體剖檢。結果所研究的式Ⅰ化合物每天在最多至200mg/kg的劑量時是可被耐受的，沒有明顯的毒性征兆。
可將式Ⅰ化合物本身或也可與其他藥理活性物質結合用作選擇性ODC抑制劑。可以想到的結合是下列的結合例如與(a)多胺生物合成的其他酶的抑制劑，例如S-腺苷甲硫氨酸脫羧酶抑制劑，(b)蛋白激酶C抑制劑，(c)酪氨酸蛋白激酶抑制劑，(d)促細胞分裂劑(cytokines)，(e)負生長調節劑，(f)芳香酶(aromatase)抑制劑，(g)抗雌激素劑或(h)常規的抑制細胞生長的活性成分等的結合。
優選的式Ⅰ化合物為下述化合物及其鹽其中基團A為C3-C6亞環烷基;
n為0或1;和m為0或1;
條件是a)氨基氧基基團H2N-O-與氨基基團-NH2之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2兩基團不鍵合到A的同一環碳原子上;式Ⅰ化合物以順式或反式形式存在或以順式或反式形式的混合物存在，優選以順式或反式形式存在，特別是若存在不對稱碳原子時以純的對映體存在，特別優選以反式形式(若存在不對稱碳原子時，以對映體混合物或特別是以純的對映體)存在。
特別優選的式Ⅰ化合物為下述化合物及其鹽其中基團A為C3-C6亞環烷基;
n為0及m為0或1;
條件是a)氨基氧基基團H2N-O-與氨基基團-NH2之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2兩個基團不鍵合到A的同一環碳原子上;式Ⅰ化合物以順式或反式形式存在或以順式或反式形式的混合物存在，優選以順式或反式形式存在，特別是若存在不對稱碳原子時以純的對映體存在，特別優選以反式形式(若存在不對稱碳原子時，以對映體混合物或特別是以純對映體)存在。
更特別優選的式Ⅰ化合物為下述的化合物及其鹽其中基團A為C3-C6亞環烷基;
n為0和m為0;
條件是a)氨基氧基基團H2N-O-與氨基基團-NH2之間距離至少為3個且不大于4個碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2兩個基團不鍵合到A的同一環碳原子上;式Ⅰ化合物以順式或反式形式存在或以順式或反式形式的混合物存在，優選以順式或反式形式存在，特別是若存在不對稱碳原子時以純對映體存在，特別優選以反式形式(若存在不對稱碳原子時，以對映體混合物或特別是以純對映體)存在。
非常特別優選的式Ⅰ化合物為下述的化合物及其鹽其中A為1，2-亞環丙基;1，3-亞環丁基;1，3-亞環戊基;或1，3-或1，4-亞環己基;
m為0或1;和n為0或1;
條件是氨基氧基基團H2N-O-與氨基基團-NH2之間的距離至少為3個且不大于4個碳原子;式Ⅰ化合物以順式或反式形式存在或以順式或反式形式的混合物存在，優選以順式或反式形式存在，特別是若存在不對稱碳原子時以純對映體存在，特別優選以反式形式(若存在不對稱碳原子時，以對映體混合物或特別是以純對映體)存在。
尤其優選的式Ⅰ化合物為下述的化合物及其鹽其中A為1，2-亞環丙基;1，3-亞環丁基;1，3-亞環戊基;或1，3-或1，4-亞環己基m為0或1;和n為0或1;
條件是a)氨基氧基基團H2N-O-與氨基基團-NH2之間的距離至少為3個且不大于4個碳原子，b)若A為1，2-亞環丙基或1，3-亞環丁基時則n為0或1，且c)若A是除1，2-亞環丙基或1，3-亞環丁基外其余的定義基團時，則n為0;式Ⅰ化合物以順式或反式形式存在或以順式或反式形式的混合物存在，優選以順式或反式形式，特別是若存在不對稱碳原子時以純對映體存在，特別優選以反式形式(若存在不對稱碳原子時，以對映體混合物或特別是以純對映體)存在。
異常優選的式Ⅰ化合物為下述的化合物及其鹽其中A為1，2-亞環丙基;1，3-亞環丁基;1，3-亞環戊基;或1，3-或1，4-亞環己基n為0和m為0或1;
條件是氨基氧基基團H2N-O-與氨基基團-NH2之間的距離至少為3個且不大于4個碳原子式Ⅰ化合物以順式或反式形式存在或以順式或反式形式的混合物存在，優選以順式或反式形式，特別是若存在不對稱碳原子時以純對映體存在，特別優選以反式形式(若存在不對稱碳原子時，以對映體混合物，或特別是以純對映體)存在。
高度優選的式Ⅰ化合物為下述化合物及其鹽其中A為1，4-亞環己基;
n為0;和m為0;
并且以順式或反式形式，特別是以反式形式存在。
高度優選的式Ⅰ化合物還為下述化合物及其鹽其中A為1，3-亞環丁基;
n為0;和m為0或1(特別是m為1);
并且以順式或反式形式，特別是以反式形式存在。
高度優選的式Ⅰ化合物最后還是下述化合物及其鹽其中A為1，2-亞環丙基;
n為0或1;和m為1;
并且以順式或反式形式，特別是以反(cis)式形式存在。
在實施例中具體提及的式Ⅰ化合物及其鹽，特別是可藥用鹽在所有化合物中是優選的。
新的式Ⅰ化合物及其鹽可以通過本身已知的方法制備，例如通過下述方法制備，其中從式Ⅱ化合物或其鹽(如果存在成鹽基團的話)制備，然后除掉所存在的氨基保護基團，
其中A、n和m如式Ⅰ化合物中所定義，條件是ⅰ)基團-O-NX3X4與基團X1X2N-之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子，并且ⅱ)X1X2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NX3X4兩基團不鍵合到A的同一環碳原子上;并且其中X1、X2、X3和X4彼此獨立地為氫或一價的氨基保護基團，也可以X1與X2、X3與X4、或X1與X2和X3與X4在每種情況下一起形成二價保護基團;并且如果必要其中不參與反應的其它官能團以被保護的形式存在，條件是基團X1、X2、X3和X4中至少一個為氨基保護基團;
并且，如果必要，將獲得的式Ⅰ化合物轉化為其它的式Ⅰ化合物，將獲得的異構體混合物分離成異構體，和/或將獲得的游離的式Ⅰ化合物轉化為鹽，或將獲得的式Ⅰ化合物的鹽轉化為游離的式Ⅰ化合物或轉化為其他鹽。
優選的方法變體的詳細描述除非另外指出，在下面起始原料和最終產物中A、m和n如在式Ⅰ化合物中所定義。對于式Ⅰ化合物的條件也相應地適用。
保護基團的消除對于起始原料中的官能團，特別是對于氨基和羥基的保護基團，包括特別是常用于例如肽化合物、先鋒霉素、青霉素、核酸衍生物和糖類的合成中的常規保護基團。這些保護基團可以早已存在于上述中間體中，并應保護所討論的官能團不產生有害的副反應。保護基團的特征是它們可以易于被引入和除掉，即不產生有害的副反應，并且它們不存在于最終產品中。
保護基團及其除去是本身已知的，并被描述于文獻中，例如J.F.W.McOmie，“ProtectiveGroupsinOrganicChemistry”，PlenumPress，London，NewYork，1973，和T.W.Greene，“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”，Wiley，NewYork，1984。氨基保護基團可以是一價或二價的。
優選的一價的氨基保護基團X1、X2、X3和X4是酰基，優選低級鏈烷酰基，例如甲酰基、乙酰基或丙酰基，鹵代低級鏈烷酰基，例如2-鹵代乙酰基，特別是2-氯-、2-溴-、2-碘-、2，2，2-三氟-或2，2，2-三氯乙酰基;未取代的或取代(例如被鹵素、低級烷氧基、低級烷氧羰基或硝基所取代)的苯甲酰基。例如苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-甲氧基苯甲酰基、2-甲氧羰基苯甲酰基或4-硝基苯甲酰基;羧酸半酯的酰基，特別是具有一個或兩個芳基(優選苯基、萘基或9-芴基)的芳基甲氧羰基，所述芳基為未被取代的或一取代或多取代的，例如被低級烷基(特別是叔低級烷基，例如叔丁基)、低級烷氧基(例如甲氧基)、羥基、鹵素(例如氯)和/或硝基所取代，例如未被取代的或取代的芐氧羰基(例如4-硝基芐氧羰基)、或取代的二苯基甲氧羰基(例如二-(4-甲氧基苯基)-甲氧羰基);2-鹵代低級烷氧羰基(例如2，2，2-三氯乙氧羰基、2-溴甲氧羰基或2-碘乙氧羰基);低級烷氧羰基，特別是在低級烷基的1-位有支鏈的或在1-或2-位被適當取代的低級烷氧羰基，特別是叔低級烷氧羰基(例如叔丁氧羰基)，或伯低級烷氧羰基(例如乙氧羰基);烷基亞胺甲基，例如低級烷基-亞胺甲基，例如叔丁基-亞胺甲基;磺基(-SO3H)，該磺基也可以鹽形式存在，例如以堿金屬或銨鹽形式存在，例如作為鈉鹽或鉀鹽;或芳基甲基，例如一芳基甲基、二芳基甲基或特別是三芳基甲基，所述芳基特別是未取代的或取代的苯基，例如芐基、二苯基甲基或三苯基甲基(三苯甲游基)。還優選苯基-低級烷基-甲基，例如(R，S)-、(R)-或特別是1(S)-苯基乙基。還可能為三-低級烷基甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基。
特別優選的一價氨基保護基X1、X2、X3和X4為羧酸半酯的酰基，特別是低級烷氧羰基，例如叔丁氧羰基或乙氧羰基、芐氧羰基、所述羧酸半酯的酰基可為未取代的或取代的，例如如上所定義，例如4-硝基-芐氧羰基、二苯基甲氧羰基或2-鹵代低級烷氧羰基，例如2，2，2-三氯乙氧羰基;三苯甲游基;低級鏈烷酰基，例如甲酰基和乙酰基、2-甲氧羰基-苯甲酰基或低級烷基亞胺甲基，特別是其中低級烷基在1-位有一個或二個支鏈的低級烷基亞胺甲基，例如叔丁基亞胺甲基。在所有上述基團中優選的保護基團X1或X2為低級烷氧羰基，例如叔丁氧羰基，或低級鏈烷酰基，例如乙酰基。
由基團X1與X2和/或X3與X4形成的優選的二價氨基保護基為一取代或二取代的亞甲基(在X3和X4的情況下導致肟衍生物)，例如1-低級烷氧基(特別是甲氧基或乙氧基)-低級亞烷基(例如-亞乙基或-1-亞正丁基)，例如＝C(CH3)(OC2H5)，1-低級烷基(特別是甲基或乙基)-低級亞烷基(特別是-1-亞乙基)，例如＝C(CH3)2，或1-苯基-低級亞烷基，例如＝CH-苯基，和優選通過二個羰基鍵合到待保護的氮原子上的烴基二羧酸基團(導致雙酰基衍生物)，特別是鄰苯二甲酰基或氫化的類似物，它們是未取代的或可被例如與上面對取代的苯甲酰基所定義的相同的取代基所取代，例如鄰苯二甲酰基，它與待保護的氮原子一起形成1H-異吲哚-1，3-(2H)-二酮基團(鄰苯二甲酰亞氨基)，或相應的二氫-、四氫-或六氫-鄰苯二甲酰基，低級烷基-二羧酸基團，例如琥珀酸基團，低級鏈烯基二羧酸基團，例如馬來酸基團，或C6-C12雙環二羧酸基團，例如5-降冰片烯-2，3-二羧酸基團。
所述保護基團可按本發明方法以本身已知的方式除去，例如通過溶劑分解作用，特別是水解、醇解、酸解、氨解或肼解;通過還原反應，特別是氫解;通過光解或借助于酶催方法;可以同時消去所有存在的保護基團或逐步消去，對于部分去除保護基的中間體來講可能以末純化的或已純化的形式進一步使用。所述保護基的消去反應描述于例如上述標準著作中。
根據保護基的性質的不同，優選逐步或同時按本身已知的方式除去氨基保護基，例如通過還原反應或溶劑分解作用，特別是水解(優選在酸性介質中)、醇解、酸解、氨解或肼解。低級烷氧羰基，例如叔丁氧羰基或三苯甲游基可以例如通過用酸處理除去，例如用無機酸如硫酸或氫鹵酸如鹽酸在有或無溶劑特別是水、醇(如甲醇或乙醇)或醚(如四氫呋喃或乙醚)的存在下，或用有機酸例如甲酸、乙酸或三氟乙酸在有或無水或有機溶劑例如二氯甲烷的存在下，優選在-20℃至最高至回流溫度，特別是在0℃至室溫或在回流溫度下進行，伯低級烷氧羰基優選在堿性條件下，例如用羥基堿，例如堿金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉或氫氧化鉀，在水、含水溶劑例如醇/水混合物例如乙醇/水或甲醇/水中，或在醇例如甲醇或乙醇中，在對低級烷氧羰基的酸除去法中所定義的優選溫度下除去。未取代或取代的芐氧羰基的除去可例如通過還原性氫解，即通過在適宜催化劑例如鈀的存在下用氫氣處理，或通過用在液氨中的鈉、或通過酸解，特別是通過溴化氫/冰醋酸來實現。2-鹵代低級烷氧羰基可以例如通過用適宜的還原劑，例如鋅，在有機溶劑例如甲醇或乙酸水溶液的存在下進行處理而除去。低級烷基-亞胺甲基，例如叔丁基亞胺甲基優選通過堿，例如氫氧化物，特別是堿金屬氫氧化物，例如氫氧化鉀除去。烴基二羧酸基團，特別是鄰苯二甲酰基可以通過例如肼解，例如用水合肼在有或無進一步的水(也可在反應過程中首先加入)和/或有機溶劑，如醇類(例如乙醇)或醚類(例如乙醚)的存在下，在優選溫度為0℃至回流溫度，例如在20～30℃或在回流溫度下除去;通過氨解，例如用伯胺(例如低級烷基胺，例如丁胺)、環烷基胺(例如環己胺)或芳基胺(例如苯胺)除去;或通過銨鹽，優選在極性溶劑(例如醇類，例如甲醇或乙醇)中，在有或無液體氯代烴類(例如二氯甲烷或氯仿)的存在下，或(若用氫氧化銨作堿)在水中，在優選溫度為50℃至回流溫度下，特別是在回流溫度下除去;或通過酸，特別是無機酸(例如硫酸或氫鹵酸，例如鹽酸)，在水中在有或無有機溶劑(例如醇類，例如甲醇)的存在下，在優選溫度為50℃至回流溫度下，特別是在回流溫度下除去。未取代或取代的苯甲酰基優選在堿性或酸性條件下，例如用氫氧化物堿(例如堿金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉或氫氧化鉀)，在水或含水溶劑(例如水/醇混合物，例如水/乙醇或水/甲醇)中，在優選溫度為50℃至反應混合物的沸點溫度之間，特別是在回流溫度下除去，或在硫酸或氫鹵酸(例如鹽酸)的存在下，在水或含水溶劑(例如水/醇混合物，例如水/甲醇或水/乙醇)中，在如對在氫氧化物堿存在下的除去中所述的優選溫度下除去。對于低級鏈烷酰基保護基團的除去來講，優選使用堿性水解，例如通過羥基堿(例如堿金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉或氫氧化鉀)，在水或含水溶液中在優選溫度為50℃至最高達回流溫度之間，例如在回流溫度下除去，或由酸性水解，例如用無機酸(例如氫鹵酸或硫酸)，例如鹽酸水溶液或硫酸水溶液，在加熱的影響下，例如在上面最后所述溫度下除去。磺基(包括以鹽形式存在的磺基)優選通過在酸性條件下，特別是用硫酸或氫鹵酸(例如鹽酸)，在水或含水溶劑中，在優選溫度為50℃至回流溫度之間，例如在汽餾的情況下除去。1-低級烷基-低級亞烷基優選在酸性條件下，例如在硫酸或氫鹵酸，例如鹽酸的存在下，在水或含水溶劑中在優選溫度為50℃至反應混合物的沸點溫度之間，例如在回流下或汽餾下除去。1-低級烷氧基-低級亞烷基優選通過在酸(例如硫酸或氫鹵酸，例如鹽酸)的存在下，在有機溶劑(如醚類，例如乙醚)中，在水存在下在優選溫度為0～50℃之間，特別是在室溫下反應除去。苯基-低級烷基-甲基，例如1(S)-苯基乙基，可以通過氫化作用，例如用氫氣在貴金屬催化劑，例如鈀的存在下，所述鈀可鍵合到載體材料，如氧化鋁、硅膠、硫酸鋇、硫酸鍶、碳酸鈣或木炭上，在醇(例如低級鏈烷醇，例如乙醇)中，在溫度為0℃至最高達回流溫度之間，例如在約50℃，優選在常壓下除去。
式Ⅱ起始原料可以用本身已知的方法制備，例如通過類似于在Houben-Weyl，MethodenderOrganischenChemie(有機化學方法)，VolumeX/1(1971)和VolumeE16a(1990)中所述的方法制備。
式Ⅱ化合物優選通過式Ⅲ起始原料或其鹽與式Ⅳ的羥胺或其酸加成鹽的反應來制備
其中A、n和m如式Ⅰ化合物中所定義，條件是a)基團-W1與基團X1X2N-之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子，并且b)-(CH2)m-W1和X1X2N-(CH2)n-兩基團不鍵合到A的同一環碳原子上;并且其中X1和X2彼此獨立地為氫或一價氨基保護基，條件是基團X1和X2中至少一個為氨基保護基，或X1和X2也可一起形成二價的保護基團，并且W1為羥基或離去基團，
其中X3和X4如式Ⅱ化合物中所定義。
在式Ⅲ化合物中，基團W1為羥基或離去基團，優選衍生的羥基，例如被脂肪族或芳族取代基所取代的磺酰基，例如低級烷基磺酰氧基(例如甲磺酰氧基)，或芳基磺酰氧基(＝芳基-SO2-O-)，其中芳基具有6～14個碳原子(優選為苯基、萘基、茚基或2，3-二氫化茚基)并且是未被取代的或被最多達3個基團取代，例如被低級烷基(例如甲基)、低級烷氧基(例如甲氧基)、或鹵素(例如氟、氯或溴)所取代，例如低級烷基苯基磺酰氧基(＝低級烷基苯基-SO2-O-)，例如對甲苯磺酰氧基，取代的低級烷基磺酰基，例如鹵代低級烷基磺酰基，例如三氟甲磺酰基，或特別是，游離羥基或鹵原子，例如氯、溴或碘。
若W1為羥基，即在式Ⅱ化合物的制備方法的優選實施方案中的情況下，所述反應優選通過分子內脫水反應進行。特別適宜的反應是Mitsunobu反應的變體(類似于Synthesis，682(1976)中的方法)，其中使式Ⅲ化合物與上面所定義的式Ⅳ的氨基保護的羥胺(其中所述氨基官能團優選被上述二價的氨基保護基團之一所保護，例如N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二羧酸酰亞胺或乙酰氧肟酸乙酯，特別是N-羥基鄰苯二甲酰亞胺)和三芳基膦(其中芳基優選具有6～14個碳原子并為一環、二環或三環的芳基，例如苯基、萘基、茚基或2，3-二氫化茚基，例如三苯膦)及N，N′-偶氮二甲酸二酯(例如N，N′-偶氮二甲酸二-低級烷基酯，例如N，N′-偶氮二甲酸二乙酯)反應，該反應優選在非質子傳遞性溶劑(例如醚，例如環醚，例如四氫呋喃，或特別是芳族溶劑，例如苯、甲苯或二甲苯)中，在沒有惰性氣氛或有惰性氣氛(例如氮氣或氬氣)中，并在優選溫度為0℃～80℃之間，特別是10～40℃(例如在20～30℃)下進行。所述反應優選這樣進行，即使轉化發生在帶有羥基的碳原子上。
所述反應導致在可獲得的式Ⅱ化合物中的氨基氧基被二價氨基保護基，特別是通過兩個羰基鍵合的烴基二羧酸基團所保護。
羥基W1還可被轉化為低級烷氧羰基氨基氧基，這是通過氮賓插入反應通過使N-碳酸低級烷基酯-疊氮化物，例如碳酸乙酯-疊氮化物(H5C2-O-(C＝O)-N3)，在有機溶劑(例如酰胺類，例如二甲基甲酰胺，或醚類，例如二低級烷基醚類，例如乙醚)中，在溫度為20℃至回流溫度之間，優選在回流溫度下發生反應而實現的。
若W1為上面所定義的衍生的羥基，特別是鹵原子(例如溴原子)或芳基磺酰基(例如甲苯磺酰基)，則所述反應優選用式Ⅳ的氨基被保護的羥胺進行，其中X3和X4如上所述，合在一起為通過兩個羰基鍵合的烴基二羧酸基團或單取代或二取代的亞甲基，特別是1-低級烷基-亞烷基或1-低級烷氧基-亞烷基;和其中X3為磺基和X4為磺基;或其中基團X3和X4之一為氫而另一個為酰基，如上面所定義，特別是低級烷氧羰基、芐氧羰基、2-鹵代低級烷氧羰基、低級烷基-亞胺甲基、未取代的或取代的苯甲酰基、低級鏈烷酰基或磺基。
式Ⅲ化合物與式Ⅳ化合物的反應在此情況下優選按如下條件進行在有機溶劑(例如芳族溶劑，例如苯、甲苯或二甲苯)中;在醇類(如低級醇類，例如甲醇或乙醇)中;在極性溶劑(例如二-低級烷基-羧酸酰胺類，例如二甲基甲酰胺;二-低級烷基亞砜類，例如二甲亞砜;腈類，例如乙腈;酮類，例如二-低級烷基酮類，例如丙酮;或醚類，例如環醚類，例如四氫呋喃或二噁烷)中;在水中(如果必要在洗滌劑的存在下，例如Zephirol (＝氯化芐基-十二烷基-二甲基銨及其同系物，所述同系物含有其他除十二烷基外的烷基;Bayer，FederalRepublicofGermany);或在上述溶劑的混合物中;若反應會被水或質子傳遞性溶劑(例如由于水解或所述試劑的溶劑分解作用)極大地破壞，則優選在無水條件或無質子傳遞性溶劑中進行;在無或有堿性試劑或催化劑的存在下，特別是在下述堿的存在下，例如碳酸鹽或碳酸氫鹽，例如堿金屬碳酸鹽，例如碳酸鉀或碳酸氫鉀或碳酸鈉或碳酸氫鈉(如果必要在冠醚，例如二苯并-18-冠-6的存在下);堿金屬氫化物，例如氫化鈉;堿金屬氨基化物，例如氨基化鈉;堿金屬醇化物，例如甲醇鈉或乙醇鈉(其也可通過加入堿金屬到所討論的醇中而就地制備);位阻胺類，例如叔胺類，例如三乙胺、N，N，N′，N′-四甲基-亞甲基二胺或1，8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯(1，5-5);氫氧化物，例如堿金屬氫氧化物;例如氫氧化鈉或氫氧化鉀，或者無堿存在下，通過直接使用式Ⅳ化合物的鹽或就地制備它們(例如通過加入堿金屬，例如鈉或鉀);在優選溫度為0℃至回流溫度之間或在蒸發下，特別是在20℃、40℃至80℃，在回流溫度或在蒸發下;使用或不使用惰性氣氛，例如氬氣或氮氣。本領域技術人員可以選擇具體的適宜條件。
優選的制備式Ⅰ化合物的方法是使式Ⅲ和Ⅳ化合物反應生成式Ⅱ化合物，隨后以連續的反應步驟消去所述方法中所定義的保護基團。
式Ⅲ和Ⅳ化合物是已知的，可從市場上買到或可按本身已知的方法制備。
式Ⅲ化合物可以例如通過類似于Houben-Weyl，MethodenderOrganischenChemie(有機化學方法)，VolumeX/1(1971)和VolumeE16a(1990)中所述方法制備。
更具體地講，它們可按如下制備優選地，在一定條件下例如在上述標準著作中所述的條件或下述在制備式Ⅳ化合物(此時在起始化合物中使用X1和X2，而不是X3或X3′及X4或X4′)時用于引入保護基團的條件下，使式Ⅴ化合物通過與引入氨基保護基團X1和/或X2的試劑反應而將式Ⅴ化合物轉化為其中W1為羥基的式Ⅲ化合物，
其中W＊1為羥基，A、n和m如對式Ⅰ化合物所定義，條件是a)基團-W＊1與基團H2N-之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子，并且b)-(CH2)m-W＊1和H2N-(CH2)n-兩基團不鍵合到A的同一環碳原子上(這些化合物相應于下述化合物，其中在式Ⅲ中，W1為羥基，X1和X2被氫原子轉換，并且其余基團如對式Ⅲ化合物所定義)。
例如，酰基X1或X2可通過習用的氨基酰化方法及保護基團的引入方法來引入。
特別優選的制備是下述式Ⅲ化合物的制備其中基團X1和X2之一為氫而另一個為碳酸半酯的酰基，特別是低級烷氧羰基，例如叔丁氧羰基，或芐氧羰基，和其余基團如上所定義，從式Ⅴ化合物出發通過它與式Ⅵ的活化了的酸衍生物反應來進行制備，
其中Q為碳酸半酯的酰基，特別是低級烷氧羰基或芐氧羰基，同時，W2為反應性衍生的羥基，優選1-氮雜環烷基(azolido)，例如1-咪唑烷基(imidazolido)，鹵素，例如氯或溴，或特別是與Q相同的通過氧雜鍵合的碳酸半酯的酰基(則式Ⅵ化合物為對稱的酸酐，即連二碳酸二酯)。
式Ⅵ的活化的酸衍生物也可就地制備，例如通過在碳化二亞胺類(例如N，N′-二-低級烷基-或N，N′-二-C5-C7環烷基碳化二亞胺，例如二異丙基碳化二亞胺或N，N′-二環己基碳化二亞胺)的存在下，有利地是在活化催化劑[例如N-羥基琥珀酰亞胺或N-羥基苯并三唑(它為未取代的或被鹵素、低級烷基或低級烷氧基所取代)]的存在下反應來制備。如果方便和必需的話，可以加入鹽，例如堿金屬鹵化物，例如氯化鈉。
所述反應優選在惰性溶劑(例如醚，例如脂族醚，例如乙醚，或環醚，例如四氫呋喃或二噁烷;或N，N-二-低級烷基-低級鏈烷羧酸酰胺，例如二甲基甲酰胺;或其混合物)中;也可有水存在，特別是若在使用環醚類或N，N-二-低級烷基-低級鏈烷羧酸酰胺類的情況下;在溫度為0℃至回流溫度之間，優選在15～35℃之間，例如在室溫下進行。若必要可加入堿，例如叔胺類，例如三乙胺、二異丙基乙基胺、4-二甲氨基吡啶、N-甲基嗎啉或吡啶。
在引入保護基團X1和X2之一或由這二者形成的二價保護基團之前，理想的是可以保護存在于式Ⅴ中的羥基W1。
羥基可以例如通過一價保護基團(例如酰基，例如未取代的或被鹵素，例如氯取代的低級鏈烷酰基，例如乙酰基或2，2-二氯乙酰基)來保護，或特別地通過對被保護氨基所定義的碳酸半酯的酰基所保護。優選的羥基保護基團為例如2，2，2-三氯乙氧羰基、4-硝基芐氧羰基或二苯基甲氧羰基。羥基也可被下列基團保護三-低級烷基甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基、三異丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、或特別是二甲基-(2，3-二甲基-2-丁基)甲硅烷基(即叔己基(thexyl)二甲基甲硅烷基);可易于被除去的酯化基團，例如烷基，例如叔低級烷基，例如叔丁基;氧雜-或硫雜-脂族或-環脂族烴基，特別是2-氧雜-或2-硫雜-脂族或-環脂族烴基，例如1-低級烷氧基-低級烷基或1-低級烷硫基-低級烷基，例如甲氧基甲基、1-甲氧基乙基、1-乙氧基乙基、甲硫基甲基、1-甲硫基乙基或1-乙硫基乙基;或具有5-7個環原子的2-氧雜-或2-硫雜環烷基，例如2-四氫呋喃基或2-四氫吡喃基;或相應的硫雜類似物;以及1-苯基-低級烷基，例如芐基、二苯基甲基或三苯甲游基，其中所述苯基可以為未取代的或例如被鹵素(例如氯)、低級烷氧基(例如甲氧基)和/或硝基取代。被保護的羥基優選被低級烷氧羰基或三低級烷基甲硅烷基，特別是被三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、二甲基-(2，3-二甲基-2-叔丁基)甲硅烷基或叔丁氧羰基所保護。
如果必要，可通過本身已知的方法將羥基保護基團引入式Ⅴ的起始原料中。適宜的反應條件的實例例如在上述J.F.W.McOmie和T.W.Greene的標準著作中作了描述。
例如，通過使式Ⅴ化合物中的羥基與三-低級烷基甲硅烷基鹵化物(例如三低級烷基甲硅烷基氯)在惰性溶劑(例如低級烷基氰化物，例如乙腈)中，在叔氮堿例如1，8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯的存在下，在溫度為0至50℃，特別是在15至30℃之間反應，可將三低級烷基甲硅烷基保護基轉化為被三低級烷基甲硅烷基保護的羥基。
在引入氨基保護基團X1和X2后，可從相應的式Ⅲ氨基被保護的化合物中除去所述羥基保護基團，而不同時消去所述氨基保護基團。
被適宜的酰基或被未取代的或取代的1-苯基-低級烷基所保護的羥基的釋出類似于相應的被保護的氨基。被2，2-二氯乙酰基保護的羥基的釋出例如可通過堿性水解釋出，而被叔-低級烷基或被2-氧雜-或2-硫雜-脂族或-環脂族烴基所保護的羥基通過酸解，例如通過用無機酸或強羧酸，例如三氟乙酸處理來釋出。
三低級烷基甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基或二甲基-(2，3-二甲基-2-丁基)甲硅烷基優選通過例如用醇類，例如甲醇或乙醇，在20℃至回流溫度之間的溫度下的溶劑分解作用除去。三低級烷基甲硅烷基也可以通過與無機酸，特別是氫氟酸或強羧酸，例如三氟乙酸的酸解，或通過與金屬的氟化物鹽或能釋放氟離子的堿(例如氟化氫的酸加成鹽及氮堿)或金屬氟化物(例如堿金屬氟化物，例如氟化鈉或氟化鉀)，在有或無大環多醚(“冠醚”)的存在下反應，或與有機季銨堿的氟化物(例如氟化四低級烷基銨或氟化三低級烷基芳基-低級烷基銨，例如氟化四乙基銨、氟化四丁基銨或氟化N-芐基-三甲基銨)，在非質子傳遞性、極性溶劑(例如醚類，例如四氫呋喃或二噁烷、二甲亞砜或N，N-二甲基乙酰胺)的存在下，在優選溫度為約-20℃至50℃(例如在0℃至室溫之間)反應除去。
作為羧基保護基團的2-鹵代低級烷氧羰基可通過還原劑(例如還原性金屬，例如鋅;還原性金屬鹽，例如鉻(Ⅱ)鹽)除去，或通過硫化合物(例如連二亞硫酸鈉或，優選，硫化鈉和二硫化碳)除去。
如上所定義，作為羥基保護基團的三低級烷基甲硅烷基的引入和消去是特別優選的，尤其是若碳酸半酯基團，特別是低級烷氧羰基作為氨基保護基團X1或X2存在時。
其中W1為離去基團的式Ⅲ化合物可以例如從其中W1為羥基的式Ⅲ化合物出發通過它與相應的親核試劑反應來制備，所述親核試劑的實例是例如磺酰鹵，例如磺酰溴或磺酰氯，它們可被脂族或芳族取代基所取代，例如低級鏈烷基磺酰鹵(例如甲磺酰氯)或芳基磺酰鹵(例如芳基-SO2-Cl;Br)，(其中芳基具有6～14個碳原子，例如為苯基、萘基、茚基或2，3-二氫化茚基，并且可為未取代的或被最多達3個基團所取代，例如被低級烷基(例如甲基)、低級烷氧基(例如甲氧基)或鹵素(例如氟、氯或溴)所取代)，例如低級烷基苯基磺酰氯(即低級烷基苯基-SO2-Cl)，例如對甲苯磺酰氯，取代的低級鏈烷磺酰鹵，例如鹵代低級鏈烷磺酰氯(例如三氟甲磺酰氯);或氫鹵酸(特別是鹽酸、氫溴酸或氫碘酸)。如果必要在適宜溶劑(例如鹵代烴，例如氯仿、二氯甲烷或二氯乙烷)中，在無(特別是在使用氫鹵酸時)或有叔氮堿(例如三低級烷基胺，例如三乙胺或乙基二異丙基胺、吡啶或二甲氨基吡啶)的存在下，在溫度為-78℃于回流溫度之間，特別是從-5°至30℃之間進行反應。所述條件優選適用于引入除鹵素以外的離去基團W1。鹵素基團可優選通過使其中W1為被脂族或芳族取代基所取代的磺酰氧基的相應化合物與例如鹵化物(特別是金屬鹵化物，例如金屬氯化物、金屬溴化物或金屬碘化物，例如堿金屬氯化物、堿金屬溴化物或堿金屬碘化物或堿土金屬氯化物、堿土金屬溴化物或堿土金屬碘化物)，在適宜溶劑(例如二低級烷基酮類，例如丙酮)中，在優選溫度為從-20℃至最高達回流溫度之間(例如在10～30℃)反應而引入，如果必要，在有銅的存在下進行，例如在使用碘化物的情況下，反應在少量或粉末形式的銅的存在下進行。
也可以直接制備被氨基保護基團X1和/或X2所保護的式Ⅲ化合物，而不必通過具有游離氨基的式Ⅴ中間體來進行。
因此，式Ⅲ化合物(其中m為1和其中基團X1和X2之一為氫，而另一個為氫或對式Ⅱ化合物所定義的一價氨基保護基團，和n為0或1，條件是對于式Ⅲ化合物所定義的條件)，也可以按下法制備，其中使式Ⅶ化合物發生反應以還原該酰胺鍵， 其中Y為上面對X1或X2所定義的一價氨基保護基，特別是低級烷氧羰基，A如式Ⅰ化合物中所定義，和
n′為0或1，條件是a)借助于A和-(C＝O)-(N-Y)-[(CH2)n′]-所形成的環具有4或5個環原子并且基團-(C＝O)-(N-Y)-[(CH2)n′]-中的兩條鍵不是來自A的同一碳原子。
所述發生同時開環的還原反應優選使用適宜的復合氫化物，例如在醚類(例如乙醚)中的氫化鋰鋁、在醇類(優選)(例如甲醇或乙醇)中的硼氫化鈉、或在醚類(例如四氫呋喃)中的二異戊基硼烷(雙(3-甲基-丁-1-基)甲硼烷)，在溫度為-20℃至50℃之間，特別是-5至25℃之間進行。因為Y為對在上述對式Ⅱ化合物所定義的X1或X2所定義，特別是低級烷氧羰基，所以其中W1為羥基的相應的式Ⅲ化合物可以在此直接獲得。
其中A中的諸鍵優選為順式構型;所以可獲得相應的順式式Ⅲ化合物。
式Ⅶ化合物是已知的或可以按本身已知的方法制備。
例如，順式的式Ⅶ化合物其中Y為作為氨基保護基團的碳酸半酯的酰基，A為1，3-亞環戊基和n′為0，可以通過使其中Y被氫原子所置換的相應的中間體(名稱為2-氮雜二環[2.2.1]庚-3-酮)通過用下面所定義的式Ⅵ化合物在4-二甲氨基吡啶的存在下，在類似于上面對式Ⅵ化合物的反應所定義的條件下酰化來制備，優選(當Y＝叔低級烷氧羰基時，例如叔丁氧羰基)用連二碳酸二叔低級烷基酯(例如連二碳酸二叔丁酯)在催化量的4-二甲氨基吡啶的存在下在有機溶劑(例如醚，例如四氫呋喃)中酰化。2-氮雜二環[2.2.1]庚-3-酮例如可通過還原2-氮雜二環[2.2.1]庚-5-烯-3-酮中的雙鍵獲得，特別是可通過在催化劑，例如特別是鍵合到載體(如木炭)上的鈀、鉑或釕的存在下，若必要在加壓條件下，例如在1～10巴壓力下，在適宜氫化裝置(例如帕爾裝置)中，在0至50℃，特別是15至30℃之間的溫度下，在溶劑(例如醚，例如乙酸乙酯)中氫化來制備。2-氮雜二環[2.2.1]庚-5-烯-3-酮例如可通過使3-甲苯磺酰基-2-氮雜二環[2.2.1]庚-2，5-二烯在低級鏈烷酸(例如乙酸)中，在0至40℃，特別是15至30℃之間的溫度下反應來獲得;3-甲苯磺酰基-2-氮雜二環[2.2.1]庚-2，5-二烯例如可通過使甲苯磺酰氰在0～50℃，特別是15～30℃溫度下環加成到環戊二烯(該后者用作溶劑)來獲得。
此外式Ⅶ化合物可以類似地通過甲苯磺酰氰與雙鍵的熱力學環加成作用或光化學環加成作用并類似地繼續如對3-甲苯磺酰基-2-氮雜二環[2.2.1]庚-2，5-二烯所述的合成來制備。
由式Ⅷ化合物其中A＊為具有一個或多個不飽和鍵的3～6元環烴基(亞環丁二烯基除外)，Y′為上面對X1或X2所定義的一價氨基保護基(特別是低級鏈烷酰基，例如乙酰基)、或氫，
并且其它定義及條件類似于式Ⅰ化合物的定義和條件，條件是a)基團-OH與基團Y′-HN-之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子，并且b)-(CH2)m-OH和Y′-NH-(CH2)n-兩個基團不鍵合到A＊的同一環碳原子上，通過還原環A＊中的不飽和鍵也可制備相應的式Ⅲ化合物(Y′＝氨基保護基團)或式Ⅴ化合物(Y′＝氫)。不飽和鍵優選為雙鍵且A＊優選選自亞苯基、亞環戊烯基、亞環戊二烯基、亞環丁烯基和亞環丙烯基，特別是亞苯基。
所述反應優選通過在適宜催化劑，特別是堿性重金屬或其氧化物，例如鎳或鈷(優選鎳或阮內鎳在醇類例如乙醇中，或特別是在堿性水溶液例如堿金屬氫氧化物溶液，例如氫氧化鈉水溶液中，在150～190℃溫度下在加壓條件下，例如在50～200巴條件下);或貴金屬或貴金屬氧化物，例如鉑、氧化鉑、鈀、氧化鈀或釕(優選在選自醇類，例如甲基或乙醇，酯類，例如乙酸乙酯，醚類，例如二噁烷和水的適宜溶劑中，或在適宜的所述溶劑的混合物中;在有或無低級鏈烷酸，例如乙酸的存在下，或在堿性條件下，也可能使上述催化劑鍵合到載體材料上，例如木炭、硫酸鋇、硫酸鍶、碳酸鈣、氧化鋁或硅膠上;在適宜溫度下，特別是在0至50℃之間，例如在室溫下;如果必要在加壓下，例如在約1～20巴條件下)的存在下氫化來進行。
類似于式Ⅷ化合物的氫化反應，也可以氫化其中-NH-Y′被硝基所置換的類似化合物;然后所述氫化反應優選用阮內鎳在50～80巴的壓力下在150～190℃的溫度下在堿性水溶液，例如氫氧化鈉溶液中進行。相應的式Ⅴ化合物可直接獲得。
式Ⅷ化合物是已知的或可通過本身已知的方法制備，也正如其中-NH-Y′被硝基所置換的其類似物那樣。
式Ⅳ化合物可以例如制備如下若X3或X4為一價氨基保護基，例如酰基，如上所定義，則通過與產生酰基的式Ⅸ或Ⅹ的酸或與其活化衍生物的反應可以將游離的羥胺或其鹽轉化為N-保護形式，
其中X3′和X4′為如上所定義的作為氨基保護基團的酰基， 上述活化的衍生物也可首先通過氨基的酰化反應和保護基團的引入反應的習用方法，例如在上述或下述標準著作中所述的方法就地生成。如果X3′或X4′為，例如，低級鏈烷酰基或未取代或取代的苯甲酰基，則其中所述式Ⅸ或Ⅹ中的羥基被活化羥基所置換的活化衍生物可以為例如酰氧基(其中酰基為不與或優選與X3′或X4′相同的基團)、疊氮基、1-氮雜環烷基(azolido)[例如1-咪唑烷基(imidazolido)〕、鹵素(例如氯或溴)、或硝基苯氧基;例如相應的酸酐、酰基疊氮或酰基鹵，特別是相應的酰氯。活化的酸衍生物的制備可就地例如通過在碳化二亞胺類，例如N，N′-二低級烷基-或N，N′-二C5-C7環烷基-碳化二亞胺(例如二異丙基碳化二亞胺或N，N′-二環己基碳二亞胺)的存在下，有利地是在活化催化劑(例如N-羥基琥珀酰亞胺，或未取代的或被鹵素、低級烷基或低級烷氧基取代的N-羥基苯并三唑)的存在下反應進行。若必要可加入堿，例如叔胺類，例如三乙胺、二異丙基乙基胺、二甲氨基吡啶、N-甲基嗎啉或吡啶。若X3′或X4′為碳酸半酯基團，則X3′或X4′中的羥基優選作為上述所定義的活化的羥基存在于式Ⅸ或Ⅹ化合物中;特別是，然后所述羥基被鹵素(例如氯或溴)或氮雜環基(例如咪唑基)所置換。
烷基亞胺甲基X3或X4是例如通過類似于由Meyers，A.等人描述于J.Am.Chem.Soc.106，3270(1984)中的方法而被引入羥胺中的;所述叔丁基亞胺甲基例如通過使游離的羥胺與N，N-二甲基-N′-叔丁基甲脒在催化量的硫酸銨的存在下在甲苯中在回流溫度下反應，或用另一種方式通過使叔丁基甲酰胺與Et3O+BF4-在二氯甲烷中在室溫下反應，加入所述氨基化合物并在室溫至40℃的溫度下進一步反應而引入的。
胲基二磺酸(在式Ⅳ化合物中X3和X4為磺基)，并且特別是其堿土金屬或銨鹽可例如通過使堿金屬亞硝酸鹽的濃溶液與堿金屬硫酸氫鹽，或相應的銨鹽，及二氧化硫反應來制備的。
在式Ⅳ化合物中的芳基甲基X3和/或X4可例如通過使羥胺與芳基甲基鹵化物，特別是芳基甲基氯化物或溴化物反應，伴有鹵原子的親核置換，優選通過在叔胺(例如三乙胺或吡啶)存在下，在非質子傳遞溶劑(例如醚，例如四氫呋喃或二噁烷;或碳酸酰胺，例如二低級烷基甲酰胺，例如二甲基甲酰胺)中反應而引入。
如果式Ⅳ化合物中的X3和X4一起為二價氨基保護基團，則下列制備方法優選用于這些起始化合物的制備式Ⅳa的肟衍生物其中Xⅲ為如上對于式Ⅱ化合物中X3和X4所定義的二價的一取代的或二取代的亞甲基，可以由相應的醛或酮中間體(其中式Ⅳa中的＝N-OH被雙鍵氧(＝O)所置換)在下述條件下反應而制備在醛類或酮類與氨基化合物、羥胺[優選以鹽的形式，特別是與無機酸例如氫鹵酸、例如鹽酸的鹽，與硫酸的鹽，例如以硫酸鹽或硫酸氫鹽的形式，與磷酸的鹽，例如作為磷酸鹽、磷酸氫鹽或磷酸二氫鹽，與有機酸，例如可在低級烷基被鹵素，例如氟、氯或碘所取代的，或優選為未取代的低級鏈烷酸，例如乙酸、氯乙酸、二氯乙酸或三氟-或三氯乙酸，磺酸，例如低級鏈烷磺酸，例如甲磺酸或乙磺酸或乙二磺酸的鹽，或與芳族磺酸，例如苯磺酸或萘磺酸或萘-1，5-二磺酸的鹽，或以復鹽的形式，例如Zn(NH2OH)2Cl2(Crismers試劑)]反應的習用條件下;在與相應的醛或酮在水、含水溶劑混合物(例如水與醇類，例如甲醇或乙醇、二低級烷基亞砜類，例如二甲亞砜、或二低級烷基-低級鏈烷酰胺類，例如二甲基甲酰胺的混合物)中，或于有機溶劑，例如上面最后所述化合物，或足夠惰性的腈類，例如乙腈、其混合物或液氨中，優選在含水的醇溶劑中，例如在甲醇/水或乙醇/水中;在-78℃至回流溫度，優選-30～100℃，特別5～90℃，例如在約80℃的溫度下;在1～10，000巴的壓力，優選若使用羥胺鹽時在常壓下;在無堿的存在下或優選，在使用羥胺的酸式鹽的情況下，用堿，特別是羥基堿，例如堿金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉或氫氧化鉀，用碳酸鹽或碳酸氫鹽，特別是堿金屬碳酸鹽或堿金屬碳酸氫鹽或堿土金屬碳酸鹽或堿土金屬碳酸氫鹽;例如碳酸鈉或碳酸鉀或碳酸氫鈉或碳酸氫鉀，用弱有機酸的鹽，特別是低級鏈烷羧酸的堿金屬鹽，例如乙酸鈉或乙酸鉀，用有機氮堿，特別是位阻(仲或叔)胺類，例如吡咯烷，或吡啶，或用陰離子交換器，例如Amberlite IR-4B緩沖所述酸，在特別優選有堿金屬碳酸鹽的存在下進行反應。另一方面，其中Xⅲ為1-低級烷氧基-低級亞烷基的式Ⅳa化合物可例如用類似于通過Chem.Abstr.73，25359和66520(1970)獲得的方法來得到。
式Ⅳa的烴基二羧酸衍生物，其中Xⅲ為上述對式Ⅱ化合物中X3和X4所定義的通過兩個羰基鍵合的烴基二羧酸基，可以例如，通過羥胺與相應的可提供所述烴基二羰基的游離羥基二羧酸類，或其活性衍生物的反應來制備。活性衍生物為，例如，相應的二羧酸酐、二羧酰基二疊氮或二羧酰二鹵，特別是相應的二羧酰二氯、或相應的內二羧酸酐(通過氧雜鍵合的兩個羰基)，或就地生成的活性衍生物，例如按上述對式Ⅸ和Ⅹ化合物在與羥胺反應中所述方法制備。所述反應優選在類似于上面對式Ⅸ和Ⅹ化合物的反應所述條件下進行。所述相應的二羧酸二酯類，例如二羧酸二低級烷基酯，例如二羧酸二甲酯或二乙酯與羥胺的氨基轉移作用也可能發生。
式Ⅴ化合物可從市場上買到，是已知的或可按本身已知的方法制備。
例如，式Ⅴ化合物可以由其中Y1被氫所置換而其它基團如上所定義的式Ⅷ化合物開始通過上述方法來制備，或通過其中Y被氫原子所置換的上面所定義的式Ⅶ化合物的類似物，在對于式Ⅶ化合物中酰胺鍵的還原和解離所述條件下的反應制備。
式Ⅴ化合物，其中A為C3-C5亞環烷基(特別是1，3-亞環丁基)，m為1和n為0或1，特別是0;
條件是a)基團-W＊1(羥基)與基團H2N-之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子，并且b)-(CH2)m-W＊1與H2N-(CH2)n-兩基團不鍵合到A的同一環碳原子上，可以特別由式Ⅺ化合物，
其中A＊＊為C3-C6亞環烷基，特別是亞環丁-1-基-3-基，n″為0或1，特別是0，和X＊1為叔低級烷氧羰基，例如叔丁氧羰基，或苯基-1-低級烷氧羰基，例如芐氧羰基，條件是a)基團H2C＝(亞甲基)與基團X＊1HN-之間的距離至少為2個并不大于3個碳原子，并且b)H2C＝與X＊1HN-[(CH2)n″]-兩基團不鍵合到A的同一環碳原子上，通過優選與BH3在醚(例如四氫呋喃)，與硼氫化鈉和醚合三氟化硼在二乙二醇二甲醚中，或與硼氫化鈉在低級鏈烷酸(例如乙酸)的存在下，在醚(例如四氫呋喃)中，在0～40℃的溫度下，特別是在0℃至室溫之間的溫度下的硼氫化反應，和隨后的優選與氫氧化銨或堿金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉或氫氧化鉀，及過氧化氫的水溶液在0～50℃，特別是在15～30℃之間的溫度下的堿性氧化反應來制備，所述亞甲基被轉化成羥甲基并且X＊1同時被除去。在優選的實施方案中，X＊1不被除去，并且得到式Ⅲ化合物，其中X1被上面最后所定義的基團X＊1所置換且X2被氫所置換，而其他基團如對式Ⅲ化合物所定義。
其中所述基團如上所定義，特別是A＊＊為亞環丁-1-基-3-基及n″為0或1，特別是0，的式Ⅺ化合物，例如可由式Ⅻ的羧酸其中A＊＊為C3-C6亞環烷基，特別是亞環丁-1-基-3-基，和n為0或1，特別是0，條件是a)基團H2C＝(亞甲基)與基團-COOH之間的距離至少為2個并不大于3個碳原子，并且b)H2C＝與HOOC-[(CH2)n″]-兩基團不鍵合到A的同一碳原子上，通過將式Ⅻ的羧酸，或其活化的酸衍生物，例如酰基鹵或與低級鏈烷酸(例如乙酸)的酸酐(它可用已知方法制備)，用疊氮化物鹽(例如堿金屬疊氮化物，例如疊氮化鈉)轉化為所述酰基疊氮并使之(優選在回流條件下)在叔低級鏈烷醇(例如叔丁醇)或苯基-1-低級鏈烷醇(例如芐醇)中反應;優選伴隨通過與有機磷酰基疊氮，例如二苯基磷酰基疊氮的疊氮化物，在上述醇中在回流條件下反應就地直接制備酰基疊氮;同時伴隨基團X＊1的重排和形成(類似于庫爾提斯降解反應)來制備。
式Ⅻ化合物是已知的或可通過本身已知的方法制備，例如通過類似于Cripps，H.N.等人在J.Am.Chem.Soc.81，2723-28(1959)中的方法來制備。
式Ⅴ化合物其中W＊1為羥基A為C3-C6亞環烷基，特別是1，3-亞環丁基，n為1和m為0，條件如上所述，也可以由式ⅩⅢ的酮基-腈化合物N≡C-(A＊＊＊)＝O(ⅩⅢ)其中A＊＊＊為C3-C6亞環烷基，例如亞環丁-1-基-3-基，條件是a)氰基與氧代基(＝O)之間的距離至少為2個并不大于3個碳原子，并且b)氧代和N≡C-兩基團不鍵合到A的同一環碳原子上;
通過同時或分步還原所述氰基和所述酮基，例如首先用適宜的復合氫化物，例如氫化鋰鋁(也可同時還原所述氰基)、LiAlH[OC(CH3)3]3或雙(3-甲基-丁-2-基)甲硼烷(disiamylborane)，在醚(例如乙醚或四氫呋喃)中;或特別是用硼氫化鈉或氰基硼氫化鈉，若必要在LiCl的存在下，在水或醇(例如低級鏈烷醇或低級鏈烷二醇，例如甲醇、乙醇或乙二醇)中;在0～50℃，例如25～40℃之間的溫度下還原所述酮基;并且(若必要)，例如通過在適宜的重金屬催化劑，特別是院內鎳的存在下，在醇，例如甲醇或乙醇中，優選在氨，例如1～15%(重量)氨的存在下，在0～50℃，例如25～40℃的溫度下的氫化反應隨后還原所述氰基來制備。
式ⅩⅢ的酮基腈類是已知的或可以通過本身已知的方法制備。例如，3-氧代環丁烷基腈可以由3-亞甲基環丁烷基腈在水和醚(例如乙醚)的混合物中，在0～30℃，特別是在5～10℃的溫度下，通過加入鋨酸并緩慢加入堿金屬偏高碘酸鹽，例如偏高碘酸鈉，優選在惰性氣氛，例如氮氣氛下反應，過濾，用不能與水混合的有機溶劑，例如鹵代低級烷烴，例如氯仿洗滌，蒸發有機相，將殘余物溶于醚，例如四氫呋喃中，加入汞和碳酸銀，使其回流并避光，蒸發掉醚并在油泵抽真空條件下蒸餾相應的式ⅩⅢ產物來制得。3-亞甲基環丁烷基腈可以由丙二烯與丙烯腈的環加成反應獲得(Cripp，H.N.等人，于J.Am.Chem.Soc.81，2723-28(1959)中)。
式Ⅴ化合物其中A如對式Ⅰ化合物所定義，特別是1，2-亞環丙基，m為1，n為1和W＊1為羥基，條件如上所述，
可以通過例如下述方法制備其中將式ⅩⅠⅤ的氰基羧酸酯N≡C-〔(CH2)n-1〕-A-〔(CH2)m-1〕-COOG(ⅩⅠⅤ)其中A如上所定義和G為低級烷基，例如甲基或乙基，芳基，例如苯基、萘基或芴-9-基或芳基-低級烷基，例如苯基-、萘基-或芴-9-基甲基和n和m如上最后所定義，條件是所述氰基與基團-COOG之間的距離為2個碳原子， 通過同時或分步還原所述氰基和所述酮基而轉化為相應的式Ⅴ化合物，例如用適宜的復合氫化物，例如氫化鋰鋁(優選;也可同時還原所述氰基)或LiAlH[OC(CH3)3]3在醚，例如乙醚或四氫呋喃中;或用硼氫化鈉在LiCl存在下在水或醇，例如低級鏈烷醇或低級鏈烷二醇，例如甲醇、乙醇或乙二醇中;在0℃至回流溫度之間，特別是在回流溫度下;或用堿金屬，例如鈉，在醇，例如乙醇中首先還原所述酯基(-COOG);并且(若必要)隨后，例如通過在適宜的重金屬催化劑，特別是阮內鎳的存在下，在醇，例如甲醇或乙醇中，在0～50℃，例如25～40℃的溫度下的氫化反應來還原所述氰基;或者一次性地在適宜催化劑，特別是堿性重金屬或其氧化物，例如鎳或鈷(優選鎳或阮內鎳在醇類，例如乙醇中，在150～190℃的溫度下在加壓，例如在50～200巴下)，或貴金屬或貴金屬氧化物，例如鉑、氧化鉑、鈀、氧化鈀或釕(優選在選自醇類，例如甲醇或乙醇，酯類，例如乙酸乙酯，及醚類，例如二噁烷的適宜溶劑，或上述溶劑的適宜混合物中;優選在過量氨，例如1～15%(重量)氨的存在下，也可將所述催化劑鍵合到適宜載體材料，例如木炭、硫酸鋇或硫酸鍶、碳酸鈣、氧化鋁或硅膠上;在適宜的溫度，例如0～50℃之間，例如在室溫下;若必要在加壓，例如在1～20巴條件下)的存在下，將所述酯基還原為所述羥甲基并將所述氰基還原為所述氨甲基。
式ⅩⅠⅤ化合物為已知的或可用本身已知的方法制備。例如，式ⅩⅠⅤ化合物其中A為1，2-亞環丙基和G為乙基(2-氰基環丙烷羧酸乙酯)，可以通過優選在升溫，特別是在回流條件下使重氮基乙酸乙酯(N2CH-CO-OEt)與丙烯腈(例如以相對于重氮基乙酸乙酯來講為2～3倍摩爾量)發生環加成反應，蒸餾出過量丙烯腈并隨后進一步加熱至溫度為120～170℃來制備。
其他起始原料是可從市場上買到的，是已知的或可用本身已知的方法制備。
其他方法通過已定義的方法獲得的并具有成鹽的性質的游離的式Ⅰ化合物可用本身已知的方式轉化為其鹽;因為這些化合物是堿性化合物，所以這可通過用酸或其適宜衍生物處理來進行。
此外，式Ⅱ化合物可以由用于純化目的[例如借助于具有可以純凈形式(例如以(S)或(R)構型)存在的不對稱中心的保護基團來用于分離被保護的非對映體或對映體]的式Ⅰ化合物制備。然后通過用上述方法除去保護基團來進行純化的式Ⅰ化合物的釋出。
可以幾種異構體形式存在的式Ⅰ化合物的異構體混合物可通過本身已知的方法分離成各個異構體。
順式或反式異構體或這兩者可通過習用方法從順式和反式異構體的混合物中以純凈的形式獲得。用于除去一種異構體或用于分離這兩種異構體的適宜方法是，例如，色譜方法，例如在硅膠上的吸附色譜法，用有機溶劑或溶劑混合物洗脫，例如烴類，例如液體低級烷烴，例如戊烷、己烷或庚烷，或酯類，例如低級烷基-低級鏈烷酸酯，例如乙酸乙酯，或其混合物，如果必要多效分配于不混溶溶劑中，例如水和不能與水混溶的有機溶劑，例如鹵代烴，例如二氯甲烷或氯仿中，或分級結晶法，例如由在有機溶劑，例如芳族化合物，例如苯、甲苯或二甲苯中的溶液進行分級結晶，如果必要加入純的順式或反式異構體晶種。
對映體混合物例如可被分離成各個對映體，優選通過與旋光純的成鹽試劑，例如(S，S)-或(R，R)-酒石酸、(R)-或(S)-乳酸、1(R)-或1(S)-樟腦磺酸或(L)-谷氨酸形成鹽，并分離如此獲得的非對映體混合物，例如通過分級結晶和/或通過機械方法獲得對映體分離;通過引入具有不對稱中心的旋光活性保護基團(例如(S)-1-苯基乙基)，并分離所得非對映體，例如通過分級結晶，優選用色譜法，例如通過分配色譜法或吸附色譜法，或通過分配于多相溶劑混合物中進行分離，并按上述方法除去所述保護基團;或通過在旋光柱材料，例如旋光石英、纖維素、旋光離子交換劑、共價鍵合到氨基丙基-硅膠上的D-二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸(Pirkle相)、鍵合到硅膠上的D-3，5-二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸，或共價鍵合到硅膠上的對映體純的氨基酸，例如(L)-纈氨酸或(L)-脯氨酸，如果方便和必要，也以銅復合物的形式的色譜法進行對映體混合物的分離。
優選直接應用這樣的起始原料，即它可選擇性地制備式Ⅰ化合物的各個異構體，例如純的順式或反式異構體或對映體純的起始原料，特別是式Ⅱ化合物。
游離的式Ⅰ化合物的鹽可用本身已知的方式制備，例如通過用酸(例如無機酸，例如鹽酸或硫酸;有機羧酸，例如己二酸，或有機磺酸，例如苯磺酸)，在適宜溶劑(例如水、醇、例如甲醇，醚，例如乙醚，或其混合物)中處理，或用適宜的陰離子交換劑試劑處理來制備，該陰離子交換劑試劑例如帶有相應酸的陰離子電荷。所述鹽可以用常規方式轉化成游離化合物，例如通過用適宜的堿性試劑，例如在自由溶液中的羥基堿，例如堿金屬氫氧化物，或例如帶有氫氧根的陰離子交換劑處理，例如通過色譜法或通過分批方法進行。
按如上所述方法，式Ⅰ化合物的鹽的轉化可以通過所述游離化合物的制備并隨后將其轉化成酸加成鹽來進行。
也可用第二種新酸將一種式Ⅰ化合物的酸加成鹽直接轉化成式Ⅰ化合物的另一種酸加成鹽和另一種酸。這種轉化作用優選如下進行a)通過將最初的酸加成鹽在自由溶液中在適量，例如過量的新酸的存在下反應，或b)在帶有新酸的陰離子的離子交換劑上進行。
凝膠色譜法鹽轉化方法也可用于所有反應中，該反應用于將式Ⅰ堿的酸加成鹽轉化成另一種酸加成鹽或轉化成游離化合物或游離堿及相應的酸。
在游離化合物或帶有二價負電荷酸的鹽(例如硫酸鹽)的情況下，特別是，若因此可得到晶狀的式Ⅰ化合物的鹽時，優選將游離化合物或一種鹽轉化成另一種鹽(例如鹵化物，例如氯化物)。
反應條件的一般定義作為以游離形式和以鹽形式存在的帶有成鹽基團的起始原料之間密切聯系的結果和作為以游離形式和以鹽形式存在的式Ⅰ化合物之間密切聯系的結果，在方便和必要時，上述或下述的相應的游離化合物或其鹽還可理解為其具有起始原料或式Ⅰ化合物的相應的鹽或游離化合物的意義。
若在起始原料中存在酸基，例如磺基或羧基，可以存在例如與堿形成的鹽，例如金屬鹽，例如堿金屬鹽或堿土金屬鹽，例如鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽或鈣鹽，銨鹽和與氮堿形成的鹽，例如季氮化合物，例如四低級烷基銨化合物等。如果存在堿性基團，例如，可存在類似于在式Ⅰ化合物的鹽的定義中所述的酸加成鹽。
根據所述方法和反應條件的不同，可以游離形式或以鹽形式獲得帶有其成鹽堿性基團的本發明化合物。
所述化合物，包括其鹽還可以以其水合物的形式獲得，或者其晶體可以包括，例如，用于所述結晶的溶劑。從所得化合物也可首先生成水合物，例如通過使其在空氣中放置。
不想讓其參與反應的官能基團，特別是氨基和羥基，可存在于起始原料中，若必要，以被保護的形式存在。保護基團，特別是氨基保護基團和羥基保護基團如果必要可通過本身已知的方法引入起始原料(例如式Ⅲ化合物)中。適宜的反應條件的實例描述于，例如下列標準著作中J.F.W.McOmie，“ProtectiveGroupsinOrgan.icChemistry”，PlenumPress，London，NewYork，1973和T.W.Greene，“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”，Wiley，NewYork，1984。只是在化學上可能的范圍內待保護的氨基可以用兩個保護基團同時保護。優選，在被保護的氨基中只存在一個一價或只存在一個二價保護基團。
可獲得的被保護的中間體可以被釋出或可以在不除去保護基團的條件下進一步使用。此時所用保護基團的引入、其性質及其消除均類似于上述或下述內容。如果在保護基團中存在不對稱中心并且該基團是對映體純的，例如以(S)-苯基-低級烷基-甲基，例如1(S)-苯基-乙基形式存在，則可以使用中間體的相應非對映體，以便通過分離這些非對映體，例如通過硅膠色譜法，使用有機溶劑混合物，例如(苯或甲苯)/(乙醚或二噁烷)/(二低級烷基酮，例如丙酮)來獲得對映體純的中間體或對映體純的式Ⅰ化合物。
如果必要，羥基，例如羥基W1，可以被保護的形式存在;象上述氨基保護基團那樣，所述相應的保護基團可以是一價或二價的(在后一種情況下，羥基和氨基還可以一起被保護，即，例如，氨基保護基團X1、X2、X3和X4中的一個或兩個各自均可用其另一個鍵保護羥基)。
羥基可以例如被一價的保護基團，例如酰基(例如可為未取代的或被鹵素，例如氯取代的低級鏈烷酰基，例如乙酰基或2，2-二氯乙酰基)，或特別是被對保護的氨基所述的碳酸半酯的酰基所保護。優選的羥基保護基團為例如，2，2，2-三氯乙氧羰基，4-硝基芐氧羰基或二苯基甲氧羰基。羥基還可以被三低級烷基甲硅烷基[例如三甲基甲硅烷基、三異丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基或，特別是，二甲基-(2，3-二甲基-2-丁基)甲硅烷基(即叔己基二甲基甲硅烷基)]、可易于被除去的醚化基團(例如烷基，例如叔低級烷基，例如叔丁基，氧雜-或硫雜-脂族或-環脂族烴基，特別是2-氧雜-或2-硫雜-脂族或-環脂族烴基，例如1-低級烷氧基-低級烷基或1-低級烷硫基-低級烷基，例如甲氧基甲基、1-甲氧基乙基、1-乙氧基乙基、甲硫基甲基、1-甲硫基乙基或1-乙硫基乙基，或具有5-7個環原子的2-氧雜-或2-硫雜環烷基，例如2-四氫呋喃基或2-四氫吡喃基，或相應的硫雜類似物)、和1-苯基-低級烷基(例如芐基、二苯基甲基或三苯甲游基)保護，其中所述苯基可為未取代的，或例如被鹵素(例如氯)、低級烷氧基(例如甲氧基)和/或硝基取代。
同時存在于一個分子中的羥基和氨基可以一起被保護，例如被二價的保護基團，例如亞甲基所保護，所述基團可為未取代的或，優選，例如被一個或兩個低級烷基或氧代所取代，例如被未取代或取代的亞烷基(例如低級亞烷基例如亞異丙基)、亞環烷基(例如亞環己基)、羰基或苯基亞甲基所取代。
被保護的羥基優選被低級烷氧羰基或三低級烷基甲硅烷基，特別是被三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、二甲基-(2，3-二甲基-2-丁基)甲硅烷基或叔丁氧羰基保護。
被適宜的酰基或被未取代或取代的1-苯基-低級烷基所保護的羥基可用類似于相應的被保護的氨基的方法釋出。被2，2-二氯乙酰基所保護的羥基，例如，可通過堿性水解釋出，而被叔低級烷基或被2-氧雜-或2-硫雜-脂族或-環脂族烴基所保護的羥基可通過酸解，例如通過用無機酸或強羧酸，例如三氟乙酸釋出。
同時存在于一個分子中并被低級烷基、低級亞烷基(例如亞異丙基)、亞環烷基(例如亞環己基)、或苯基亞甲基一取代或二取代的二價的保護基團，例如亞甲基同時保護的羥基和氨基可以通過酸性溶劑分解作用，特別是在無機酸或強有機酸存在下釋出。
三低級烷基甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基或二甲基-(2，3-二甲基-2-丁基)甲硅烷基，優選通過溶劑分解作用，例如用醇類，例如甲醇或乙醇，在20℃至回流溫度之間的溫度下除去。三低級烷基甲硅烷基還可通過酸解用無機酸，特別是氫氟酸，或強羧酸，或通過與釋放氟離子的金屬或堿的氟化物鹽，例如氟化氫和氮堿的酸加成鹽或金屬氟化物，例如堿金屬氟化物，例如氟化鈉或氟化鉀，在無或有大環多醚(“冠醚”)的存在下反應，或與有機季銨堿的氟化物，例如氟化四低級烷基銨或氟化三低級烷基芳基-低級烷基銨，例如氟化四乙基銨或氟化四丁基銨，在非質子傳遞性極性溶劑，例如醚類，例如四氫呋喃或二噁烷、二甲亞砜或N，N-二甲基乙酰胺的存在下，在約-20～50℃，例如在0°至室溫之間的優選溫度下反應除去。
2-鹵代低級烷氧羰基作為羥基保護基團可通過還原劑，例如還原性金屬，例如鋅，還原性金屬鹽，例如鉻(Ⅱ)鹽，或通過硫化合物，例如連二亞硫酸鈉或，優選硫化鈉和二硫化碳除去。
酯化的羥基，例如低級鏈烷酰氧基，例如乙酰氧基，也可通過酯酶釋出。
也可只為了從另一種構型化合物中分離出順式和反式化合物，例如順式和反式式Ⅲ化合物的目的而保護羥基。這特別可通過在對將相應的保護基團引入式Ⅴ化合物所述條件下將三低級烷基甲硅烷基保護基團引入式Ⅲ化合物中來實現。在隨后分離所述順式/反式異構體后，例如通過色譜法，優選在硅膠上使用適宜溶劑或溶劑混合物作洗脫劑分離后，可再從被分離出的異構體中按上述方法除去所述羥基保護基團。
上述反應可以在本身已知的反應條件下，在無(例如，若所述試劑本身用作溶劑或以熔化物存在)或，通常，在有溶劑或稀釋劑，優選對所用試劑呈惰性并溶解或懸浮它們的溶劑或稀釋劑的存在下，在無或有催化劑、縮合劑或中和劑的存在下，并且根據所述反應和反應參與物的性質的不同，在降低的溫度、常溫或升溫下，例如在約-80℃至約200℃，優選約-20℃至最高達回流溫度，例如在約0～30℃或在回流溫度下，在大氣壓力或于密封容器中，如果必要在加壓下，或在惰性氣氛中，例如在氬氣或氮氣氣氛下，如果必要在避光條件下，在方便和必要時從上述選擇適宜的參數來進行。詳細敘述的具體反應條件是優選的。
溶劑和稀釋劑是例如，水、醇類(例如低級烷基醇，例如甲醇、乙醇或丙醇)、二醇類(例如乙二醇)、三醇類(例如甘油)、或芳基醇類(例如苯酚)、酰胺類(例如羧酸酰胺類，例如二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，或無機酸的酰胺類，例如六甲基磷酰三胺或1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2(1H)-嘧啶酮(DMPU))、醚類(例如環醚類，例如四氫呋喃或二噁烷;或無環醚類，例如乙醚或乙二醇二甲醚)、鹵代烴類(例如鹵代低級烷烴類，例如二氯甲烷或氯仿)、酮類(例如丙酮)、腈類(例如乙腈)、酸酐類(例如乙酐)、酯類(例如低級鏈烷酸低級烷基酯類，例如乙酸乙酯)、二烷基亞砜類(例如二甲亞砜)、氮雜環化合物(例如吡啶)、烴類(例如低級烷烴類，例如庚烷;或芳族化合物，例如苯、甲苯或二甲苯)，或這些溶劑的混合物。可以選擇具體的適宜溶劑用于上述反應。
采用習用方法處理獲得的式Ⅰ化合物或其鹽例如過量試劑的溶劑分解作用;重結晶;色譜法，例如分配色譜法、離子色譜法或凝膠色譜法;在無機和有機溶劑相之間分配;簡單抽提或多次提取，特別是在酸化或提高堿度或鹽含量之后;干燥吸濕鹽;水解;過濾;洗滌;溶解;蒸發(如果必要在真空下或在高真空下);蒸餾;結晶，例如結晶所得油狀物形式的化合物或從所述母液中結晶，也可以對產物來講加入最終產物的晶體進行析晶;或將上述也可重復使用的處理步驟中的兩種或多種結合使用等。
起始原料和中間體可以以純凈形式(例如按上面最后所述處理后)，以部分純化的形式或，例如也可直接作為粗產物使用。
異構體，例如順式/反式異構體或對映體，可以在合成本發明化合物的任何適宜階段分離，或者在中間體階段或者在最終產物階段。這里所用方法類似于上面在“其它方法”中所述的方法或類似于在“一般反應條件”部分中所述的方法。也可以直接使用僅僅異構體純的起始原料。
與在實施例中所述方法類似的方法特別優選用于制備起始原料和最終產物。
本發明也涉及所述方法的實施方案，其中在任何反應階段作為中間體獲得的化合物被用作起始物質并且進行缺掉的步驟，或其中起始原料是在所述反應條件下生成的，或以衍生物(例如其鹽)的形式使用。
藥物組合物本發明還涉及藥物組合物，它包含作為活性成分的一種藥物活性的式Ⅰ化合物或其可藥用鹽。用于腸內、特別是口服，和用于非腸道給藥的組合物是特別優選的。所述組合物包含所述活性成分本身或，優選，可藥用載體。所述活性成分的劑量取決于待治療的疾病和物種、年齡、體重、皮膚面積和具體病癥，以及給藥方式。
所述藥物組合物包含約5%至約95%活性成分，單次劑量給藥形式優選含有約20%至約90%并且非單次劑量的給藥形式優選含有約5%至約20%活性成分。劑量單位形式，例如包衣片劑、片劑或膠囊劑，含有約0.01g至約2g，優選約0.05g至約1.0g的活性成分，特別是0.1至0.6g。
本發明還涉及式Ⅰ化合物用于制備用作為ODC抑制劑，例如用于治療對ODC的抑制產生應答的疾病，特別是上述疾病的藥物組合物的用途。
本發明的藥物組合物可以用本身已知的方法制備，例如通過常規的混合、粒化過程、包衣、溶解或冷凍干燥方法制備。因此，用于口服的藥物組合物可以通過將所述活性成分與一種或多種固體載體混合，如果必要，使所得混合物成粒，并加工所述混合物或顆粒，如果必要，加工成片劑或包衣的片心，如果必要通過加入附加的賦形劑來制得。
適宜的載體為，特別是，填充劑，例如糖類，例如乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇、纖維素制劑和/或磷酸鈣，例如磷酸三鈣或磷酸一氫鈣，以及其它粘合劑，例如淀粉類，例如玉米淀粉、麥淀粉、米淀粉或馬鈴薯淀粉，甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮，和/或，如果需要，崩解劑，例如上述淀粉類，和其他羧甲基淀粉、交聯聚乙烯吡咯烷酮、藻酸或其鹽，例如藻酸鈉。
附加的賦形劑特別是流動調節劑和潤滑劑，例如硅酸、滑石、硬脂酸或其鹽，例如硬脂酸鎂或硬脂酸鈣、和/或聚乙二醇，或其衍生物。
如果需要抵抗胃液，可用適宜的包衣提供包衣的片劑，所用包衣物質為特別是含有阿拉伯樹膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或如果必要有二氧化鈦的濃縮的糖溶液、在適宜有機溶劑或溶劑混合物中的包衣溶液、或用于制備對胃液有抵抗力的包衣的包衣溶液、適宜的纖維素制劑的溶液(例如鄰苯二甲酸乙酰基纖維素或鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素)。染料或顏料可以摻合到所述片劑或包衣的片劑包衣中，例如用于區分或鑒定不同的活性成分劑量。
可口服施用的藥物組合物也為干填充的明膠膠囊劑和軟、密封的明膠膠囊劑和軟化劑，例如甘油或山梨糖醇。所述干填充的膠囊可含有以顆粒形式的所述活性成分，例如與填充劑、例如玉米淀粉、粘合劑和/或潤滑劑，例如滑石或硬脂酸鎂，和如果必要穩定劑混合的活性成分。在軟膠囊中，所述活性成分優選溶解于或懸浮于適宜的液體賦形劑，例如脂油、石蠟油或液體聚乙二醇類中，也可以加入穩定劑。
其它口服給藥形式為，例如，以常規方式制備并含有所述活性成分的糖漿，例如以懸浮形式并以濃度為約5%～20%，優選約10%的形式，或以可給出適宜的單次劑量，例如，在計量5或10ml時的類似濃度存在。其他適宜的形式還有，例如用于搖動制劑的，例如在奶中的粉狀或液體濃縮物。所述濃縮物也可以單次劑填充。
可以作直腸施用的藥物組合物為例如，栓劑，它包含所述活性成分和栓劑基質的混合物。適宜的栓劑基質為，例如，天然存在的或合成的甘油三酯類、烷屬烴類、聚乙二醇類或高碳醇類。
適于非腸道給藥的組合物為，特別是，以水溶性形式，例如水溶性鹽形式存在的活性成分的水溶液、或含有增粘物質，例羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇和/或葡聚糖，和若必要有穩定劑的含水的注射懸浮液。所述活性成分也可在此以凍干物，如果必要混有賦形劑的形式存在，并可通過在非腸道給藥之前加入適宜溶劑溶解。
例如用于非腸道給藥的溶液也可用作輸注溶液。
本發明還涉及用于治療溫血動物，即哺乳動物，并且特別是人，優選那些需要所述治療的溫血動物的上述疾病狀況的方法。本發明的式Ⅰ化合物或其可藥用鹽(如果成鹽基團存在的話)可用于這種預防或治療目的，并優選以藥物組合物形式，例如以適于抑制鳥氨酸脫羧酶并且對抗對鳥氨酸脫羧酶的抑制產生應答的所述疾病之一，例如腫瘤或原生動物感染具有預防或治療有效量使用。對于體重為約70kg時，此時給藥日劑量為約0.3g至約15g，優選約0.5g至約5g的本發明化合物。
所述藥物組合物優選為適用于對溫血動物，例如人給藥，適用于治療或預防對鳥氨酸脫羧酶的抑制產生應答的上述疾病之一的藥物組合物，且它包含對抗對鳥氨酸脫羧酶的抑制產生應答的疾病有效量(特別是對抑制該酶有效量)的式Ⅰ化合物或其可藥用鹽，以及賦形劑。
下述實施例用于說明本發明，但并不限制其范圍。
縮寫BOC代表叔丁氧羰基。m.p.為“熔點”，decomp.為“伴隨分解”。鹽水(Brine)是在室溫為飽和的氯化鈉溶液。溫度以攝氏溫度給出。Rf值(被待測化合物覆蓋的遷移區與被溶劑前沿覆蓋的區的比率)用于描述薄層色譜法。在溶劑和稀釋劑的混合物的情況下，用體積比表示。
實施例1反式-4-氨基氧基-環己胺二鹽酸鹽將8.77g(0.0381mol)反式-(4-氨基氧基)-N-BOC-環己胺和180ml3.5M鹽酸的甲醇溶液的混合物在室溫攪拌3小時，然后真空蒸發。將殘余物溶于甲醇中，并再次真空蒸發該混合物。殘余物用甲醇/乙醚重結晶得到標題化合物，m.p.＞260℃(高于230℃褐色褪去)。
起始化合物制備如下a)反式-(4-氨基氧基)-N-BOC-環己胺將16.2g(0.04495mol)2-[反式-4-(N-BOC-氨基)-環己基氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和95ml水合肼的混合物在室溫攪拌1/2小時，然后加入145ml水并繼續攪拌1/2小時。加入450ml乙醚后，將反應混合物再攪拌2小時然后分出醚相。水相每次用200ml乙醚萃取三次。合并的醚相用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并真空蒸發。得到晶狀形式的標題化合物，m.p.105～106℃。
b)2-[反式-4-(N-BOC-氨基)-環己基氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮在20～30℃，在攪拌的同時，將12ml(0.0718mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)在80ml苯中的溶液滴加到14.62g(0.06791mol)順式-4-(N-BOC-氨基)-環己醇、11.1g(0.068mol)N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、17.84g(0.068mol)三苯膦和600ml苯的混合物中。將反應混合物在室溫再攪拌15小時然后真空蒸發。殘余物通過二氯甲烷在粒度為0.04-0.063mm的硅膠上進行快速色譜法純化。蒸發含有產物的級分后，得到標題化合物，為晶狀殘余物，m.p.207～208℃。
c)順式-4-(N-BOC-氨基)-環己醇和反式-4-(N-BOC-氨基)-環己醇將51.73g(0.237mol)連二碳酸二叔丁酯在100ml四氫呋喃中的溶液滴加到52g(0.2257mol)4-氨基-環己醇(Fluka，Buchs，Switzerland;順式/反式混合物;50%水溶液)在100ml四氫呋喃中的溶液中并將該混合物在室溫攪拌15小時。然后將反應混合物真空蒸發至干并將殘余物在300ml乙醚中攪拌，過濾并用乙醚洗滌該晶體后，得到反式標題化合物，m.p.166℃[參見Anti-CancerDrugDesign2，25(1987)]。將濾液真空蒸發并且殘余物用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶2和1∶1)在硅膠上通過快速色譜法純化。因此得到順式標題化合物，m.p.92～94℃。
實施例2順式-4-氨基氧基-環己胺二鹽酸鹽用類似于實施例1的方法，從0.875g(0.0038mol)順式-(4-氨基氧基)-N-BOC-環己胺和10ml3M鹽酸的甲醇溶液開始，但保持反應時間為20小時，得到標題化合物，m.p.196～197℃(伴隨分解)。
起始化合物制備如下a)順式-(4-氨基氧基)-N-BOC-環己胺將2g(0.00555mol)2-[順式-4-(N-BOC-氨基)-環己基氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和12ml水合肼的混合物在室溫攪拌1小時，然后加入50ml乙醚并繼續攪拌1.5小時。然后分離出有機相并按類似于實施例1a的方法處理。所得晶狀標題化合物在120～121℃熔化。
b)2-[順式-4-(N-BOC-氨基)-環己基氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮在20～30℃，將4.1ml(0.0244mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)滴加到5g(0.0232mol)反式-4-(N-BOC-氨基)環己醇(參見實施例1c)、3.8g(0.0232mol)N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、6.1g(0.0232mol)三苯膦和100ml四氫呋喃的混合物中。在室溫將反應混合物再攪拌15小時然后真空蒸發。為了分離出1，2-肼二羧酸二乙酯和氧化三苯膦，將油狀殘余物溶于乙酸乙酯中，將溶液冷卻至0℃并過濾，蒸發濾液并將同樣的操作再重復一次，只是使用乙醚。蒸發乙醚后得到的殘余物用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶2和1∶1)在硅膠上進行快速色譜法純化。蒸發含有產物的級分后，得到標題化合物，為晶狀殘余物，m.p.134～135℃。
實施例3反式-3-氨基氧基-環己胺二鹽酸鹽在攪拌的同時，將4.5g(0.0261mol)反式-(3-氨基氧基)-N-乙酰基-環己胺和22ml2M氫氧化鈉溶液(0.044mol)的混合物加熱回流15小時。將反應混合物冷卻并用二氯甲烷充分萃取，有機相用硫酸鈉干燥并真空蒸發。將該油狀殘余物溶于少量甲醇中，加入稍過量的2M鹽酸甲醇溶液并真空蒸發該混合物。用甲醇/乙醚重結晶該殘余物后，得到標題化合物，m.p.190℃(伴隨分解)。
起始化合物制備如下a)反式-(3-氨基氧基)-N-乙酰基-環己胺將13.4g(0.0443mol)2-[反式-3-(乙酰氨基)-環己基氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和70ml水合肼的混合物在室溫攪拌1小時。加入250ml乙醚后，再在室溫下繼續攪拌2小時，然后分出有機相并將水合肼相真空蒸發。向殘余物中加入500ml乙醇。將該混合物加熱至回流溫度，使其冷卻至室溫并過濾并將濾液真空蒸發。殘余物二氯甲烷/甲醇混合物(50∶1和9∶1)在硅膠上進行快速色譜法純化。蒸發含有產物的級分后從甲醇/乙醚中重結晶該殘余物，得到標題化合物，m.p.95～96℃。
b)2-[反式-3-(乙酰氨基)-環己基氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和2-[順式-3-(乙酰氨基)-環己基氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮在20～30℃，將46ml(0.275mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)滴加到39.3g(0.25mol)3-乙酰氨基環己醇[參見J.Am.Chem.Soc.75，1345(1953)]、40.78g(0.25mol)N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、65.58g(0.25mol)三苯膦和750ml四氫呋喃的混合物中，然后將反應混合物在室溫攪拌15小時。濾出沉淀出的產物，用四氫呋喃洗滌并用乙醇重結晶。因此得到反式標題化合物，在214～215℃熔化。
為了得到順式標題化合物，將上述濾液和上面重結晶中的母液合并并真空蒸發，殘余物用甲苯/異丙醇混合物(97.5∶2.5和19∶1)在硅膠上通過快速色譜法純化。蒸發含有產物的級分后，得到順式標題化合物，為晶狀殘余物，m.p.248～249℃。
實施例4順式-3-氨基氧基-環己胺二鹽酸鹽用類似于實施例3的方法，從1.38g(0.008mol)順式-(3-氨基氧基)-N-乙酰基-環己胺和7ml2M氫氧化鈉溶液(0.014mol)開始，得到標題化合物，m.p.193～194℃(伴隨分解)。
起始化合物制備如下a)順式-(3-氨基氧基)-N-乙酰基-環己胺在攪拌的同時，將3.02g(0.01mol)2-[順式-3-(乙酰氨基)-環己基氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(參見實施例3b)、0.52ml水合肼(0.0105mol)和60ml乙醇的混合物在回流下沸騰1小時。將該混合物冷卻至室溫并過濾，真空蒸發濾液并且殘余物用二氯甲烷/甲醇混合物(50∶1和50∶3)在硅膠上通過快速色譜法純化。蒸發含有產物的級分后，得到標題化合物，為油狀物，其逐漸固化成晶體，m.p.94～96℃。
實施例5順式-3-氨基氧基甲基-環戊胺二鹽酸鹽將2g(0.00555mol)2-[順式-3-(N-BOC-氨基)-環戊基甲氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和8ml水合肼的混合物在室溫攪拌 1/2 小時，然后加入25ml乙醚并繼續攪拌 1/2 小時。分離出有機相并且將水合肼相用乙醚充分萃取。合并的醚相用水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并真空蒸發。向如此得到的Rf值＝0.15(硅膠/乙酸乙酯∶己烷(2∶1)的順式-3-氨基氧基甲基-N-BOC-環戊胺粗品中加入25ml 3M鹽酸甲醇溶液并將該反應混合物在室溫攪拌15小時。真空蒸發并從乙醇/乙醚中重結晶殘余物后，得到標題化合物，m.p.137℃(伴隨分解)。
起始化合物制備如下a)2-[順式-3-(N-BOC-氨基)-環戊基甲氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮在20-30℃，在攪拌的同時，將2.94ml(0.01755mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)在10ml苯中的溶液滴加到3.6g(0.01672mol)順式-3-(N-BOC-氨基)-環戊烷基甲醇、2.73g(0.01673mol)N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、4.49g(0.01672mol)三苯膦和60ml苯的混合物中。將混合物在室溫攪拌1小時后，濾出在反應過程中形成的沉淀，將濾器上的殘余物懸浮于苯中并再次過濾該懸浮液。將后一操作重復兩次以上(在濾器上的殘余物1，2-肼二羧酸二乙酯)，并合并所得濾液并將其真空蒸發。殘余物的純化用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶3和1∶1)在硅膠上通過快速色譜法進行。因此得到標題化合物，m.p.162～163℃。
b)順式-3-(N-BOC-氨基)-環戊烷基甲醇在20分鐘時間內，在攪拌并用冰浴冷卻的同時，分批將2.7g(0.0714mol)硼氫化鈉加入到3.8g(0.018mol)N-BOC-2-氮雜二環[2.2.1]庚-3-酮在125ml甲醇的溶液中。將反應混合物再于0℃攪拌1小時并在室溫攪拌1小時，然后滴加入4.08ml(0.0714mol)乙酸在8ml甲醇中的溶液并將該混合物真空蒸發至干。將該晶狀殘余物分配于二氯甲烷和水中。有機相用鹽水洗滌后，用硫酸鈉干燥并真空蒸發，得到標題化合物，為晶狀殘余物，m.p.73-74℃。
c)N-BOC-2-氮雜二環[2.2.1]庚-3-酮將0.019g(0.00075mol)4-二甲氨基-吡啶加入到5.56g(0.05mol)2-氮雜二環[2.2.1]庚-3-酮[J.Org.Chem.39，564(1974)]和12g(0.055mol)連二碳酸二叔丁酯在50ml四氫呋喃中的溶液中并在室溫將該混合物攪拌15小時。然后將其真空蒸發并用乙酸乙酯/己烷重結晶該殘余物。因此得到標題化合物，它在89-90℃熔化。
實施例6順式-3-氨基氧基甲基-環丁胺二鹽酸鹽將10.3g(0.02973mol)2-[順式-3-(N-BOC-氨基)-環丁基甲氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮、54ml水和45ml濃(約12M)鹽酸的混合物加熱回流1.5小時。然后將反應混合物冷卻至0℃并過濾，濾器上的殘余物(苯二甲酸)用水洗滌并真空蒸發濾液。將殘余物溶于乙醇中并再真空蒸發該溶液。用甲醇/乙醚重結晶該殘余物后，得到標題化合物，m.p.192℃(伴隨分解)。
起始化合物制備如下a)2-[順式-3-(N-BOC-氨基)-環丁基甲氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮在20-30℃，在攪拌的同時，將6.54ml(0.0391mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)在30ml苯中的溶液滴加到7.5g(0.03726mol)順式-3-(N-BOC-氨基)-環丁烷基甲醇、6.08g(0.03726mol)N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、9.774g(0.03726mol)三苯膦和120ml苯的混合物中。將反應混合物在室溫攪拌2小時并過濾，該晶狀殘余物(1，2-肼二羧酸二乙酯)用苯洗滌并真空蒸發濾液。殘余物用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶3和1∶2)在硅膠上通過快速色譜法純化。蒸發含有產物的級分后用乙酸乙酯/己烷重結晶殘余物，得到標題化合物，m.p.131.5-132.5℃。
b)順式-3-(N-BOC-氨基)-環丁烷基甲醇在攪拌并用冰浴冷卻的同時，將98.95ml(0.09895mol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液滴加到17g(0.04947mol)順式-3-(N-BOC-氨基)-1-(叔己基二甲基甲硅烷基)氧基甲基-環丁烷(-叔己基-＝2，3-二甲基-2-丁基-)在75ml四氫呋喃中的溶液中。將該反應混合物在室溫再攪拌1.5小時，然后加入150ml鹽水并每次用100ml乙酸乙酯萃取該混合物5次。合并的有機相用100ml鹽水洗滌并真空蒸發后，殘余物用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶2和1∶1)在硅膠上通過快速色譜法純化。蒸發含有產物的級分并用異丙醚重結晶該殘余物。因此得到標題化合物，m.p.83-84℃。
c)順式-3-(N-BOC-氨基)-1-(叔己基二甲基甲硅烷基)氧基甲基-環丁烷和反式-(N-BOC-氨基)-1-(叔己基二甲基甲硅烷基)氧基甲基-環丁烷在20-25℃，在攪拌的同時，將49.18ml(0.2495mol)叔己基二甲基氯甲硅烷滴加到45.65g(0.2268mol)3-(N-BOC-氨基)-環丁烷基甲醇(EP 0 366 059 A2)和40.55ml(0.2723mol)1，8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯在400ml乙腈中的溶液中。將反應混合物在室溫再攪拌15小時然后真空蒸發。將殘余物分配在二氯甲烷和水之間，有機相用硫酸鈉干燥并蒸發并且油狀殘余物用己烷和己烷/乙酸乙酯混合物(49∶1和19∶1和12.5∶1)在硅膠上通過快速色譜法純化。蒸發含有產物的級分，得到順式標題化合物，Rf值＝0.25(硅膠/乙酸乙酯∶己烷(1∶15))和反式標題化合物，Rf值＝0.23，均為油狀物。
實施例7反式-3-氨基氧基甲基-環丁胺二鹽酸鹽用類似于實施例6的方法，從7.25g(0.02093mol)2-[反式-3-(N-BOC-氨基)-環丁基甲氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮、35ml水和30ml濃鹽酸開始，制得標題化合物，m.p.198℃(伴隨分解)。
起始化合物制備如下a)2-[反式-3-(N-BOC-氨基)-環丁基甲氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮用類似于實施例6a的方法，從5.6g(0.02782mol)反式-3-(N-BOC-氨基)-環丁烷基甲醇、4.54g(0.02783mol)N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、7.3g(0.02783mol)三苯膦和5.12ml(0.0306mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)開始，制得標題化合物，m.p.120-122℃。
b)反式-3-(N-BOC-氨基)-環丁烷基甲醇用類似于實施例6b的方法，從13.2g(0.03842mol)反式-3-(N-BOC-氨基)-1-(叔己基二甲基甲硅烷基)氧基甲基-環丁烷(參見實施例6c)在60ml四氫呋喃中的溶液和76.8ml(0.0768mol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液開始，制得標題化合物，m.p.98-100℃。
標題化合物7b也可如下制得在緩慢攪拌的同時，在室溫下，向10g3-(N-BOC-氨基)-環丁烷基甲醇[順式/反式混合物(參見EP0366059A2)]在20ml苯和30ml異丙醚中的溶液中加入少量反式-3-(N-BOC-氨基)-環丁烷基甲醇晶體作晶種。將該混合物攪拌15小時并過濾并且所述晶體用異丙醚洗滌。用異丙醚重結晶仍混雜有只有約3%順式-3-(N-BOC-氨基)-環丁烷基甲醇的粗產物，得到純的標題化合物，m.p.98-99℃。
實施例83-氨基氧基甲基-環丁胺二鹽酸鹽用類似于實施例6的方法，從1.15g(0.00332mol)2-[3-(N-BOC-氨基)-環丁基甲氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮、6ml水和5ml濃鹽酸開始，制得標題化合物，m.p.179℃(伴隨分解)。
起始化合物制備如下a)2-[3-(N-BOC-氨基)-環丁基甲氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮用類似于實施例6a的方法，從1.59g(0.0079mol)3-(N-BOC-氨基)-環丁烷基甲醇(EP0366059A2)、1.29g(0.0079mol)N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、2.07g(0.0079mol)三苯膦和1.39ml(0.0083mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)開始，制得標題化合物，m.p.108-109℃。
實施例93-氨基氧基-環丁基甲基胺二鹽酸鹽將 0.58g(0.001674mol)2-[3-(N-BOC-氨甲基)-環丁基氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮、3ml水合肼和10ml乙醚的混合物在室溫攪拌1/2小時。分離出醚相，向水合肼相加入2ml水和10ml乙醚，將該混合物在室溫攪拌1/4小時然后分離出有機相。重復剛才的操作后，用水和鹽水洗滌合并的醚相，用硫酸鈉干燥并真空蒸發。向如此制得的Rf值＝0.63(硅膠/二氯甲烷∶甲醇(9∶1)的油狀3-氨基氧基-N-BOC-環丁基甲基胺中加入10ml 3M鹽酸甲醇溶液，并將該反應混合物在室溫攪拌15小時。真空蒸發并用甲醇/乙醚重結晶殘余物后，得到標題化合物，m.p.213℃(伴隨分解)。
起始化合物制備如下a)2-[3-(N-BOC-氨甲基)-環丁基氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮用類似于實施例16的方法，所不同的是在快速色譜法中使用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶3和1∶1)，從15.24g(0.0757mol)3-(N-BOC-氨甲基)-環丁醇、12.35g(0.0757mol)N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、19.85g(0.0757mol)三苯膦和13.3ml(0.0795mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)開始，從乙酸乙酯中重結晶后制得標題化合物，它在161-162℃熔化，蒸發母液并用乙酸乙酯/己烷重結晶殘余物后得到另一批標題化合物，m.p.145-150℃。
b)3-(N-BOC-氨甲基)-環丁醇在1小時時間內，將59.2g(0.2712mol)連二碳酸二叔丁酯在100ml四氫呋喃中的溶液滴加到24.94g(0.2466mmol)3-氨甲基-環丁醇在180ml四氫呋喃中的懸浮液中。然后向反應混合物中加入80ml水，再在室溫繼續攪拌16小時并真空蒸發該混合物。得到標題化合物，為晶狀殘余物，它在96-99℃熔化。
c)3-氨甲基-環丁醇將24.28g(0.25mol)3-氰基-環丁醇[J.Am.Chem.Soc.93，110(1971)]、550ml約8%氨的乙醇溶液和10.9g阮內鎳的混合物在35℃氫化。在氫氣吸收的終點，濾出催化劑并真空蒸發濾液。得到標題化合物，為晶狀殘余物，它在72℃熔化。
實施例10順式-2-氨基氧基甲基-環丙基甲基胺二鹽酸鹽將1.5g(0.00433mol)2-[順式-2-(N-BOC-氨甲基)-環丙基甲氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和9ml水合肼的混合物在室溫攪拌1/2小時。然后向反應混合物中加入9ml水并且，再經1/2小時后，加入50ml二氯甲烷。將反應混合物進一步再攪拌3小時，然后分離出二氯甲烷相并每次用30ml二氯甲烷洗滌水相兩次。合并的有機相用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發。將因此得到的Rf值＝0.13(硅膠/乙酸乙酯∶己烷(1∶1))的油狀順式-2-氨基氧基甲基-N-BOC-環丙基甲基胺溶于18ml 3M鹽酸甲醇溶液中并在室溫將反應混合物攪拌1小時。加入乙醚并在冰浴中冷卻后，濾出結晶出的標題化合物，用乙醚洗滌并干燥，m.p.178-180℃(伴隨分解)。
起始化合物制備如下a)2-[順式-2-(N-BOC-氨甲基)環丙基甲氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮在20-30℃，在攪拌的同時，將2.61ml(0.0157mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)在15ml苯中的溶液滴加到3g(0.0149mol)順式-2-(N-BOC-氨甲基)-環丙烷基甲醇、2.43g(0.0149mol)N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、3.9g(0.0149mol)二苯膦和120ml苯的混合物中。將反應混合物在室溫攪拌16小時并過濾。晶狀殘余物用苯洗滌，并真空蒸發濾液。殘余物用己烷和己烷/乙酸乙酯(2∶1)在硅膠上通過快速色譜法純化。蒸發含有產物的級分并用甲醇/己烷重結晶殘余物后，得到標題化合物，m.p.96-97℃。
b)順式-2-(N-BOC-氨甲基)-環丙烷基甲醇將25.45g(0.1166mol)連二碳酸二叔丁酯在100ml四氫呋喃中的溶液滴加到10.9g(0.1078mol)順式-2-氨甲基-環丙烷基甲醇[J.Med.Chem.31，2304(1988)]在100ml四氫呋喃中的溶液中并將該混合物在室溫攪拌15小時。然后真空蒸發反應混合物并且殘余物用乙酸乙酯/己烷(1∶1)在硅膠上通過快速色譜法純化。蒸發含有產物的級分后，得到標題化合物，為無色油狀物，Rf值＝0.23(硅膠/乙酸乙酯∶己烷(1∶1)]。
實施例11反式-2-氨基氧基甲基-環丙基甲基胺二鹽酸鹽用類似于實施例10的方法，從0.46g(0.00133mol)2-[反式-2-(N-BOC-氨甲基)-環丙基甲氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮和3ml水合肼開始，制得油狀的反式-2-氨基氧基甲基-N-BOC-環丙基甲基胺，Rf值＝0.07(硅膠/乙酸乙酯∶己烷(1∶1))。將其溶于4.5ml 3M鹽酸甲醇溶液中，并在室溫將反應混合物攪拌1/4小時。蒸發并用乙醇/乙醚結晶后，得到標題化合物，m.p.175-176℃(伴隨分解)。
起始化合物制備如下a)2-[反式-2-(N-BOC-氨甲基)-環丙基甲氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮用類似于實施例10a的方法，從2.0g(0.00994mol)反式-2-(N-BOC-氨甲基)-環丙烷基甲醇、1.62g(0.00994mol)N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、2.61g(0.00995mol)三苯膦和1.75ml(0.01047mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)開始，制得標題化合物，為無色樹脂狀物，Rf值＝0.36(硅膠/乙酸乙酯∶己烷(1∶1))。
b)反式-2-(N-BOC-氨甲基)-環丙烷基甲醇用類似于實施例10b的方法，從11.69g(0.1156mol)反式-2-氨甲基-環丙烷基甲醇[J.Med.Chem.31，2304(1988)]和27.3g(0.1251mol)連二碳酸二叔丁酯開始，制得油狀物形式的標題化合物，Rf值＝0.16(硅膠/乙酸乙酯∶己烷(1∶1))。
實施例12反式-4-氨基氧基-環己胺二鹽酸鹽在氮氣氛下并在攪拌的同時，將19.65g(0.1141mol)反式-(4-氨基氧基)-N-乙酰基-環己胺和140ml15%濃度的氫氧化鈉溶液(0.525mol)的混合物在100℃加熱8小時。按類似于實施例3的方法處理后，得到標題化合物，m.p.＞260℃。
起始化合物制備如下a)反式-(4-氨基氧基)-N-乙酰基-環己胺將37.4g(0.1237mol)-2-[反式-4-(乙酰氨基)-環己基氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮、12.3ml(0.248mol)水合肼、620ml乙醇和225ml二氯甲烷的混合物加熱回流1小時。將該混合物冷卻至室溫并過濾，在濾器上的殘余物用二氯甲烷洗滌并真空蒸發濾液。將晶狀殘余物溶于200ml二氯甲烷中，濾出不可溶的成分并再次真空蒸發濾液。再次重復剛才的操作并使用250ml二氯甲烷。因此得到標題化合物，為晶狀殘余物，m.p.105-106℃。
b)2-[反式-4-(乙酰氨基)-環己基氧基]-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮在20-30℃，在攪拌的同時，將39.5ml(0.2413mol)偶氮二甲酸二乙酯(95%)在300ml四氫呋喃中的溶液滴加到36.13g(0.2298mol)順式-4-乙酰氨基環己醇[Ber.Dtsch.Chem.Ges.72，995，(1939)]、37.49g(0.2298mol)N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、60.28g三苯膦和1500ml四氫呋喃的混合物中。在室溫攪拌14小時后，向反應混合物中再加入各自為原先所用量的20%的三苯膦和偶氮二甲酸二乙酯，繼續攪拌6小時并使反應混合物在室溫放置2.5天。濾出所生成的晶狀沉淀并用四氫呋喃洗滌。如此制得的標題化合物在210-213℃熔化。通過進一步重結晶母液或對母液進行色譜法純化可提高產量。
實施例13膠囊含有0.25g活性成分，例如實施例1-12化合物之一的膠囊可制備如下
組成(用于5000個膠囊)活性成分1250g滑石180g麥淀粉120g硬脂酸鎂80g乳糖20g使粉狀物質通過網眼大小為0.6mm的篩并混合。通過膠囊灌注機器將各為0.33g的所述混合物分批填裝入明膠膠囊中。
實施例14藥理學數據在進行用于抑制鳥氨酸脫羧酶的IC50[采用大鼠肝臟的ODC(參見上述，通過Hayashi和Kameji方法獲得)通過Seely和Pegg的上述方法]和用上述方法進行用于抑制T24囊性癌細胞的增殖的IC50的測定時，使用所述諸實施例中所提到的具體化合物可獲得下列IC50值實施例中化合物ODC抑制作用T24細胞生長的抑制作用IC50(μM) IC50(μM)1)0.227.53)116)0.0837)0.0234.98)0.024.159)0.05310)0.4權利要求
1.式Ⅰ化合物或其鹽，其中基團A為C3-C6亞環烷基；n為0或1；并且m為0或1；條件是a)所述氨基氧基H2N-O-與氨基-NH2之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2兩基團不鍵合到A的同一環碳原子上。
2.根據權利要求1的式Ⅰ化合物或其鹽，其中基團A為C3-C6亞環烷基;n為0或1;并且m為0或1;條件是a)所述氨基氧基H2N-O-與氨基-NH2之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2兩基團不鍵合到A的同一環碳原子上。
3.根據權利要求1的式Ⅰ化合物或其鹽，其中基團A為C3-C6亞環烷基;n為0;和m為0或1;條件是a)所述氨基氧基H2N-O-與氨基-NH2之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2兩基團不鍵合到A的同一環碳原子上。
4.根據權利要求1的式Ⅰ化合物或其鹽，其中基團A為C3-C6亞環烷基;n為0;和m為0;條件是a)所述氨基氧基H2N-O-與氨基-NH2之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2兩基團不鍵合到A的同一環碳原子上。
5.式Ⅰ化合物或其鹽，其中A為1，2-亞環丙基、1，3-亞環丁基、1，3-亞環戊基、或1，3-或1，4-亞環己基;m為0或1;和n為0或1;條件是所述氨基氧基H2N-O-與氨基-NH2之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子。
6.根據權利要求1的式Ⅰ化合物或其鹽，其中A為1，2-亞環丙基、1，3-亞環丁基、1，3-亞環戊基、或1，3-或1，4-亞環己基;m為0或1;和n為0或1;條件是a)所述氨基氧基H2N-O-和氨基-NH2之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子;b)若A為1，2-亞環丙基或1，3-亞環丁基時，則n為0或1;且c)若A為如上所定義的除1，2-亞環丙基或1，3-亞環丁基外的基團時，則n為0。
7.根據權利要求1的式Ⅰ化合物或其鹽，其中A為1，2-亞環丙基、1，3-亞環丁基、1，3-亞環戊基、或1，3-或1，4-亞環己基;n為0;和m為0或1;條件是所述氨基氧基H2N-O-與氨基-NH2之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子。
8.以順式或反式形式存在的根據權利要求1至7中任何一項的式Ⅰ化合物或其鹽。
9.以順式或反式形式存在的，若存在不對稱碳原子時為純對映體的根據權利要求1至7中任何一項的式Ⅰ化合物或其鹽。
10.根據權利要求1的式Ⅰ化合物或其鹽，其中A為1，4-亞環己基;n為0，和m為0;并且所述化合物以順式或反式形式存在。
11.根據權利要求1的式Ⅰ化合物或其鹽，其中A為1，3-亞環丁基;n為0，和m為0或1;并且所述化合物以順式或反式形式存在。
12.以反式形式存在的根據權利要求10或11的式Ⅰ化合物或其鹽。
13.根據權利要求1的式Ⅰ化合物或其鹽，其中A為1，2-亞環丙基;n為0或1，和m為1;并且所述化合物以順式或反式形式存在。
14.以順式形式存在的根據權利要求13的式Ⅰ化合物或其鹽。
15.根據權利要求1的式Ⅰ的反式-4-氨基氧基-環己胺或其可藥用鹽。
16.根據權利要求1的式Ⅰ的順式-4-氨基氧基-環己胺或其可藥用鹽。
17.根據權利要求1的式Ⅰ的反式-3-氨基氧基-環己胺或其可藥用鹽。
18.根據權利要求1的式Ⅰ的順式-3-氨基氧基-環己胺或其可藥用鹽。
19.根據權利要求1的式Ⅰ的順式-3-氨基氧基甲基-環戊胺或其可藥用鹽。
20.根據權利要求1的式Ⅰ的順式-3-氨基氧基甲基-環丁胺或其可藥用鹽。
21.根據權利要求1的式Ⅰ的反式-3-氨基氧基甲基-環丁胺或其可藥用鹽。
22.根據權利要求1的式Ⅰ的3-氨基氧基甲基-環丁胺或其可藥用鹽。
23.根據權利要求1的式Ⅰ的3-氨基氧基-環丁基甲基胺或其可藥用鹽。
24.根據權利要求1的式Ⅰ的順式-2-氨基氧基甲基-環丙基甲基胺或其可藥用鹽。
25.根據權利要求1的式Ⅰ的反式-2-氨基氧基甲基-環丙基甲基胺或其可藥用鹽。
26.一種藥物組合物，該藥物組合物包含根據權利要求1至25中任何一項的式Ⅰ化合物或其鹽的一種化合物，或其可藥用鹽以及可藥用載體。
27.一種用于治療或預防對鳥氨酸脫羧酶的抑制產生應答的溫血動物的疾病的藥物組合物，該藥物組合物包含對抗對鳥氨酸脫羧酶的抑制產生應答的疾病有效量的根據權利要求1的式Ⅰ化合物或根據權利要求1的其可藥用鹽，以及可藥用載體。
28.一種用于治療對鳥氨酸脫羧酶的抑制產生應答的疾病的方法，該方法包含對需要這種治療的溫血動物給藥預防或治療抑制鳥氨酸脫羧酶有效量的根據權利要求1的式Ⅰ化合物或其可藥用鹽。
29.根據權利要求1至25中任何一項的式Ⅰ化合物或其可藥用鹽用于治療對所述酶鳥氨酸脫羧酶的抑制產生應答的疾病的用途。
30.根據權利要求1至25中任何一項的式Ⅰ化合物或其鹽用于制備用于治療腫瘤或原生動物感染的藥物組合物的根據權利要求29的用途。
31.根據權利要求1至25中任何一項的式Ⅰ化合物或其鹽用于制備用于治療對所述酶鳥氨酸脫羧酶的抑制產生應答的疾病的藥物組合物的用途。
32.根據權利要求1至25中任何一項的式Ⅰ化合物或其鹽用于制備用于治療腫瘤的藥物組合物的根據權利要求31的用途。
33.用于診斷性或治療性治療人或動物體的方法中的根據權利要求1至25中任何一項的式Ⅰ化合物或其鹽。
34.用于治療對所述酶鳥氨酸脫羧酶的抑制產生應答的疾病的根據權利要求1至25中任何一項的式Ⅰ化合物或其鹽。
35.制備根據權利要求1的式Ⅰ化合物的方法，該方法包含這樣的步驟，其中從式Ⅱ化合物或其鹽(如果存在成鹽基團的話)制備，然后除掉所存在的氨基保護基團，其中A、n和m如式Ⅰ化合物中所定義，條件是ⅰ)基團-O-NX3X4與基團X1X2N-之間的距離至少為3個并不大于4個碳原子，并且ⅱ)X1X2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NX3X4兩基團不鍵合到A的同一環碳原子上;并且其中X1、X2、X3和X4彼此獨立地為氫或一價的氨基保護基團，也可以X1與X2、X3與X4、或X1與X2和X3與X4在每種情況下一起形成二價保護基團;并且如果必要其中不參與反應的其它官能團以被保護的形式存在，條件是基團X1、X2、X3和X4中至少一個為氨基保護基團;并且，如果必要，將獲得的式Ⅰ化合物轉化為其它的式Ⅰ化合物，將獲得的異構體混合物分離成異構體，和/或將獲得的游離的式Ⅰ化合物轉化為鹽，或將獲得的式Ⅰ化合物的鹽轉化為游離的式Ⅰ化合物或轉化為其他鹽。
全文摘要
本發明描述了式I化合物及其鹽，其中基團A為CH
文檔編號A61P35/00GK1104411SQ94190173
公開日1995年6月28日 申請日期1994年4月2日 優先權日1993年4月13日
發明者J·弗賴, J·施坦內克 申請人:西巴-蓋爾基股份公司