專利名稱：一種復方斑蝥總提取物制劑及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種復方斑蝥總提取物制劑及其制備方法，屬于中藥制藥 技術領域。
背景技術：
中藥注射制劑是以中藥材為原料，經提取、分離、精制等步驟制成的滅 菌制劑。它改變了中藥傳統的給藥方式，具備藥效迅速，生物利用度高，劑量更準確，適用于 不宜口服或急重癥的病例，并可使某些藥物發揮定向或定位給藥等特點，較好地發揮了中 藥治療急病重癥及疑難病的作用。但是，隨著臨床應用的日益增多，中藥注射劑引起藥物不 良反應的事件屢有發生，已引起廣大醫藥工作者的關注。中藥注射制劑發生不良反應的主 要原因在于中藥注射劑原料的化學成份十分復雜，其中一些高分子化合物，如鞣質、動植 物蛋白極易引起過敏反應；另外，由于中藥注射劑的生產工藝有欠成熟，造成個別批號藥液 純度欠佳，進而引起過敏反應。復方斑蝥由斑蝥、人參、黃芪、刺五加、三棱、半枝蓮、莪術、山茱萸、女貞子、熊膽 粉、甘草共十一味藥物組成，具有破血消瘦、攻毒蝕瘡的作用，臨床上主要用于治療原發性 肝癌、肺癌、直腸癌、惡性淋巴瘤、婦科惡性腫瘤等，其中復方斑蝥膠囊為《國家衛生部藥品 標準》中藥成方制劑第十七冊收載品種。目前公開的復方斑蝥藥材提取工藝有很多，大致方 法有方中君藥斑蝥的提取有粉末直接入藥、氯仿浸泡提取或氯仿滲漉法提取；人參、山茱 萸、女貞子、半枝蓮四味藥材或粉碎成細粉入藥，或采用水提/醇提方法獲得清膏濃縮液; 黃芪等五味加水煎煮濃縮成稠膏；熊膽粉加水溶解。但是經研究發現，上述劑型工藝中還存 在藥物直接入藥導致雜質含量高、藥液中成分變化不穩定、制備工藝中有效成分提取分離 不完善等缺點，不利于產品的質量控制；另外采用氯仿提取藥材，生產安全性差，對環境影 響大；同時由于有效藥物成分損失多，收率低，也使得大量具有抗腫瘤作用的多糖成分沒有 得到利用。本申請人在研究的過程中發現將方中斑蝥藥材采用醇提或者水提，熊膽粉直接入 藥，其余九味藥材先用水提或醇提得到粗提取物，然后進行有機溶劑萃取、大孔樹脂吸附、 多次醇沉或者中空纖維柱超濾純化有效成分。上述工藝引入了藥材中所含有的大量多糖， 使療效有所提高，但是其對多糖沒有有效截留，這是由于多糖的分子量范圍很大，極小分子 的多糖藥用效率低，大分子量的多糖在注射給藥中又容易引起不良反應；同時在大孔樹脂 洗脫純化步驟中，樹脂的選擇、洗脫液的選擇、洗脫速度的控制都極大地影響了對有效成分 的獲取。所以探索一種可行有效的中藥注射制劑的制備方法，以提高療效，降低中藥注射制 劑的不良反應是醫藥工作者要解決的問題。

發明內容
本發明的目的在于提供一種復方斑蝥總提取物制劑及其制備方法。本發明將藥 材分別進行醇、水分提，然后采用無機陶瓷膜微濾、有機膜超濾等膜分離技術結合樹脂精制 處理相結合的方法對提取液進行純化、分離和濃縮，富集有效成分，濾除雜質，從而降低了 藥品的不良反應，提高了療效。本發明所述復方斑蝥總提取物制劑是從斑蝥、人參、黃芪、刺五加、三棱、半枝蓮、莪術、山茱萸、女貞子、熊膽粉、甘草中提取出的具有藥用價值的提取物制成的制劑。按照重量配比計算，復方斑蝥總提取物制劑是用斑蝥4-12份、人參10-30份、黃芪 50-150份、刺五加50-150份、三棱16-48份、半枝蓮60-180份、莪術16-48份、山茱萸20-60 份、女貞子20-60份、熊膽粉0. 4-1. 2份、甘草10-30份按制成。優選的配比為斑蝥7. 9份、人參19. 8份、黃芪99. 2份、刺五加99. 2份、三棱31. 7 份、半枝蓮119份、莪術31. 7份、山茱萸39. 7份、女貞子39. 7份、熊膽粉0. 8份、甘草19. 8 份其中復方斑蝥提取物是按下述方法制成的步驟1)斑蝥粉碎成粗粉，用75% -95%的乙醇超聲提取，提取液用水進行沉淀，過 濾，濾液高速離心，離心液濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步驟幻取人參切片，用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，得人參提取液備用；藥渣 與除熊膽粉外的黃芪等七味藥材共水提取，提取液與人參醇提液混合，濃縮，過濾，精制，得 總皂苷提取物；步驟幻刺五加粉碎，用60%-80%的乙醇回流提取，合并提取液，回收乙醇，濃縮， 無機膜過濾，樹脂精制，得刺五加總苷提取物；步驟4)將上述刺五加總苷提取物、人參等共9味的總皂苷提取物混合均勻，用有 機膜進行超濾，然后與斑蝥素提取物混合，再加入熊膽粉混勻，即得復方斑蝥總提取物。具體的制備方法為步驟1)取斑蝥，粉碎成40-60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入6-10倍量 75% -95%的乙醇浸泡30-40分鐘后超聲振蕩提取，時間20-40分鐘，頻率30_50Hz，提取 2-3次，合并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入6-10倍量的水，攪拌，靜置，過 濾，濾液以10000轉/分以上的速度離心10-20分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥 素提取物；步驟2)取人參切片，用60%-90%乙醇浸泡10-14小時，然后回流提取2-4次，每 次加入乙醇6-10倍量、提取0. 5-2小時，合并提取液，回收乙醇，得人參醇提取液備用；藥渣 與除熊膽粉外的黃芪等七味藥材加4-6倍量水提取2-4次，每次0. 5-2小時，合并提取液， 與人參醇提取液混合，適當濃縮，無機陶瓷膜進行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以 每秒0. 5-2ml過柱，用1-5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用1_5倍柱體積0. 05-0.2% NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調PH至4-6，得總皂苷提取物；步驟幻刺五加粉碎，用60%-80%乙醇回流提取2-4次，每次加入乙醇6-10倍量、 提取0. 5-2小時，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，無機陶瓷 膜進行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒0. 5-2ml過柱，用1-5倍柱體積去離子 水洗脫，收集藥液，用1-5倍柱體積0. 05-0. 2% NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調PH至4_6，即 得刺五加總苷提取物；步驟4)將上述刺五加總苷提取物、人參等共9味的總皂苷提取物混合均勻，用有 機膜進行超濾，然后與斑蝥素提取物混合，再加入熊膽粉混勻，即得復方斑蝥總提取物。優選的制備方法為步驟1)取斑蝥，粉碎成60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入8倍量85%的乙醇 浸泡30分鐘后超聲振蕩提取，時間30分鐘，頻率30-50HZ，提取3次，合并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入8倍量的水，攪拌，靜置，過濾，濾液以10000轉/分以上的速 度離心15分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步驟2)取人參切片，用80%乙醇浸泡12小時，然后回流提取3次，每次加入乙醇 8倍量、提取1小時，合并提取液，回收乙醇，得人參醇提取液備用；藥渣與除熊膽粉外的黃 芪等七味藥材加5倍量水提取3次，每次1小時，合并提取液，與人參醇提取液混合，適當濃 縮，無機陶瓷膜進行過濾，過濾時分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后 的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒Iml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱 體積0. 1 % NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調PH至5，得總皂苷提取物；步驟幻刺五加粉碎，用70%乙醇回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取1小 時，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，無機陶瓷膜進行過濾， 過濾時分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱， 以每秒Iml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱體積0. 1 % NaOH溶液洗 脫，收集洗脫液調PH至4-6，即得刺五加總苷提取物；步驟4)將上述刺五加總苷提取物、人參等共9味的總皂苷提取物混合均勻，用有 機膜進行超濾，然后與斑蝥素提取物混合，再加入熊膽粉混勻，即得復方斑蝥總提取物。本發明的復方斑蝥總提取物制劑可以根據需要加入一種或多種藥學上可以接受 的載體，如稀釋劑、賦形劑、填充劑、崩解劑、濕潤劑、粘合劑、表面活性劑、吸收促進劑、潤滑 劑等等，按照藥學領域的常規方法，制備需要的劑型。本發明所述的復方斑蝥總提取物制劑包括膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液、丸劑、水 針、輸液、粉針和凍干粉針制劑等。優選為膠囊劑。中藥材提取液的組分復雜，其中除了有效成分外還含有大量的雜質，各組分的結 構不同，分子大小也不一樣，使用膜技術(包括超濾膜、微濾膜、半透膜、反滲透膜等)可以 在原生物體系環境下實現物質分離，可以高效濃縮富積產物，有效脫出雜質。陶瓷膜微濾 是以新型無機陶瓷膜為濾過介質的一種高效、節能、無污染的新型分離技術，具有分離精度 高，化學性質穩定，富集產物或濾除雜質效率高，無需加熱濃縮、藥效成分不被破壞，縮短生 產周期，提高生產效率等優點；樹脂純化是近年來國內外新發展的處理技術，并在醫藥領域 特別是天然藥物精制中廣為運用，是提取精制中草藥中水溶性有效成分的一種有效方法。 因此，本發明采用無機陶瓷膜、聚酰胺樹脂和有機膜相結合的方法純化精制中藥注射制劑， 其特點為用物理方法取代了傳統的化學方法，可有效除去中藥提取液中的大分子物質，同 時不引入其它的無機離子，較好地保持了中藥復方制劑的特點，能有效降低藥物的不良反 應。本發明所述的技術方案是申請人經過大量試驗研究而獲取的，主要試驗內容如 下實驗例1、提取工藝分析1. 1刺五加提取工藝原艾迪注射液的工藝是將刺五加與黃芪等共同煎煮，本發明人將刺五加單獨進行 處理，與原方法進行比較，結果發現將刺五加單獨提取更有利于后續工藝處理。1.1.1提取方法選擇取刺五加藥材，分別采用加水煎煮、乙醇回流兩種方法進行提取，以含量、提取液色澤、澄明度為指標，考察藥材的提取率。水提、醇提刺五加效果評價表
工藝色澤含量(mg/L)澄明度水提深棕褐色768渾濁醇提棕紅1216澄明結果表明，采用醇提工藝，提取液經處理后澄明度較好、色澤較淺，淺棕紅色；而水 提的刺五加在澄明度、色澤、含量等方面均較差，色澤較深，淺褐色。故選擇醇提。1.1.2提取工藝研究提取溶媒的加入量，提取時間和次數是影響提取工藝的重要因素，以紫丁香苷含 量為指標，對以上參數進行考察，以優選最佳工藝條件。a.乙醇濃度考察樣品制備取刺五加藥材50g，粉碎，按下表濃度加入乙醇溶液，加熱回流3次，每 次1小時，合并回流液，濾過。乙醇濃度考察表
乙醇濃度50%60%70%80%90%含量(mg/L)8621174121312201225表中數據顯示，乙醇濃度為60% -80%時紫丁香苷幾乎已經提取完全，其中70% 濃度為最佳，比較經濟合理。b.提取時間考察取刺五加藥材50g共6份，切片，同等乙醇量分別加熱回流0. 5、1、1· 5、2、2· 5、3小 時，濾過，定容至一定體積，取樣測定。結果如下提取時間考察表
提取時間0. 511. 522. 53含量(mg/L)95210831135115711761181由表中數據可看出，提取2小時后，紫丁香苷含量無明顯改變，說明刺五加提取2 小時后，物質的溶出已趨于飽和。考慮到實際生產效率，優選提取時間為1小時。c.乙醇用量的考察樣品制備取刺五加藥材50g共3份，依下表條件加入不同量70%乙醇，加熱回流 3次，每次1小時，濾過，收集濾液。結果如下乙醇用量考察表
權利要求
1.一種復方斑蝥總提取物制劑，按照重量配比計算，它是用斑蝥4-12份、人參10-30 份、黃芪50-150份、刺五加50-150份、三棱16-48份、半枝蓮60-180份、莪術16-48份、山 茱萸20-60份、女貞子20-60份、熊膽粉0. 4-1. 2份、甘草10-30份制成，其特征在于其中 復方斑蝥總提取物是按下述方法制成的步驟1)斑蝥粉碎成粗粉，用75% -95%的乙醇超聲提取，提取液用水進行沉淀，過濾， 濾液高速離心，離心液濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步驟幻取人參切片，用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，得人參提取液備用；藥渣與除 熊膽粉外的黃芪等七味藥材共水提取，提取液與人參醇提液混合，濃縮，過濾，精制，得總皂 苷提取物；步驟3)刺五加粉碎，用60%-80%的乙醇回流提取，合并提取液，回收乙醇，濃縮，無機 膜過濾，樹脂精制，得刺五加總苷提取物；步驟4)將上述刺五加總苷提取物、人參等共9味的總皂苷提取物混合均勻，用有機膜 進行超濾，然后與斑蝥素提取物混合，再加入熊膽粉混勻，即得復方斑蝥總提取物。
2.按照權利要求1所述的復方斑蝥總提取物制劑，其特征在于按照重量配比計算，它 是用斑蝥7. 9份、人參19. 8份、黃芪99. 2份、刺五加99. 2份、三棱31. 7份、半枝蓮119份、 莪術31. 7份、山茱萸39. 7份、女貞子39. 7份、熊膽粉0. 8份和甘草19. 8份制成的。
3.按照權利要求1或2所述復方斑蝥總提取物制劑，其特征在于所述復方斑蝥總提 取物的制備方法為步驟1)取斑蝥，粉碎成40-60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入6-10倍量75 % -95 % 的乙醇浸泡30-40分鐘后超聲振蕩提取，時間20-40分鐘，頻率30-50HZ，提取2_3次，合 并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入6-10倍量的水，攪拌，靜置，過濾，濾液以 10000轉/分以上的速度離心10-20分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步驟2)取人參切片，用60% -90%乙醇浸泡10-14小時，然后回流提取2-4次，每次加 入乙醇6-10倍量、提取0. 5-2小時，合并提取液，回收乙醇，得人參醇提取液備用；藥渣與除 熊膽粉外的黃芪等七味藥材加4-6倍量水提取2-4次，每次0. 5-2小時，合并提取液，與人 參醇提取液混合，適當濃縮，無機陶瓷膜進行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒 0. 5-2ml過柱，用1-5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用1_5倍柱體積0. 05-0. 2% NaOH 溶液洗脫，收集洗脫液調PH至4-6，得總皂苷提取物；步驟幻刺五加粉碎，用60% -80%乙醇回流提取2-4次，每次加入乙醇6-10倍量、提 取0. 5-2小時，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，無機陶瓷膜 進行過濾，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒0. 5-2ml過柱，用1-5倍柱體積去離子水 洗脫，收集藥液，用1-5倍柱體積0. 05-0. 2% NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調PH至4_6，即得 刺五加總苷提取物；步驟4)將上述刺五加總苷提取物、人參等共9味的總皂苷提取物混合均勻，用有機膜 進行超濾，然后與斑蝥素提取物混合，再加入熊膽粉混勻，即得復方斑蝥總提取物。
4.按照權利要求3所述復方斑蝥總提取物制劑，其特征在于所述復方斑蝥總提取物 的制備方法為步驟1)取斑蝥，粉碎成60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入8倍量85%的乙醇浸泡30分鐘后超聲振蕩提取，時間30分鐘，頻率30-50HZ，提取3次，合并提取液，靜置，過濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入8倍量的水，攪拌，靜置，過濾，濾液以10000轉/分以上的速 度離心15分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步驟2、取人參切片，用80%乙醇浸泡12小時，然后回流提取3次，每次加入乙醇8倍 量、提取1小時，合并提取液，回收乙醇，得人參醇提取液備用；藥渣與除熊膽粉外的黃芪等 七味藥材加5倍量水提取3次，每次1小時，合并提取液，與人參醇提取液混合，適當濃縮， 無機陶瓷膜進行過濾，過濾時分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的 藥液直接上聚酰胺柱，以每秒Iml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱體 積0. 1 % NaOH溶液洗脫，收集洗脫液調PH至5，得總皂苷提取物；步驟3)刺五加粉碎，用70%乙醇回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取1小時，合 并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；將初提取液濃縮，無機陶瓷膜進行過濾，過濾時 分多次加入2-3倍藥液體積量的水洗滌有效成分，過濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒 Iml過柱，用2倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用2倍柱體積0. 1 % NaOH溶液洗脫，收集 洗脫液調PH至4-6，即得刺五加總苷提取物；步驟4)將上述刺五加總苷提取物、人參等共9味的總皂苷提取物混合均勻，用有機膜 進行超濾，然后與斑蝥素提取物混合，再加入熊膽粉混勻，即得復方斑蝥總提取物。
5.按照權利要求1所述復方斑蝥總提取物制劑，其特征在于所述的復方斑蝥總提取 物制劑包括膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液、丸劑、水針、輸液、粉針和凍干粉針制劑。
6.按照權利要求按照權利要求5所述復方斑蝥總提取物制劑，其特征在于所述的復 方斑蝥總提取物制劑為膠囊劑。
全文摘要
本發明公開了一種復方斑蝥總提取物制劑及其制備方法，它是用斑蝥4-12份、人參10-30份、黃芪50-150份、刺五加50-150份、三棱16-48份、半枝蓮60-180份、莪術16-48份、山茱萸20-60份、女貞子20-60份、熊膽粉0.4-1.2份、甘草10-30份，將斑蝥醇提離心，人參、黃芪等分別進行醇、水分提，提取液經濃縮，無機陶瓷膜微濾，聚酰胺樹脂精制，再用有機膜進行超濾，然后與斑蝥的提取液混合，再加入熊膽粉制成的不同制劑。與現有技術相比，本發明將藥材分別進行醇、水分提，采用膜分離技術與樹脂精制處理相結合的方法對提取液進行純化、分離和濃縮，富集有效成分，有效除去中藥提取液中的大分子物質，較好地保持了中藥復方制劑的特點，有效降低了藥物的不良反應，從而提高和保證了產品的質量。
文檔編號A61K35/413GK102078560SQ20091010289
公開日2011年6月1日 申請日期2009年11月26日 優先權日2009年11月26日
發明者竇啟玲 申請人:貴州益佰制藥股份有限公司