專利名稱：一種治療痞滿證(功能性消化不良)的中藥及其制備工藝的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種治療痞滿證(功能性消化不良)的中藥及其制備工藝，特別是一種適應于因消化道動力不良引起的痞滿證(功能性消化不良)的中藥及其制備工藝。
背景技術：
痞滿證(功能性消化不良)是內科消化系統中的常見病和多發病，在中醫臨床中經常表現為肝胃郁熱、肝胃氣滯、胃失和降的證侯，常由消化道動力不良引起。該病涉及的范圍廣泛，發病人群基數大，在各地發病率并無明顯的地域差異和時間差異。同時在人的一生中，絕大多數人都曾親身體驗過與本病類似的胃脘脹滿疼痛等癥狀表現。近年來由于生活節奏的加快，精神情志因素影響，以及飲食習慣的改變等多種原因，使本病的發病率有逐漸增高的趨勢，嚴重地影響了廣大患者的身心健康，并可引起食管粘膜充血、水腫、甚至糜爛等炎性改變以及食管功能障礙的疾病，嚴重者可出現食管粘膜糜爛而出血，并引發反流性食管炎、食管腺癌、胃炎、胃潰瘍及胃癌。
本病涉及人群廣泛，往往需要長期、反復服藥，治療時間長、費用高。當前國內外已有一些治療該項疾病的常規的西藥藥物，如嗎丁啉(多潘立酮)、普瑞博思(西沙必利)(楊森公司最新研制并生產)、西沙必利及胃復安、奧丹西隆等，有良好的療效，但由于病情易于反復，且有一定的副作用，如嗎丁啉對中樞神經系統、錐體外系的副作用，西沙必利可出現稀糞與腹瀉等，其遠期療效亦有待進一步提高。
現有技術中未檢索出對上述病機有良好治療效果且無毒副作用的中藥。

發明內容
本發明的目的在于提供一種對上述痞滿證(功能性消化不良)有良好治療效果且無毒副作用的中藥及其制備工藝。
為達到上述目的，本發明采用如下技術方案它基本上由以下重量份數的組分組成
龍膽800～1200人參莖葉總皂苷10～40大黃5～20本發明所述的中藥的制備工藝為龍膽切成小段，70％乙醇常溫浸提3次，合并浸提液，濾過，濾液回收乙醇，減壓濃縮至相對密度為1.1(30℃)的浸膏，用水溶解，加于樹脂柱上，先用水沖洗至無色，再用乙醇洗脫，收集洗脫液至薄層色譜檢不出為止，減壓濃縮，真空干燥，粉碎，得龍膽提取物細粉。取龍膽提取物細粉、大黃生藥粉和人參莖葉總皂苷混勻，加粘合劑、崩解劑、填充劑適量，乙醇制粒，干燥，整粒，與硬脂酸鎂混勻，壓片，包薄膜衣，即得薄膜衣片，采用常規工藝，它可以進一步制成膠囊劑、口服液、糖漿劑、分散片、含片、泡騰片、顆粒劑、丸劑等。
方中首選龍膽為君藥。
龍膽性味苦，寒。入肝、膽、胃經。寒則清熱，苦則燥濕，而清胃中伏熱、瀉肝脾胃之火，調肝脾胃之氣。
人參莖葉總皂苷為臣藥。
人參莖葉總皂苷為人參莖葉中提取的活性成分，性味甘、微苦，微溫。入脾、肺、心經。具有補氣養陰，清熱生津之功效，善補肝脾胃之氣。
大黃為佐藥。
大黃性味苦、寒。入脾、胃、大腸經。具有瀉下攻積，瀉火，清熱解毒，逐瘀通腑，活血化瘀，消炎止痛，消化濕熱之功效。
全方一君，一臣一使，從痞滿證脾虛，肝胃郁熱的主要病機入手，遣藥組方。三藥配伍具清熱燥濕，活血化瘀，益氣健脾，消炎止痛之功效，而達到清熱通腑，益氣消痞，治療痞滿證(功能性消化不良)的目的。
以下研究結果說明本發明的有益效果一、制備工藝研究(一)龍膽工藝研究1.藥材吸收乙醇量的試驗取處方中龍膽粗粉分為3份，分別加3倍量30％、50％、80％乙醇浸透，每隔半小時觀察一次浸透藥粉情況，直止藥粉全部浸泡，共浸2小時，濾出全部未被吸收的乙醇溶液，從剩余乙醇量計算，處方中藥材對上述不同濃度的乙醇溶液的吸收量基本相當，大約為1倍量。
2.浸提過程的正交試驗龍膽的有效成份偏親水性，以乙醇為提取溶劑，對其影響因素進行綜合分析后，選定乙醇濃度(A)、提取溫度(B)、提取次數(C)、提取時間(D)為主要因素，按4因素3水平即L9(3)4設計正交試驗，以龍膽干浸膏粉中龍膽苦苷的含量作為評價指標。
結果表明，各影響因素的強弱依次為提取時間＞提取次數＞提取溫度＞乙醇濃度，后二者作用很小。結合K值綜合分析應以乙醇濃度90％、提取溫度80℃、提取3次、每次2小時工藝為正交最佳工藝，經計算成本及在大生產中實際試驗，乙醇濃度70％、常溫提取3次、每次6小時為龍膽最優提取工藝。
3.龍膽樹脂分離工藝考察為了減少制劑體積，提高有效成分含量，減少服藥量，本工藝對龍膽醇提物進行了分離處理。
(1)樹脂選型選取苷類分離精制常用樹脂型號進行比較，結果表明AB-8樹脂適合龍膽苦苷的分離。
(2)洗脫劑選擇取AB-8樹脂240g，預處理后等分為4份，分別裝柱。以30％、50％、70％、90％的乙醇為洗脫劑，分柱洗脫。
結果表明，70％乙醇洗脫效果最好。
(3)飽和度測定精密稱取龍膽苦苷對照品，加水稀釋。檢測方法含羧甲基纖維素鈉的硅膠GF254薄層板，展開劑為醋酸乙酯-甲醇-水(20∶2∶1)，紫外光燈(254nm)下檢視。
結果表明，樹脂飽和度為3.69％。
(4)樹脂的預處理及再生新樹脂先用乙醇浸泡24小時，洗至加水不發生白色混濁時，用5％鹽酸溶液浸泡2-4小時，水洗至中性，用2％氫氧化鈉溶液浸泡2-4小時，水洗至中性，即可上樣。
樹脂連續運行時不必再進行處理，停運時要充分解吸，洗凈，浸泡在10％以上的氯化鈉溶液中，使用時重新預處理。
4.龍膽整個工藝過程驗證取龍膽藥材3份，70％乙醇常溫浸提3次，每次6小時，第一次用乙醇量為5倍量、其余二次均為4倍量，合并浸提液，濾過，濾液回收乙醇，減壓濃縮(40～45℃，0.085MPa)至相對密度為1.1(30℃)的浸膏，加3倍量水溶解，加于AB-8樹脂柱上(經預處理)，先用水沖洗至無色時，改用70％乙醇洗脫，流速0.5ml/min，收集洗脫液(約為原材料的1.6倍)至薄層檢不出為止，減壓濃縮，真空干燥(40～45℃，0.085MPa)，粉碎，得龍膽提取物細粉，稱重，并測定其中龍膽苦苷含量。
結果表明，龍膽工藝基本穩定。整個過程龍膽苦苷的轉移率為75～85％。(二)大黃工藝研究大黃在方中用量較小，單提成本太高。若與龍膽混合提取，由于大黃蒽醌類化合物多有酚羥基，在溶液中呈弱酸性，可能影響龍膽活性成分的提取。
故此將大黃粉碎，過六號篩，滅菌，以原生藥粉直接加入。二、主要藥效學研究胃腸道運動功能試驗1.對家兔胃內壓的影響將禁食24h健康家兔用3％戊巴比妥鈉靜脈麻醉，仰位固定。經口插入胃內壓測定球囊導管和胃管，以備測定胃內壓和給藥。操作完畢后，穩定20min，正常水對照組動物經胃管給予生理鹽水5ml/kg，記錄灌胃后15min、30min和1h時的胃內壓變化的情況；給藥組動物以0.2、0.4、0.8g/kg的劑量分別灌胃給予本品蒸餾水溶液；新斯的明組動物靜注新斯的明注射液0.14mg/kg，然后觀察給藥后15min、30min和1h時的胃內壓變化情況。包括胃蠕動頻率、蠕動波幅和胃內壓張力升降情況，均采用5分鐘內平均值，其中胃蠕動波幅以mm計。胃內壓張力升降情況以給藥前胃內壓張力低點為基線，給藥后該基線升高則表示胃內壓力升高，反則亦然。
結果表明胃蠕動性運動，使胃內壓改變。本實驗結果顯示，生理鹽水對照組動物胃內壓變化波型表現為有節律蠕動波，波基線平穩，說明張力性胃內壓沒有改變。但各給藥組動物的胃內壓變化波頻率加快，波幅增高，但張力胃內壓呈下降趨熱，即波基線逐漸下降。與陽性藥新斯的明的結果基本一致。說明本品能增強胃的蠕動頻率和胃的蠕動強度，同時使胃的受容性舒張功能增強。
2.本品及拆方組分別對小鼠胃排空運動的影響(比色法)
取健康小鼠，雌雄各半，隨機分為11組，即生理鹽水對照組、嗎丁啉陽性對照組，本品大劑量組、中劑量組、小劑量組。經預試復方中劑量作用較明顯，故將中劑量拆方拆方成分A、B、C，A+B，B+C，A+C。每日灌胃給藥0.2ml/10g體重，連續三天，于實驗前12h禁食，自由飲水。實驗當日為避免中藥本身顏色對測量的干擾，采用皮下注射給藥0.2ml/10g體重。對照組給等體積生理鹽水。給藥40分鐘，每只小鼠灌胃給0.2ml 0.1％甲基橙溶液，20分鐘后脫臼處死動物，剖腹摘胃置干凈的小燒杯中，加入10ml蒸餾水充分沖洗胃內容物，用5％NaHCO3溶液調pH值至6.0～6.5，以2000rpm離心10分鐘，取上清液用721型分光光度計比色(λ＝420nm)，以蒸餾水調零，測量溶液的光密度，即為胃中甲基橙光密度。并以0.1％甲基橙0.2ml加入10ml蒸餾水搖勻以測量其光密度作為基數甲基橙光密度，按下列公式計算甲基橙胃殘留率。
注A龍膽，B人參莖葉總皂苷，C大黃。 結果表明，本品復方各劑量組及拆方各組，對小鼠胃排空均有一定促進作用，同生理鹽水對照組比較以復方大、中劑量組及拆方劑A較為明顯(P＜0.05)。而其它各劑量組作用不顯著(P＞0.05)。說明本品有促進小鼠胃排空作用，以復方作用強于任何單組分或二組分，單組分中以A組分作用最強，B和C組分對A組分有微弱的協同作用。
3.對大鼠胃條的影響將大鼠禁食供水48h，擊斃，打開腹腔，剪取胃后立即放入5％CO2+95％O2混合氣體飽合的Krebs液中，剪取胃底，沿胃小彎，打開胃腔，去除粘膜，制備胃條，取2cm長的胃條，放入浴槽中固定，通入95％O2+5％CO2的混合氣體，恒溫37.5±0.5℃。連接換能器，負荷1g，將信號輸入臺式平衡記錄儀，記錄胃條的舒縮情況。穩定20min后開始給藥。按累積劑量法將10-7-10-1梯度濃度的的Ach0.1ml加入至10ml容積的溶槽中。使溶槽中Ach的濃度為10-9-10-3。記錄不同濃度Ach對大鼠胃條的反應。將20％本品水溶液0.01、0.02、0.04ml依次加入至10ml容積的浴槽中，使其浴槽濃度為2g×10-4、4g×10-4、8g×10-4。再分別按上述梯度濃度加入Ach。以Ach效應百分率為縱坐標，Ach濃度為橫坐標，繪制Ach的量效曲線。然后以水對照組Ach的最大效應為100％，計算各劑量時Ach效應百分率，觀察本品對Ach量效曲線的影響。
結果表明，隨著本品劑量增加，胃條對Ach的效應隨之減弱(P＜0.05或P＜0.01)，在實驗中發現，在Ach最大效應時，胃條處于痙攣收縮狀態，此時本品各劑量組不僅可解除痙攣，而且胃條出現自主節律性較強的收縮波，胃條張力逐漸下降，說明本品有抗胃底條Ach所致痙攣作用。
4.對家兔在體回腸平滑肌活動的影響(懸吊法)取家兔，隨機分為5組，即生理鹽水對照組，本品大劑量組、中劑量組、小劑量組及新斯的明陽性對照組。實驗時取家兔1只稱重，用烏拉坦耳緣靜脈麻醉(1g/kg)。將兔背位固定于手術臺上，剪去腹中部毛，沿腹中線做5～6cm長的切口，打開腹腔，在回盲部輕拉出5～6cm長的回腸段，將腸段兩端用縫合線固定在腸管固定管兩端上，再用一條較長的縫合線一端縫在腸段中間的腸壁上，另一端由腸管固定管中央穿出與換能器相連。然后將回腸放回腹腔內，用止血鉗封閉切口，并固定腸管固定管。用含有生理鹽水的紗布覆蓋切口。打開平衡記錄儀，先記錄一段正?；啬c蠕動曲線(5分鐘)，用溫生理鹽水(25℃)5ml/kg灌胃，繼續描記曲線，待蠕動曲線平穩后，再用各劑量藥液(25℃)以10ml/kg灌胃給藥，繼續觀察回腸蠕動曲線的變化。
結果表明，本品大劑量及中劑量組均能明顯增強回腸蠕動作用，并使腸蠕動時間持續更長，說明本品有加強回腸蠕動的作用。
5.對家兔在體腸內壓的影響取家兔，隨機分為5組，即本品大劑量組、中劑量組、小劑量組及新斯的明陽性對照組和生理鹽水對照組。取家兔一只，稱其體重，用戊巴比妥鈉30mg/kg耳緣靜脈注射麻醉，背臥位固定于手術臺上，切開腹部，結扎幽門，十二指腸給藥10ml/kg。再找到空腸，作1.5cm長的切口，將連有導尿管的水囊插入空腸內，大約2.5cm，縫合，并向水囊內注滿水，使水囊充盈適度，導尿管另端通過換能器，連于平衡記錄儀上，記錄給藥前及給藥后腸收縮頻率和收縮幅度。
結果表明，本品能使能腸蠕動增加，本品大劑量組及中劑量組腸收縮頻率及收縮幅度給藥后較給藥前顯著增加(P＜0.05或P＜0.01)，而小劑量組腸收縮頻率和收縮幅度亦明顯增加(P＜0.05)，說明本品有加強家兔空腸蠕動的作用。
6.對家兔離體腸平滑肌的影響取家兔，處死，立即剖開腹腔，取空腸和回腸上段，置入盛有充氧(含5％CO2)的冷臺式液中，沿腸壁分離腸系膜，用臺氏液將腸內容物沖洗干凈，將腸管剪成2～2.5cm的腸段。將腸管兩端穿線結扎，一端系于通氣鉤上，然后輕放恒溫麥氏浴槽中(20ml臺氏液)，另一端系于負荷2g換能器上，連接平衡記錄儀。通氣3～5個氣泡/秒，恒溫37.5±0.5℃，穩定15min后，描記一段腸肌正常運動曲線，然后依次向浴槽中滴加各種溶液0.2ml。每加藥液前均應沖腸管3次，待其恢復原狀后，再加入下組藥液，描記舒縮曲線，給藥順序為①0.01％ Ach，②本品1.25％、2.5％、5.0％，沖洗；③2.5％本品，0.1％阿托品，2.5％本品。
結果表明，本品在低濃度對腸管平滑肌有興奮作用，而高濃度卻能明顯地抑制腸運動，阿托品可以對抗本品對腸管的興奮作用。
7.本品及拆方對小鼠小腸排空的影響(墨汁法)取小鼠，劑量、分組和給藥方法同胃排空試驗。實驗時取禁食24h小鼠用50％碳素墨汁生理鹽水溶液0.3ml/10g體重灌胃。給藥后30分鐘脫臼處死，打開腹腔，剪取幽門至回盲部的腸管，輕輕將小腸拉一直線，測量其長度作為小腸總長度，從幽門至墨汁前沿的距離作為墨汁在腸內推進距離，用以下公式計算墨汁推進百分率。 結果表明，與生理鹽水對照組比較，本品各劑量組的墨汁推進距離和墨汁推進率明顯增加，而本品大劑量組及中劑量組的墨汁推進距離及墨汁推進率同對照組比較有非常顯著性的統計意義(P＜0.01)。本品小劑量組和拆方B的墨汁推進率也有顯著作用(P＜0.05)；同嗎丁啉陽性組比較，本品大劑量組的墨汁推進率和中劑量組的墨汁推進距離增強有非常顯著性差異(P＜0.01)，本品大劑量組墨汁推進距離也有一定的顯著性差異(P＜0.05)，證明本品有增強腸蠕動的作用，且復方作用強于任何單組分或二組分，各組分中以B組分作用較好，A和C組分對B組分有微弱的協同作用。胃腸分泌功能試驗胃液分泌功能試驗本品及拆方對大鼠胃液分泌量及胃液分析的影響取大鼠，雌雄各半，隨機分為11組，即本品大劑量組、中劑量組、小劑量組、甲氰咪胍組，拆方組A、B、C、A+B、A+C、B+C及生理鹽水對照組。以20ml/kg灌胃給藥三天，末次給藥后禁食24h，乙醚麻醉，沿腹中線切開約2.5cm長的切口，結扎幽門，立即十二指腸給藥一次?？p合傷口，禁食禁水，5h后脫臼處死動物，取出胃，收集胃液，以3000rpm離心15分鐘，吸取上清液計算胃液量，測量總酸度、總酸排出量、胃蛋白酶活性單位及胃蛋白酶排出量。胃酸測定用酸堿中和滴定法，胃蛋白酶用麥特氏毛細玻管測定法。
結果表明，與生理鹽水對照組比較，本品拆方A、A+B及A+C的總酸度均有不同程度的降低(P＜0.05)，總酸排出量本品拆方A及A+C降低作用較為顯著(P＜0.05或P＜0.01)；對胃蛋白酶單位各劑量組有降低作用，且本品中劑量組降低作用顯著，經T檢驗有顯著性差異(P＜0.05)；對胃蛋白酶排出量各劑量組均有降低作用，本品中劑量組及拆方A和A+C作用較為顯著(P＜0.05或P＜0.01)；對大鼠胃液分泌量各組均無抑制或促進分泌作用(P＞0.05)。綜上所述本品及拆方各組分對大鼠胃液總酸度、總酸排出量、胃蛋白酶活性單位、胃蛋白酶排出量均有降低作用，說明本品及拆方組分對大鼠胃酸、胃蛋白酶分泌量呈抑制性影響。其中復方中劑量及拆方A組分作用顯著，B和C組分對A組分有微弱的協同作用。
2.對犬胃液分泌量及其成分的影響(胃造痿法)取健康犬，雌雄各半，隨機分為5組，每組各6只生理鹽水對照組、本品大、中、小劑量給藥組和新斯的明陽性對照組。
巴氏小胃痿的制備 將犬禁食12h后，用3％戊巴經妥鈉麻醉，在無菌條件下進行胃痿的制備，將犬仰位固定于手術臺上，剪去腹部毛，常規皮膚消毒，覆蓋手術巾后，于劍突正中線上切開皮膚10cm。剖腹后，在胃大彎側離幽門口端1/3處，分離結扎胃大網膜血管供應支，造成1cm左右的無血區帶。用兩把胃鉗由此處沿胃大彎朝賁門方向夾住胃的2/3，間距1cm，在兩胃鉗中間將胃切開，但切口前沿不超過胃鉗的前端。用吸引器吸去切口表面的胃內容物，鉗夾止血。將胃鉗往切口沿方向外撤，再止血。胃切口表面用碘酒、酒精消毒。然后切開胃粘膜，但要注意不要損及其下的肌層及漿膜。將分開的胃粘膜層用絲線作內翻縫合，外層作連續縫合，此時將胃分成相互連續的大胃和小胃兩部分。其間粘膜完全分開，使神經支配和血液供應未受影響。
將小胃留作10cm的開口縫合于腹壁上，從腹壁引出胃液引流管，該管為鋼質，內口徑1.5cm，外口徑0.8cm，外端用螺口蓋封住，并定時放出小胃內留存的胃液。手術第1～4日每日將犬固定于麻醉架上，靜脈輸注林格液255ml，10％葡萄糖液250ml。術后每日為犬肌注青霉素40萬單位/只，鏈霉素0.15g/只，共計4日，以預防感染，每日消毒傷口及胃痿管外口。術后第5日供應肉湯流食，以加強營養，促進傷口愈合。待傷口愈合后進行實驗。
術后10日，動物手術傷口基本愈合，開始實驗，試驗前，禁食12h后，打開胃痿，放掉留存的胃液，隨即收集動物5h內的胃液。將犬固定于麻醉架上，經胃導管灌胃給藥，每日一次，連續5日，每次2ml/kg的給藥容積。同時注意，每日要定時放去小胃內留存的胃液，收集5h內小胃的胃液分泌量，并進行胃液分析，數據進行給藥前后自身對照及組間對照t檢驗。
結果表明，給藥5日后，新斯的明組動物胃液分泌量無明顯改變，同給藥前和對照組比較均P＞0.05，本品各劑量給藥組動物的胃液分泌量均明顯減少，與對照組比較均P＜0.01，與給藥前比較P＜0.05或P＜0.01，提示本品有減少胃液分泌量的作用。
給藥5d后本品大、中劑量組動物的胃蛋白酶活性較鹽水組明顯增加(P＜0.05或P＜0.01)，使其排出量則明顯減少(P＜0.05或P＜0.01)。新斯的明組亦有相同的結果。說明本品使犬的胃蛋白酶活性增強，但對其分泌量呈抑制作用。
與生理鹽水組和給藥前比較，本品可使犬胃游離酸、胃液總酸及胃酸總排出量明顯增加(P＜0.05或P＜0.01)，提示本品對胃酸分泌呈促進作用，與新斯的明作用相似。
腸液分泌功能試驗1.對大鼠胰液分泌量及其成分的影響取雄性大鼠，隨機分為5組，每組10只，即生理鹽水對照組，給予等容量生理鹽水，本品大、中、小劑量組，陽性對照組用補中益氣丸，各組均十二指腸給藥。將大鼠腹腔注射烏拉坦麻醉(1.0g/kg)，背位固定于手術臺上，沿腹中線切開3cm長切口，找到十二指腸，將其向左下方翻轉，找到膽胰管，在十二指腸壁處分離膽胰管約2～3mm，向胰腺方向插入細導管，結扎固定，以引流胰液。再分離膽總管，結扎肝遠端，并向肝臟方向插管，結扎固定引流膽汁，以保證從膽胰管中引流出純胰液。最后十二指腸插管以備給藥。手術完畢縫合切口，穩定20分鐘后開始給藥，從胰導管開口收集給藥后3個小時的胰液，供胰液分析，用微量吸量管計量胰液分泌量，用紫外分光光度法測定胰蛋白，按胰蛋白濃度和胰液總量計算胰蛋白排出量。
結果表明，與生理鹽水對照組比較本品各劑量組均有促進胰液分泌的趨勢，但無統計學意義(P＞0.05)。本品能顯著增加胰蛋白濃度，胰蛋白排出量(P＜0.05)，說明本品具有促進胰液分泌的作用。
2.對大鼠膽汁分泌量及其成分的影響取健康大白鼠，隨機分為5組，雌雄各半生理鹽水對照組、本品大、中、小劑量給藥組(劑量同前)和硫酸鎂溶液陽性對照組。實驗時將禁食12h的動物用3％戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，仰位固定，剖腹，暴露十二指腸，行十二指腸導管和膽總管導管插管術，給藥容積為0.2ml/100g給藥，以引流膽汁。封閉腹部，靜脈插管，恒速輸注?；悄懰徕c。穩定20min后，經十二指腸給藥，1h后收集1h內的膽汁流量。用分光光度計測定膽汁中有關成分，數據進行組間t檢驗。
硫酸鎂經十二指腸給藥，在1h內使膽汁明顯增加。與生理鹽水對照組比較，統計學意義非常顯著(P＜0.01)，本品中劑量及大劑量給藥組均使大鼠膽汁流量非常明顯增加(P＜0.01)，且增加的量均在50％以上，說明本品有明顯的利膽作用。
本品可使膽汁中膽紅素、膽固醇和膽汁粘液成份降低(P＜0.05或P＜0.01)；可使膽汁中膽酸含量增加(P＜0.05或P＜0.01)。本品大劑量組的HCO3-水平有所升高(P＜0.05)。
腸吸收功能試驗1.對小鼠不同腸段水分吸收的影響動物實驗分組及給藥劑量同前，陽性對照組為硫酸鎂，動物禁食不禁水12小時后一次灌胃給藥后2h將動物脫頸處死，剪開腹腔，暴露及分離腸管，于幽門下端結扎，剪斷；再雙結扎回盲部上端，從雙結扎線之間剪斷腸管，取出該段小腸，稱重即為小腸濕重；再于直腸末端結扎剪斷取出大腸，稱重即為大腸濕重，將腸管置于托盤中放入烤箱中，70℃烘干12小時，取出稱重即為腸管干重。腸內水分含量可用下列公式計算。

結果表明，與生理鹽水對照組比較本品各劑量組均能非常明顯減少小鼠大腸濕重(P＜0.01)，非常明顯減少大腸內水分量(P＜0.01)，對小鼠小腸內水分量影響不明顯，說明本品對小腸水分吸收無影響，但可促進大腸水分吸主。而硫酸鎂則抑制水分吸收。
2.對大鼠小腸葡萄糖吸收的影響(小腸循環灌流法)取大鼠，雌雄各半，隨機分為4組本品大劑量組、小劑量組、葡萄糖對照組及補中益氣丸陽性藥組。腹腔注射烏拉坦麻醉(1g/kg)，背臥位固定于手術板上，沿腹中線打開腹腔，分別結扎十二指腸和盲腸部位。將兩個L型管分別連接兩段長約40cm的乳膠管，一個L型管于十二指腸結扎部位下方插入腸管，該管所連結的乳膠管通過液體恒速灌流泵與恒溫水浴箱內裝灌流液容器相連(頭端插入液體內)。另一管從盲腸結扎部位上插入，該管所連的乳膠管與灌流液容器相連(頭端置于溶液上方，但不能與溶液相連)。這樣，當灌流器工作時，灌流液從十二指腸流入小腸，最后從小腸末端流出回到容器中，如此反復循環灌注。恒溫水浴箱溫度37±0.5℃。
實驗開始前，用Linger溶液清洗腸管(速度2ml/min)30分鐘。實驗時首先取10mmol/L葡萄糖-Linger溶液20ml，按上述速度循環60分鐘，分別于循環前和循環后15、30、45、60min從循環液中取10μl作為測定樣品然后將被測藥品加入另一份10mmol/L的葡萄糖-Linger溶液20ml中，按相同的方法取循環液樣品，兩次循環之間必須用Linger溶液清洗腸管30min。將各樣品測定葡萄糖含量(葡萄糖氧化酶法)。
結果表明，與10mmol/L葡萄糖組比較，補中益氣丸可明顯降低灌流液中葡萄糖含量，經t檢驗有顯著性或非常顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，說明其有促進小腸葡萄糖吸收作用，而本品大、小劑量組均有降低灌流液中葡萄糖的趨勢，但統計處理無顯著性(P＞0.05)，說明本品對大鼠小腸葡萄糖吸收影響不明顯。
結論 本品有明顯地增強胃腸運動的作用，可促進胃腸排空。對大鼠能抑制胃液分泌，降低胃液總酸度及總酸排出量和胃蛋白酶排出量，促進膽汁、胰液分泌；對犬巴氏小胃液分泌量減少，但可提高總酸度、游離酸度、蛋白酶活性。對小腸吸收葡萄糖無影響，但可促進大腸對水份的吸收。對胃排空以復方作用最強，三組分中主要是A組分起作用；對腸排空以復方作用最強，三組分中主要是B組分起作用；對胃液分泌以復方作用最強，三組分中主要是A組分起作用，三組分兩兩組合有微弱的協同作用。三、毒理研究(一)急性毒性試驗1.本品小鼠單次口服灌胃給藥半數致死量(LD50)為8.16g/kg，其95％可信限范圍為7.21g/kg～8.92g/kg。
2.小鼠單次腹腔注射給藥半數致死量(LD50)為2.26g/kg，其95％可信限范圍為2.19g/kg～2.83g/kg。
(二)長期毒性試驗大鼠每天口服灌胃給藥一次，劑量相當于推薦人用劑量的500倍，連續90天，結果表明，本品對大鼠的體重、生長發育、一般狀況、飲食、糞便、分泌物、中樞神經系統、循環系統、呼吸系統、血液學、血液生化等檢測指標均無明顯影響，系統尸檢和鏡檢，主要臟器器官均未見明顯異常病理改變，未發現明顯毒性反應和延遲性毒性反應。四、質量研究[鑒別](1)取本品，加甲醇5ml溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。另取龍膽苦苷對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各3-5μl，分別點于同一以羥甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠GF254板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(20∶2∶1)溶液為展開劑，展開，取出晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(2)取(1)項下的供試品溶液。另取人參皂苷Re、Rgl對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述溶液各3-5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，于105℃烘約10分鐘，分別置日光及紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，日光下顯相同顏色的紫紅色斑點，紫外光燈(365nm)下，顯相同的熒光斑點。
(3)取本品，加水20ml溶解，濾過，在濾液中加鹽酸4ml，置水浴(60℃)上加熱30分鐘，立即冷卻，用乙醚分2次提取，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液。另分別取大黃酚、大黃素甲醚，大黃素、蘆薈大黃素和大黃酸對照品，各加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述溶液各2-4μl，分別點于同一以羧甲基纖維素納為粘合劑的硅膠G板上，以石油醚(30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點，置氨氣中熏后，日光下檢視，斑點變為紅色。
照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VID)測定。
(1)色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；甲醇-水(35∶65)為流動相；檢測波長為270nm。理論板數按龍膽苦苷峰計算不低于1500。
對照品溶液的制備 精密稱取在50℃，減壓干燥的龍膽苦苷對照品48.0mg，置100ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取3ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
供試品溶液的制備 取本品，精密稱定，研細，精密稱取約40mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，濾過，棄去初濾液，取續濾液作為供試品溶液。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品含龍膽按龍膽苦苷(C16H20O9)計算，不得少于3.0mg。
(2)色譜條件與系統適用性試驗 用Kromasil NH2為固定相；乙腈-水(82∶18)為流動相；檢測波長為203nm。理論板數按人參皂苷Re峰計算應不低于2000.
對照品溶液的制備 精密稱取在50℃、減壓干燥的人參皂苷Re對照品14.0mg，用流動相溶解并稀釋至25ml，搖勻，精密量取4ml，置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。
供試品溶液的制備 取本品，精密稱定，研細，精密稱取約45.0mg，置10ml容量瓶中，加流加相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品含人參莖葉總皂苷按人參皂苷Re(C48H82O18)計算，不得少于3.5mg。五、穩定性研究
1.加速破壞試驗本品在溫度為38℃±1℃、相對濕度為75％±5％的條件下放置3個月，結果，各項考察指標未發生明顯變化，質量穩定。
2.室溫留樣試驗本品在室溫條件下放置24個月，結果，各項考察指標未發生明顯變化，質量穩定。六、臨床研究采用隨機、雙盲、多中心、陽性藥平行對照試驗，結果表明本品在中醫癥狀和療效等方面與陽性對照藥比較無顯著性差異(P＞0.05)，總有效率與陽性對照藥比較無顯著性差異(P＞0.05)，而不良反應發生率顯著低于陽性對照藥(P＜0.05)。
下面用實施例對本發明作進一步詳述實施例1.各組分用量為龍膽1000g、人參莖葉總皂苷25g、大黃10g。以上三味，取龍膽加70％乙醇，常溫浸提3次，每次6小時，濾過，濾液回收乙醇(50℃，0.085MPa)，濃縮物加水溶解，上樹脂柱，水洗，至無色時，換用70％乙醇洗脫(流速0.5ml/min)，收集洗脫液，回收乙醇，真空干燥(50℃，0.085Mpa)，粉碎，過篩。大黃粉碎，過六號篩，滅菌。將上述兩種細粉與人參莖葉總皂苷加適量粘合劑、崩解劑、填充劑混勻，95％乙醇制粒，加硬脂酸鎂，整粒，壓制成1000片，包薄膜衣，即得片劑。采用常規工藝，可將上述片劑制成膠囊劑、顆粒劑、丸劑。
實施例2.各組分用量為龍膽800g、人參莖葉總皂苷10g、大黃5g。以上三味，取龍膽加70％乙醇，常溫浸提3次，每次6小時，濾過，濾液回收乙醇(50℃，0.085MPa)，濃縮物加水溶解，上樹脂柱，水洗，至無色時，換用70％乙醇洗脫(流速0.5ml/min)，收集洗脫液，回收乙醇，真空干燥(50℃，0.085Mpa)，粉碎，過篩。大黃粉碎，過六號篩，滅菌。將上述兩種細粉與人參莖葉總皂苷加適量粘合劑、崩解劑、填充劑混勻，95％乙醇制粒，加硬脂酸鎂，整粒，壓制成1000片，包薄膜衣，即得片劑。采用常規工藝，可將上述片劑制成膠囊劑、顆粒劑、丸劑。
實施例3.各組分用量為龍膽1200g、人參莖葉總皂苷40g、大黃20g。以上三味，取龍膽加70％乙醇，常溫浸提3次，每次6小時，濾過，濾液回收乙醇(50℃，0.085MPa)，濃縮物加水溶解，上樹脂柱，水洗，至無色時，換用70％乙醇洗脫(流速0.5ml/min)，收集洗脫液，回收乙醇，真空干燥(50℃，0.085Mpa)，粉碎，過篩。大黃粉碎，過六號篩，滅菌。將上述兩種細粉與人參莖葉總皂苷加適量粘合劑、崩解劑、填充劑混勻，95％乙醇制粒，加硬脂酸鎂，整粒，壓制成1000片，包薄膜衣，即得片劑。采用常規工藝，可將上述片劑制成膠囊劑、顆粒劑、丸劑。
實施例4.各組分用量為龍膽900g、人參莖葉總皂苷20g、大黃15g。以上三味，取龍膽加70％乙醇，常溫浸提3次，每次6小時，濾過，濾液回收乙醇(50℃，0.085MPa)，濃縮物加水溶解，上樹脂柱，水洗，至無色時，換用70％乙醇洗脫(流速0.5ml/min)，收集洗脫液，回收乙醇，真空干燥(50℃，0.085Mpa)，粉碎，過篩。大黃粉碎，過六號篩，滅菌。將上述兩種細粉與人參莖葉總皂苷加適量粘合劑、崩解劑、填充劑混勻，95％乙醇制粒，加硬脂酸鎂，整粒，壓制成1000片，包薄膜衣，即得片劑。采用常規工藝，可將上述片劑制成膠囊劑、顆粒劑、丸劑。
實施例5.各組分用量為龍膽1100g、人參莖葉總皂苷30g、大黃15g。以上三味，取龍膽加70％乙醇，常溫浸提3次，每次6小時，濾過，濾液回收乙醇(50℃，0.085MPa)，濃縮物加水溶解，上樹脂柱，水洗，至無色時，換用70％乙醇洗脫(流速0.5ml/min)，收集洗脫液，回收乙醇，真空干燥(50℃，0.085Mpa)，粉碎，過篩。大黃粉碎，過六號篩，滅菌。將上述兩種細粉與人參莖葉總皂苷加適量粘合劑、崩解劑、填充劑混勻，95％乙醇制粒，加硬脂酸鎂，整粒，壓制成1000片，包薄膜衣，即得片劑。采用常規工藝，可將上述片劑制成膠囊劑、顆粒劑、丸劑。
實施例6.各組分用量為龍膽1000g、人參莖葉總皂苷15g、大黃10g。以上三味，取龍膽加70％乙醇，常溫浸提3次，每次6小時，濾過，濾液回收乙醇(50℃，0.085MPa)，濃縮物加水溶解，上樹脂柱，水洗，至無色時，換用70％乙醇洗脫(流速0.5ml/min)，收集洗脫液，回收乙醇，真空干燥(50℃，0.085Mpa)，粉碎，過篩。大黃粉碎，過六號篩，滅菌。將上述兩種細粉與人參莖葉總皂苷加適量粘合劑、崩解劑、填充劑混勻，95％乙醇制粒，加硬脂酸鎂，整粒，壓制成1000片，包薄膜衣，即得片劑。采用常規工藝，可將上述片劑制成膠囊劑、顆粒劑、丸劑。
權利要求
1.一種治療痞滿證(功能性消化不良)的中藥，基本上由以下重量份數的組分組成龍膽800～1200人參莖葉總皂苷10～40大黃5～20。
2.根據權利要求1所述的一種治療痞滿證(功能性消化不良)的中藥，其特征在于它可為薄膜包衣片、膠囊、顆粒劑、口服液、糖漿劑、分散片、含片、泡騰片、丸劑。
3.一種權利要求1所述一種治療痞滿證(功能性消化不良)的中藥及其制備工藝，其特征在于龍膽用70％乙醇常溫浸提3次，每次6小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮物加水溶解，上樹脂柱，水洗，至無色時，換用70％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，真空干燥，粉碎，過篩。大黃粉碎，過篩，滅菌。將上述兩種細粉與人參莖葉總皂苷加適量粘合劑、崩解劑和填充劑混勻，95％乙醇制粒，即得。
全文摘要
本發明涉及一種治療痞滿證(功能性消化不良)的中藥及其制備工藝，特別是一種適應于因消化道動力不良引起的痞滿證(功能性消化不良)的中藥及其制備工藝。它基本上由以下重量份數的組分組成龍膽800～1200;人參莖葉總皂苷10～40;大黃5～20;本發明經動物試驗，結果表明可明顯增加胃腸蠕動和排空速度、抑制胃液分泌及胃蛋白酶排出、促進膽汁及胰液分泌、提高膽酸含量、促進大腸水分的吸收，且無明顯毒性反應。臨床試驗結果表明與陽性對照藥比較中醫癥狀和總療效無顯著性差異，但不反應發生率明顯低于陽性對照藥。
文檔編號A61P1/14GK1425440SQ0215976
公開日2003年6月25日 申請日期2002年12月28日 優先權日2002年12月28日
發明者劉孝樂, 朱丹 申請人:南昌弘益科技有限公司